Способ определения концентрации стероидов

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (11) 569298 (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 10.12.74 (21) 2095206/25 (23) Приоритет (32) 11.12.73 (31) 57433/73 (33) Великобритания (43) Опубликовано 15.08,77. Бюллетень № 30 (45) Дата опубликования описания15.07.77 (51) М. Кл. G01N33/16

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР во делам изобретений и открытий (53) УДК 543.8 (088.8) (72) Авторы изобретения

И но жранцы

Расселл Джеймс Вейли, Вирджиния Эдит Мэй Чеймберс и Реджинальд Монкс (Великобритания) Иностранная фирма

"ДЗЕ Радиокемикал СЕНТР Лимитед» (Великобритания) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ СТЕРОИДОВ

Изобретение относится к медицине, в частности, диагностике с помощью соединений, меченых ра.диоактивными изотопами.

Известен способ определения гормонов щитовидной железы в сьворотке, заключающийся в том, 5 что пробу подкнсляют, смешивают с неорганическим кристаллическим сорбентом, отделяют и путем подщелачивания переводят в раствор гормона, меченый радиоактивным нзотопом, удаляют свободный тироксин и измеряют активность (1) . 10

Известен также способ определения концентраеии гормонов в пробе, заключающийся в проведении реакции анализируемого соединения в пробе с его производной, меченой радиоактивным изото- 15 пом, в присутствии реагента, концентрация которого недостаточна для связьвання анализируемого соединения и его производной, отделении связанного соединения от несвязанного и измерении их радиоактивности, по которым рассчитьвают кон- 20 центрацию анализируемого соединения в пробе (2).

Известные способы определения концентрации гормонов в пробе могут быть применены с большими ограничениями для определения концентрации стероидов, в частности, из-за использования произ- ц водных, меченых радиоактивными изотопами угле рода — 14, йода — 125, йода — 131 и тритием.

Для повышения точности анализа по предлагаемому способу в качестве радиоактивной метки производных стероидов используют изотоп селен — 75.

Для определения концентрации стероидов образуют смесь нэ пробы, производной стероидов меченых радиоактивным изотопом селен-75 и реагента, концентрация которого. недостаточна для соединения с общим количеством стероидного соединения и его проиэволной. В результате реакции часть стероидного соединения и часть его производной образуют с реагентом связанный комплекс.

Полученный связанный комплекс отделяют от несвязанного стероидного соединения и его производной. Затем изменяют радиоактивную концентрацию связанного комплекса или несвязанного стероидного соединения и его производной. Из результатов измерений определяют концентрацию стероидов в пробе.

Экспериментальный набор для проведения ан лиза на кортизол в человеческой сыворотке или плазме содержит: 25 ампул, содержзщих одно и то же количество гранул абсорбента и тот же объем

569298

Составитель Г. Савельев

ХехРед М Лееидкая

Корректор Б. 1Огас

Тираж 1101 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 2027 694

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, уп. Проектная, 4 буферного раствора корппь-транскортизона, мече. ного селеном — 75; четыре ампулы с лиофилиэованной человеческой сывороткой, содержащие номинально 2,5; 7,0; 18,5 и 50мкг кортизола на

100 мл; 25 стеклянных трубок для тепловой денатурации; бланки для фиксации результатов.

Пробы сыворотки сначала разбавляют водой и нагревают в стекияящх трубках для денатурации

Эидогенного картизольного собдиненйя протеина (кортиж транс) и освобождения кортизола.

Аликвотную пробу разбавленной денатурированной сыворотки вводят в ампулу, которая содержит: меченный селеном-75 кортизол, связанный с кортиком - транс, и гранулы адсорбеита. Затем аьп1улу вращают, чтобы произвести суспендироваsac гранул и получить смесь. Кортизол из сыворотки и меченный селеном-75 кортизол конкурируют при сэяэывании с кортиком-транс.. Свободная фракция одновременно распределяется между граиулами и ва1лывающей жидкостью. В состоянии равновесия гранулы можно устаналивать на место и аликвотную пробу всплывающей жидкости берут нв

° нализ. Ряд кортизольных стандартов человеческой

Ьыворотки обрабатывают тем же способом, чго и,неизвестные пробы. сыворотки, чтобы произвести зине. сение результатов калибровки, из которых значения пля неизвестных можно синтерполировать.

Формула изобретения

Э

Способ определения концентрации стероидов в пробе, заключающийся в проведении реакции анализируемого соединения в пробе с его производной, меченной радиоактивнььа изотопом, в присутствии реагента, концентрация которого недостаточна для связывания анализируемого соединения и el î про. изводной, отделении связанного соединений от несвязанного и измерении их радиоактивности, по которым . рассчитывают концентрацию аналиэи. руемого соединения в пробе, отличающийся тем, что, с целью повышенная точности анализа, в качестве радиоактивного изотопа используют иэогоп селен-75.

Источники информации1 принятые во внимание при экспертизе:

1. Патент ФРГ У226455, кл. 6 01 N 33/16, опублик. 1973.

Р. Патент ФРГ Р2037087, кл. 601 N 33/1б, Ппублик..1971.: