Способ получения винбластина, винлейрозина и винкристина

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

<п 448649

Сааа Советских

Социалистических

Реслублик (61) Зависимый от патента (51) М. Кл. С 07g 5/00

А 611с 27/14 (22) Заявлено 29.09.71 (21) 1703450/31-16 (31) (32) Приоритет (33) Государственный комитет

Совета министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 615.45:615.7 (088.8) Опубликовано 30.10.74. Бюллетень № 40

Дата опубликования описания 20.01.76 (72) Авторы изобретения

Иностр анцы

Карола Еванович, Эмил Биттнер, Эстер Дешери, Янош Элес и Кальман Шаш (BHP) Иностранное предприятие

«Рихтер Гедеон Вегешети Дьяр P. T.» (BHP) (7i) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВИНБЛАСТИНА, ВИНЛЕЙРОЗИНА

И ВИНКРИСТИНА

Изобретение относится к области медицины, а именно к производству лекарственных препаратов.

Известен способ получения алкалоидов из растительного сырья (Vinca rosen), согласно которому сырье предварительно обрабатывают кислотой, экстрагируют 50 — 70%-ным водным раствором метанола, упаривают, подкисляют, фильтруют, повторно обрабатывают несмешивающимся с водой растворителем, выпаривают. Остаток, содержащий сумму алкалоидов, обрабатывают бензолом, хроматографируют на окиси алюминия, элюируют смесью бензол — метиленхлорид, фракционируют с последующей перекристаллизацией целевых продуктов из этанола.

Однако технология такого способа сложна, а выход целевых продуктов недостаточно высок.

Целью изобретения является разработка способа, позволяющего упростить технологию получения винбластина, винлейрозина и винкристина и повысить выход целевых продуктов.

Достигается это тем, что сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4 — 5), кристаллизацией, растворением в смеси хлористый метилен — хлороформ (2: 1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами.

Пример 1. 100 кг высушенного, состоя5 щего в основном из листьев, измельченного растения Vinca rosea L. Canillaranthus roseus

G. Don выщелачивают три раза 90%-ным водным раствором метанола: один раз — порцией 600 л, и дважды — порциями по 400 л. От1п фильтрованные и объединенные метанольные экстракты сгущают при пониженном давлении до 140 — 150 л, после чего подкисляют одинаковым объемом 5%-ного раствора серной кислоты в воде до рН вЂ” 2 и отфильтровывают

15 обра овавшийся осадок темного цвета. Отфильтрованный кислый водный раствор трижды выщелачиван т бензолом порциями по

500 л.

После этого при помощи концентрированно20 ro водного раствора гидроокиси аммония устанавливают рН 8,5 — 9,0. Затем выщелачивают щелочной водный раствор три — четыре раза бензолом порциями по 600 л. Соединенный бензольный раствор сушат на безводном суль25 фате натрия или карбонате кальция, отфильтровывают и выпаривают при пониженном давлении. Получают около 700 г коричневой смеси алкалоидов с рыхлой структурой.

Алкалоидную смесь растворяют в этаноле, з содержащем 10% серной кислоты, величина

448649 рН раствора должна быть 4,0 — 5,0. Раствор выпаривают, выпадение кристаллов сульфата виноластина начинается после обработки щеткой стенки сосуда. Кристаллизацию продолжают в течение двух дней при комнатной температуре, а затем отфильтровывают осажденные кристаллы на стеклянном фильтре.

В зависимости от качества лекарственного растительного сырья выход составляет 20—

1и0 г смеси кристаллов, состоящей из сульфата винбластина, винлейрозина, винкристина и сульфатов сопутствующих алкалоидов. Смесь кристаллов сырых алкалоидных сульфатов растворяют в смеси, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотношении 2: 1, а именно 7 мл на 1 г. Этот раствор хроматографируют на колонке, наполненной стократным количеством А1 0з, частично дезактивированной водой, и после этого элюируют смесью, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотношении 2: 1. Улавливают фракции по

30 — 50 мл, Первые три фракции содержат преобладающую часть сопутствующих алкалоидов. Винбластин и винлейрозин получают во второй †девят фракциях. Винкристин начинает появляться в 9-й фракции и элюируется до 18-й фракции. Содержащие винбластин, винлейрозин и вин кристин фракции, идентифицированные методом хроматографии на бумаге и тонкослойной хроматографии, отдельно выпаривают досуха. Выход 15 — 75 г винбластина и винлейрозина и 0,6 — 3,0 r винкристина в аморфном сухом остатке.

