Способ электрофоретического анализа белков

 

ОПИСАНИЕ

ИЗО БРЕТ ЕН И Я

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1»1 561898

Союз Советских

Соцмммст@98cKNx

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 09.12.74 (21) 2082316/25 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 15.06,77. Бюллетень <¹ 22

Дата опубликования описания 26.07.77 (51) М. Кл."- G 01N 27/26

Государстеенный комитет

Совета Министроа СССР па делам изобретений и открытий (53) УДК 543.275(088.8) (72) Авторы изобретения

Л. И. Стекольников, Д. Г. Чукаева, Г. Е. Цимаркина и Л. В. Александрова

Всесоюзный научно-исследовательский институт мясной промышленности (71) Заявитель (54) СПОСОБ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОГО

АНАЛИЗА БЕЛКОВ

Изобретение относится к изучению свойств и состава различных биологических объектов, связанных с производством продуктов питания, оценкой новых способов технологической обработки сырья, с производством лечебных препаратов.

Известен способ электрофоретического анализа смесей веществ, заключающийся в разделении смесеи на бумаге ь электричсс!том поле, фиксации фракций нагревом, окраске и отмывке фона (1).

Недостатком способа является длительность анализа и абсорбия разделяемых веществ бумагой.

В качестве прототипа взят способ электрофоретического анализа смесей веществ, заключающийся в разделении смеси на пленках из ацетата целлюлозы в электрическом поле, фиксации разделенных фракций нагревом или обработкой растворителями, окрашивании, отмывке фона и регистрации разделенных компонентов (2).

Недостатком известного способа является длительность анализа и разрушение ацетатной пленки при фиксации и окраске.

Целью изобретения являются улучшение качества элсктрофореграмм и сокращение продолжительности анализа. Г1оставленная цель достигается тем, что окрашивание пленок проводят раствором красителя в смеси с трихлоруксусной и сульфосалицпловой кислотами, взятыми в концентрации 1 — 3%.

Пример. Ацетатные пленки пропитывают мединал-цитратным буфером, рН 8,7, промо5 кают между листами фильтровальной бумаги, помещают в электрофоретическую камеру, в электродные отделения которой заливают буферный раствор того же состава. Камеру закрывают крышкой и пропускают ток в тече10 ние 10 мин при градиенте напряжения

15 В/см, после чего камеру отключают от источника питания и с помощью дозатора наносят образцы исследуемой смеси в количестве 0,005 мл. Затем камеру закрывают крыш15 кой, подключают к тому же источнику питания на 20 — 30 мин при этом же электрическом режиме и проводят разделение смеси белков. По окончании электрофореза пленки извлекают из камеры и окрашивают раство20 ром 1%-ного амидочерного красителя в смеси с равными объемами 3%-ных растворов трихлоруксусной и сульфосалициловой кислот в течение 10 мин.

Использование в качестве окрашпваюц;его

25 раствора смеси равных объемов 3 (О-ного раствора трпхлоруксусной и сульфосалициловой кислот исключает операци:о фиксации разделенных фракций.

При этом отсутствие в окрашивающем рас30 творе уксусной кислоты обеспечивает непроч561898

Формула изобретения

Составитель Н. Строганова

Текред 3. Тараненко Корректор И. Позняковская

Редактор Л. Попова

Заказ 1949/8 Изд. М 550 Тираж 1109 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ную связь красителя с самими пленками, и фон легко и быстро в течение 10 — 15 мин отмывается смесью уксусной кислоты, метилового спирта и воды, взятыми в соотношении

1: 5: 4.

Затем пленки споласкивают дистиллированной водой и высушивают между листами фильтровальной бумаги или на воздухе.

Более разбавленный в отношении спирта отмывочный раствор, действующий в течение

5 — 10 мин, не изменяет свойств пленки и позволяет сохранять ее длительное время.

Количественная обработка результатов анализа может проводиться на мпкроденситометре или путем колориметрирования растворов после элюции окрашенных участков электрофореграмм.

Способ электрофоретического анализа белков, заключающийся в разделении смеси белков на пленках из ацетата целлюлозы, фиксации фракций, окрашивании, отмывке фона и регистрации разделенных компонентов, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью сокращения продолжительности анализа и улучшения ка10 чества электрофореграмм, окрашивание пленок проводят раствором красителя в смеси с трихлоруксусной и сульфосалициловой кислотами, взятыми в концентрации 1 — 3%.

Источники информации, принятые во вни15 мание при экспертизе:

1. Патент ЧССР г:з 94567, кл. 42L 3/06, опубл. 1969.

2. Журнал «Clinical Chem» 5, М 3, 1963.

Способ электрофоретического анализа белков Способ электрофоретического анализа белков 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к электрохимическим методам анализа с использованием ионоселективных электродов и может быть использовано для повышения чувствительности и селективности способа

Изобретение относится к электроаналитической химии, а именно к способу определения мышьяка (III), включающему концентрирование мышьяка на поверхности стеклоуглеродного электрода в растворе кислоты с последующей регистрацией аналитического сигнала, при этом концентрирование мышьяка (III) проводят на поверхности стеклоуглеродного электрода, покрытого золотом, в растворе до 3,0 M в интервале потенциалов -0,40-(-0,45)B в течение 1-10 мин с последующей регистрацией производной анодного тока по времени при линейной развертке потенциала

Изобретение относится к области электрохимии, электрохимических процессов и технологий в части измерения потенциала электродов под током, а именно к способу измерения потенциала рабочего электрода электрохимической ячейки под током, основанному на прерывании электрического тока, пропускаемого между рабочим и вспомогательным электродами, и измерении текущего потенциала рабочего электрода, при этом процесс измерения текущего потенциала Eизм рабочего электрода производят относительно электрода сравнения непрерывно по времени t, затем по измеренным значениям потенциала рассчитывают первую производную от зависимости изменения текущего потенциала рабочего электрода от времени: (t)=Eизм

Изобретение относится к способу получения активированных кислого и щелочного растворов, включающему электрохимическое разделение водного раствора электролита, при этом электрохимическому разделению подвергают мочу животных и/или человека
Изобретение относится к адсорбции компонентов, а именно к способу адсорбционного концентрирования необратимо адсорбирующихся на металлах соединений путем наложения электрического поля в электрохимической ячейке, при этом перед концентрированием проводят адсорбцию на жидкометаллическом электроде из раствора, содержащего адсорбируемые соединения, при интенсивном перемешивании и потенциале электрода, обеспечивающем необратимую адсорбцию, а концентрирование после отстаивания осуществляют путем сокращения поверхности электрода с необратимо адсорбируемыми соединениями при переводе электрода из ячейки в капилляр. Изобретение относится к анализу материалов с помощью оптических методов путем адсорбции компонентов
Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к области аналитической электрохимии, и может быть использовано при определении свойств грунтов, горных пород, строительных материалов, а также свойств поверхностей раздела фаз

Изобретение относится к составу полупроводниковых материалов, используемых в адсорбционных сенсорах для обнаружения и количественной оценки концентрации низкомолекулярных органических соединений, преимущественно кетонов в выдыхаемом людьми воздухе, и к технологии изготовления таких полупроводниковых материалов
Наверх