Способ получения родамина сулбфофторида 200 в
! г.. т :
ОП ИСАН И Е
ИЗО6РЕТЕ Н ИЯ
|1!1 419555
Союз Советених
Социалистических
Реслублик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 15.06.72 (21) 1799118/31-16 (51) М. Кл. С 12k 1/00 с присоединением заявки (32) Приоритет
Опубликовано 15.03 74. Бюллетень № 10
Дата опубликования описания 16.08.74
Гасударственный квинтет
Савета Мнннстрсв СССР пв делам нзобретекнй и аткрытнй (53) УДК 578.65(088 8) (72) Авторы изобретения (71) Заявители
P. П. Белых, К. Л. Шаханина и Б. В. Клеев
Институт эпидемиоло"III! и микробиологии им. Гамалеи и Московский химико-технологический институт им. Д. И. Менделеева (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РОДАМИ НА
СУЛЬФОФЧ ОРИДА 200 В
Изобретение относится к области медицины, точнее к получению диагностических препаратов.
Известен способ получения родамина сульфофторида 200 В, заключающийся в том, что хлороформный раствор родамина 200 В обрабатывают при нагревании пятихлористым фосфором, осаждают образовавшийся родамин сульфохлорид бензином, растворяют осадок в хлороформе и кипятят с фтористым калием, осаждают целевой продукт петролейным эфиром.
Однако такой способ не позволяет получить химически чистый препарат красителя, а поэтому его конъюгаты с белками имеют низкие красящие титры. С целью повышения выхода и степени чистоты целевого продукта по предлагаемому способу хлороформный раствор родамина сульфохлорида промывают раствором фтористого калия, нагреванию с фтористым калием подвергают непосредственно раствор образовавшегося родамина сульфохлорида и целевой продукт повторно осаждают петролейным эфиром.
Пример. К 5 г родамина 200 В добавляют
80 мл сухого перегнанного хлороформа и 8 г
РС1, смесь нагревают при кипении хлороформа в течение 2 час, затем добавляют еще 4 r
РС!а и продолжают нагревание еще 2 час. Реакцио|п|ую массу охлаждают, фильтруют и промывают три раза 10%-ным раствором фтористого калил. Хлороформный слой отделяют и сушат прокаленным серпокпслым натром.
Высушенный раствор кипятят в течсние
5 2 час с 5 г фторпстого калил. Горячий раствор
|рильтруют, упарпвают 10 30 мз и медленно при перемепшваппн выливают в 0,8 л сухого петролейного эфпр",. Выпавпше кристаллы отфнльтровь|вают и сушат прп 60 С. Получс 10 ный осадок еще раз очищают путем осаждения
30 мл раствора красителя в хлороформе и 1 л петролейпого эфира. Выход 60 — 65%. Краситель хранят в запалн ы ампулах под вакуумом. Перед мсткoi белка расчетное колнче15 ство красителя псреосаждают и не высу|пнвая растворяют в с хом ацетоне.
К 5 мл 2%-ного белкового расзвора иммунного глобул||ша в 0,1 М карбопато-бнкарбонатном буфере р11 9,0 добавляют 0,5 мл 1%-ного
20 раствора красителя в сухом ацетоне КопъюГаци|о Всдмт 30 мпп прп ком патпои Гемпсp3T) ре. Избыток красителя удаляют па колонке с сефадексом Г-50. используя тот жс буфер.
Копыогацию бычьего (лошадиппогo) альбу25 мина проводят аналогично.
Предмет изобретения
Способ получения родамппа сульфофторида
30 200 В путем обработки прп нагревании хлоро419555
Составитель С, Щенева
Texpeд 3. Тараненко
1(орректоры: О, Данишева и В. Петрова
Редактор В. Блохина
Заказ 1864/12 Изд. Ме 1382 Тираж 456 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 формного раствора родамина 200 В пятихлористым фосфором, последующего нагревания хлороформного раствора образовавшегося родамина сульфохлорида с фтористым калием и выделения целевого продукта осаждением петролейным эфиром, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и степени чистоты целевого продукта, хлороформный раствор родамина сульфохлорида промывают раствором фтористого калия, нагреванию с фтористым калием подвергают непосредственно раствор образовавц1егося родамина сульфохлорида и целевой продукт повторно осаж. дают петролейным эфиром.