Содержащий винбластин и винлейрозин сухой остаток растворяют в 15-кратном количестве водного этанола. Винлейрозин выкристаллизовывают и отфильтровывают, промывают и сушат. Выход в зависимости от качества сырого продукта 5 — 17 г винлейрозина. iочка текучести 202 — 205 С jaj „. + 72" (13) .

Маточный раствор винлейрозина, который содержит только винбластин, разбавляют безводным этанолом до двукратного объема и рН раствора устанавливают 4 при помощи раствора серной кислоты в этаноле. Кристаллизацию сульфата винбластина начинают во время добавки раствора серной кислоты в этаноле. Затем проводят кристаллизацию 16 час в холодильном шкафу. Выход, в зависимости от качества сырья, 15 — 70 г сырого сульфата винбластина.

Высушенный и распыленный сырой сульфат винбластина растворяют при комнатной температуре в 20-кратном количестве безводного метанола и к фильтрованному раствору добавляют четырехкратный объем безводного этанола. Для полной кристаллизации винбластина раствор выдерживают в течение 16 час в холодильнике. При перекристаллизации можно достигнуть 90 -ного выхода. Выход, в зависимости от качества сырья, 13 — 63 r сульфата винбластина; (а) = — 28 (СНС1з).

4

С целью идентифицирования виноластин переводят в основание, и из него перекристаллизацией из эфира получают эфират винбластина. 1 очка текучести: 201 — 211 С; (,) зб)y 42- С1 Сj>)

Отделенный методом хроматографии, содержащий винкристин аморфный сухой остаток

1u,6 — 3,0 г) растворяют в 10-кратном количестве безводного этанола и при помощи раствора серной кислоты в этаноле устанавливают рН раствора 4. Для полной кристаллизации сульфата винкристина раствор выдерживают 1b час в холодильнике. Количество отфильтрованного сырого сульфата винкристина составляет 60 — 70 " о от растворенного, содержащего винкристин, аморфного сухого остатка.

Для перекристаллизации растворяют сырой сульфат винкристина в небольшом количестве этанола, добавляют затем четырехкратное количество этанола, выдерживают раствор для выкристаллизовывания 16 час в холодильнике и фильтруют, Выход 0,3 — 1,5 г сульфата винкристина. Точка текучести 218 †2"С.

l i р и м е р 2. Полученную по примеру 1 сырую кристаллическую смесь, состоящую, в зависимости от качества лекарственного растительного сырья, из 20 †1 г сульфатов ьинлейрозина, винбластина, винкристина и сопутствующих алкалоидов, растворяют в воде, и рН раствора доводят до 8 — 9 при помощи аммиака. Алкалоиды четыре раза экстрагируют из раствора встряхиванием каждый раз с 1 л хлороформа. Соединенные растворы хлороформа сушат на безводном сульфате натрия и фильтруют, а затем выпаривают при пониженном давлении досуха. Выход 16 — 80 r смеси алкалоидных оснований. Эту массу растворяют в 3 — 4-кратном количестве смеси, состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1: I, и после этого хроматографируют на колонке, наполненной 40-кратным количеством А1 0з, частично дезактивированной водой. В качестве элюирующей смеси применяют бензол — хлороформ в соотношении 1: 1.

11осле сливания первых 2 — 10 л элюата улавливают фракции 0,6 — 3,0 л. Фракции 1—

10 содержат винбластин и винлейрозин, фракции 11 и 12 не содержат винбластина и винлейрозина. После этого, в зависимости от количества поданной смеси кристаллов, производят дальнейшее элюирование с 3 — 18 л смеси, состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1: 1, причем улавливают фракции

0,6 — 3,6 л. Фракции 13 — 17 содержат винкристин.

Переработку фракций, содержащих винбластин, винлейрозин и винкристин, идентифицированных методом хроматографии на бумаге и методом тонкослойной хроматографии, производят способом, описанным в примере 1.

П редм ет изобретения

Способ получения винбластина, винлейрозина и винкристина путем экстракции расти448649

Составитель С. Щенева

Редактор Н. Спиридинова Техред Н. Куклина

Корректор 3. Тарасова

Заказ 28!5717 Изд. ¹ 1381 Тираж 506 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 тельного сырья (Vinca rosea) водным раствором метанола, сгущением экстракта, подкисления, повторной обработки несмешивающимся с водой органическим растворителем, выпаривания, обработки остатка, содержащего сумму алкалоидов, органическим растворителем, хроматографирования, фракционирования и перекристаллизацией целевых продуктов из этанола, отлича ющийся тем, что, с целью повышения выхода целевых продуктов и упрощения технологии, сырье экстрагируют

90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4 — 5), кри5 сталлизацией, растворением в смеси хлористого метилена — хлороформа (2: 1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами.