Способ диагностики сывороточного гепатита

ееео ииии1ач,аамаж — - ®оейЮФЧиеа Мбр.

0 П И С А Н И Е пп 4384!8

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСЕОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Респубпик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 20.03.72 (2li) 1761452/31-16 с присоединением заявки № (32) Приоритет

Опубликовано 05.08.74. Бюллетень № 29

Дата опубликования описания 29.01.75 (51) М. Кл. А 611с 23/00

С 121с 1/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 616.36-002-071 (088.8) (72) Авторы изобретения

A Ф. Блюгер, Х. М. Векслер, В. Г. Ионов и Т. А, Штейнберг

Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СЫВОРОТОЧНОГО ГЕПАТИТА

Изобретение относится к медицине.

Известен способ диагностики сывороточного гепатита путем взятия у больного крови из вены, отделения лимфацитов разделения их на 4 пробы к двум, из которых добавляют австралийский антиген, а две другие используют в качестве контроля.

Однако продолжительность установления диагноза указанным способом достигает более пяти суток.

Е!елью предложенного изобретения являегся упрощение и ускорение способа.

Для этого предлагается в кровь добавлять австралийский антиген и инкубировать в течение 1,5 — 2 ч, окрашивать люминесцентным красителем, например акридиновым оранжевым, и выдерживать во влажной среде 15—

60 мин.

Кровь берут из пальца лейкоцитарным меланжером до метки l и смешивают в соотношении 2: 1 с антикоагулянтом, В качестве антикоагулянта применяют, например, 3% -ный раствор трилона «Б» в физиологическом растворе. Для больного ставят параллельно две пробы — опытную с австралийским антигеном и контрольную с физиологическим раствором.

Антиген и раствор берут в отношении к крови 2:1.

Обе пробы при температуре 37 С инкубируют в течение двух часов. Затем осторожно перемешивая кровь, в виде капель переносят на предметные стекла и окрашивают люминесцентным красителем, например акридиновым оранжевым в разведенном виде

1: 10 000 на физиологическом растворе. Предметные стекла помещают во влажную камеру и при комнатной температуре выдерживают от 15 до 50 мин.

Окрашенные препараты изучают = помощью

10 люминесцентного микроскопа. Можно пользоваться и другим микроскопом, но тогда:и краситель должен быть другим. Оценку ведут морфологическим путем, т. е. подсчитывают, например, в трех разных местах количество

15 клеток крови в капле контрольной и опытной проб. Например, подсчитывают 100 клеток нейтрофилов в каждой пробе. Затем смотряг, сколько среди них не поврежденных нейтрофилов и сколько поврежденных.

20 В препаратах с австралийским антигеном при сывороточном гепатите различают три степени альтерации нейтрофилов: бахромчатость цитоплазмы; клетки из круглых превращаются в вытянутые с разорванными краями;

25 клетки разрушаются полностью, на их месте видны лишь «тени» или «обломки».

Результаты альтер ации выражают в процентах. Процент неспецифических повреждений, обнаруженных в контроле, вычитают из

30 процента поврежденных клеток в опыте.

438418

Составитель С. Щенева

Техред Е. Борисова Корректор Н. Учакииа

Редактор Т. Каранова

Заказ 3668/9 Изд. № 140 Тираж 482 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, 5К-36, Раушская наб., д. 4/6

Типография, пр. Сапунова, 2

Повреждение клеток у здоровых людей не превышает 10% (преимущественно первая степень повреждения), в то время как у больных сыворотным гепатитом ливис доходит до

50 — 55% и отмечаются все тр|и степени повреждения. Весь анализ для диагноза проводится 3 — 4 час.

Предмет изобретения

Способ диагностики сывороточного гепатита путем обработки крови антикоагулянтом с последующим добавлением антигена, инкубацией и морфологической оценкой количества поврежденных клеток крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения и ускорения

5 способа, в кровь добавляют австралийский антиген и инкубируют в течение 1,5 — 2 ч, окрашивают люминесцентным красителем, например, акридиновым оранжевым и выдерживают во влажной среде 15 — 60 мин.

10.