Способ получения вещества, обладающего фибринолитической активностью
0 ЙСА НИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
375076
Союэ Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 05.VI1.1971 (№ 1678318/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 23Л!1.1973. Бюллетень № 16
Дата опубликования описания 28Х1.1973
М. Кл. А 61k 27/10
Комитет по делам нэобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 615 45 615 361 018.51/55 (088.8) Авторы изобретения
В. В. Пальмин и В. Д. Синицина
Заявитель
Московский технологический институт мясной и молочной промышленности
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО
ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Изобретение относится к фармацевтической промышленности.
Известен способ получения фибринолизина, согласно которому фракцию 1З-глобулинов из плацентарной сыворотки крови человека экстрагируют раствором серной кислоты, подщелачивают, добавляют соляную кислоту, центрифугируют, профибринолизин активируют в фибринолизин, трипсином,,пропускают через фильтр Зейтца, высушивают.
Однако в таком способе используется сыворотка крови доноров или плацента человека — дорогое и дефицитное сырье, и сам способ имеет сложную технологию.
С целью упрощения технологии производства в предлагаемом способе лейкоциты кро= ви свиней многократно замораживают с про= ме>куточным оттаиванием, экстрагируют во= дой с последующей после центрифугирования обработкой поваренной солью, ацетоном.
Пример. 100 г отмытых лейкоцитов из крови свиней замора>кивают в холодильнике при — 18 С, затем оттаивают при комнатной температуре и вновь замораживают. Подобную операцию повторяют трижды для разрушения лейкоцитов. Разрушенные таким образом лейкоциты трехкратно экстрагируют дистиллированной водой при соотношении 1: 1 при комнатной температуре в течение 2 час.
В раствор переходят ферменты, действуюшие
2 в области рН 4 — 5. После центрифугировання водой взвеси разрушенных лейкоцитов при
6000 об/мин осадок в течение 10 лин извлекают 5%-ным раствором NaC1 при соотношении
5 1: 3. Экстракцию 5%-ным раствором NaCI проводят путем выдер>ккн в течение 12—
24 час в холодильнике при 0 С. После этого солевой раствор центрифугируют в рефрижераторной (охлаждаемой) центрифуге при
10 18 000 об/мин.
Надосадочную жидкость — ферментный препарат сливают и хранят в холодильнике для дальнейшего использования.
Освобождение ферментного раствора от
15 балластных белков проводят путем осаждения их ацетоном. К полученным 100 мл ферментного раствора добавляют 4-х кратно каждый раз по 50 мл ацетона, охлажденного до — 10 С. Осадок удаляют центрнфугирова20 нием r, течение 2 лшн при 2000 об/лшн в рефрижераторной центрифуге. Первые две фракции белиa rrbropacr.rrraroT, Tar r ar orr» не активны. Активный фермент находится в двух последних фракциях.
25 Полученный в конечном итоге раствор подвергают стерилизации через фильтр 3ейтца и лиофильно высушивают.
Выход сухого препарата 002% к весу исходных лейкоцитов. Содержание влаги в пре30 параге 3 — 6%.
3750А
Предмет изобретения.
Составитель Т. Головина
Техред Е. Борисова
Корректор Т, Гревцова
Редактор Н. Спиридонова
Заказ 1750/8 Изд. № 1386 Тираж 467 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
Способ получения. вещества, обладающего фибринолитической активностью, путем экстракции животного сырья, центрифугирования, стерилизации и высушивания, отличаюи4ийся тем, что, с целью упрощения технологии производства, лейкоциты крови свиней многократно замораживают с промежуточным оттаиванием, экстрагируют водой с последу5 ющей после центрифугирования обработкой поваренной солью и затем ацетоном.
