Способ количественного определения белковых фракций
372498
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союа Ссеетских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 28.V.1971 (¹ 1665914/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 01ЛII.1973. Бюллетень № 13
Дата опубликования описания 23,1Ч.1973
М. Кл, G 01п 33/16
В Olk 5/00
Номитет по делом изобретений и открытий ори Соеете уйинистрое
СССР
УДК 543,.545(088.8) Авторы изобретения
Л. Б. Кацова и В. М. Красов
1» ь
Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт
Заявитель
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИЙ
Изобретение относится к биохимии.
Известен способ количественного определения белковых фракций путем электрофореза на крахмальном геле, заключающийся в просветлении непрозрачного фона окрашенной электрофореграммы и денситометрйровании геля. Однако указанный способ имеет сложную методику.
Целью предложенного изобретения является создание более простой методики.
Поставленная цель достигается тем, что фореграммы обрабатывают ацетоном, высушивают, разрезают, элюируют муравьиной кислотой с добавлением едкого натра и фотометр и р уют.
Пример. После электрофоретического разделения белковой смеси в крахмальном геле (по известной методике) и ее окраски крахмальную фореграмму переносят в ацетон на
20 — 25 мин. Затем ацетон сливают, фореграмму высушивают в термостате при температуре
37 С в течение 15 мин и разрезают на окрашенные зоны по видимым границам раздела, соответствующим окрашенным белковым фракциям. Каждый окрашенный и контрольный участки фореграмм (контрольным служит участок фореграммы, не содержащий белка) помещают в пробирки. В них же заливают по
5 мл муравьиной кислоты и кипятят на водяной бане 8 — 12 мин для перехода окраски
5 в раствор (при этом происходит разрушение гранул). За это время пробирки 2 — 3 раза встряхивают. Затем в каждую пробирку добавляют по 5 мл. 1 н. едкого натра и оставляют на 10 мин. Фотометрируют при синем
10 светофильтре на фотоэлектроколориметре.
Для количественного определения белковых фракций можно использовать крахмальные фореграммы, хранившиеся 18 — 24 месяца в отмывающей смеси. По полученным величи15 нам экстракцией на ФЭК дальнейшее количественное определение каждой белковой фракции проводят по известной методике.
Предмет изобретения
20 Способ количественного определения белковых фракций путем электрофореза на крахмальном геле, отличающийся тем, что, с целью упрощения методики, фореграммы обрабатывают ацетоном, высушивают, разреза25 ют, элюируют муравьиной кнслотой с добавлением едкого натра и фотометрируют.
