Способ иглучения биомассы пектинразла! агпщих clostridium

293045

О П И С А Н И Е

И ЗОБРЕ,ТЕ Н Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. сш:детельства ЛЪ

Заявлено 23.Х.1969 (№ 1374929,28-13) с присоединением 3351ьк1; М

Приоритет

Опублпковапо 15.1.1971. Бюл,".степь ¹ 5

Дата опуб.шковання OIIIIc3IIII51 31.111.1971

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министрое

СССР

УДК 576.8.095 25 .8 (088.8) Авторы изобретения

Ю. M. Возняковская и О. К. Куликовская

Заявитель

СПОСОБ Ill МУЧЕНИЯ БИОМАССЫ

П ЕКТИ Н РАЗДА1 - " i 7111 NX LOSTRIDIUM

Изобретение относится к области бродильного производства, а именно к способам получения биомассы Clostridium.

Известен способ получения биомассы

Clostridium путем выращивания их на питателыюй среде, содержащей минеральные соли аммония, железа, кальция, в присутствии стимулятора роста с последующим отделением выращенных клеток и высушиванием.

Биомассу Clostridium, полученную известным способом, невозможно использовать для тепловой мочки льна.

Цель изобретения — использовать полученную биомассу для тепловой мочки льна.

Эта цель достигается тем, что в качестве продуцента используют Clostridium 1е!sineum штамм 13, в питательную среду дополнительно вводят картофельную мезгу в количестве

5%, а в качестве солей аммония, железа, кальция и стимулятора роста соответственно используют сернокисль|й аммоний в количестве 0,2%, хлорное железо 0,02%, углекислый кальций 0,3 — 0,5%, кукурузный экстракт

0 25 о/о

Выращивание ведут при рН среды 6,3 — 6,8.

Перед сушкой клетки микроорганизмов смешивают с водой и мелом в соотношении

1: 0,5: 2.

Пример. Из исходной чистой культуры (споры активных пектинразлагающих бактсрий C!ostrillium felsil7cum штамм 13) готов511 посевной материал путем размножения

63I T0p llIl oil3 I3 73 B 1:.oëî3õ, 3 заТем B б»ТЫ,751., ЗЯПОЛНЕННЫХ На ДВЕ ТРЕТИ ПНТЯТЕЛЬ1Io1 сре ой следу1ощего состава: картофельная мезга (отжатая) 5%, сер окисльш аммош5й 0,2оо, кукурузный экстракт 0,25%, хлорное железо 0,02о/о, мел 0,3 — 0,5%, оптимальн ы и р Н среды 6,3 — 6,8.

1 Стерплизуют среду при 1,4 атм 30 л1ин.

Выращивание ведут стационарно, без встряхивания и без продувания воздуха при температуре 35 — 37 С. Для засева ферментатороь-ипокуляторов используют посевной ма1 териал, получегп1ый в бутылях в стадии вегетативных клеток в возрасте 20 — 24 час, который вносят 10% от объема среды в ферментаторс или в виде спор в возрасте от 3 — 4 сугок до 3 — -1 месяцев в количестве 2 — 4о1о от объс»;а среды. Споровый посевной материал может хранитьс1 и использоваться в течение нескольких месяцев

Д7я массового выращивания бактерий в ферментаторах применяется та же самая питательная среда. Основные компоненты среды — картофельllяя мезга и куlсурузный экстракт — являются отходами крахмало-нато шого производства и представляют дешевос и недефицитное сырье.

315 В простерилизованную питательную среду, 293045

Предмет изобретения

Составитель Г. Субботина

Редактор М. В. Макарова Тскрсд Л. Я. Левина «оррсктор О. М. Ковалева

11зд. 3Ъ 244 Заказ 527/18 Тираж 473 Подписное

Ц1-1ИИПИ 1(окштста по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, 4(-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

3 налитую в количестве две три объема ферментатора, перекачивают посевной материал из инокулятора в возрасте 20 — 24 час, когда клетки представляют собой подвижные вегетативные палочки. Количество посевного материала — 8 — 10 /о от объема среды в рабочем ферментаторе.

В процесе развития бактерий при сбраживании мезги выделяются газообразные продукты (С02 и Н2), благодаря чему мезга выносится на поверхность. Для ее заглублечия необходимо после 24 час выращивания и далее через каждые 12 час включать на 1—

2 мин. мешалку.

Развитие культуры в ферментаторах происходит следующим образом, Через 36 час появляются массовые клостридиальные формы, окрашивающиеся иодом, мезга почти полностью мацерирована, рН снижается до 5,6. Через 48 час в клетках появляются проспоры, а к 62 час процесс заканчивается массовым спорообразованием. В 1 мм культур альной жидкости содержится 50—

60 млн. спор.

Для отделения спор от жидкости культуральную жидкость сепарируют. Выход пасты составляет 1 % от объема питательной среды.

Для получения препарата полученную пасту разводят небольшим количеством воды и смешивают с простерилизованным мелом, который используют в качестве наполнителя.

Количество пасты, воды и мела берут в соотношении 1: 0,5: 2. Полученную смесь сушат в обычной сушилке с приточно-вытяжной вентиляцией при температуре 45 — 50 С в течение

2 — 4 час. Получаемый сухой препарат размалывают и расфасовывают в бумажныс McLIIки.

В 1 г сухого препарата содержится 1—

2 млрд. жизнеспособных спор. Доза препарата на 1 т льносоломы составляет 250 млрд. спор. Количество его рассчитывается в зависимости от титра данной партии препарата и может составлять от 250 г до 1 кг.

5 При хранении титр спор в препарате не снижается в течение шести и более месяцев.

Затем была взята отсортированная и

12 раз обезличенная льносолома М 1,75. 3амочили в бачках по 4 кг соломы при отноше10 пии соломы к воде 1: 20 и температуре 35—

37 С. Препарат вносили на солому перед ее замачиванием из расчета 1 кг/т. Процесс мочки с препаратом закончился за 46 час, а без препарата за 72 час.

1. Способ полу чения биомассы пектинразлагающих ClostI Idium путем выращивания их на питательной среде, содержащей минеральные соли аммония, железа, кальция, в присутствии стимулятора роста с последующим отделением выращенных клеток и высушиванием, отличающийся тем, что, с целью использования полученной биомассы для тепловой мочки льна, в качестве продуцента используют Clostridium felsiIIeum штамм 13, в питательную среду дополнительно вводят картофельную мезгу в количестве 5%, а в качестве солей аммония, железа, кальция и стимулятора роста соответственно используют сернокислый аммоний в количестве 0,2 /0, хлорное железо 0,02о/о, углекислый кальций

0,3 — 0,5%, кукурузный экстракт 0,25 /о.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выращивание ведут при рН среды 6,3 — 6,8.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед сушкой клетки микроорганизмов смешивают с водой и мелом в соотношении

40 1:05:2.