Противопаразитарная композиция и способ ее применения для лечения паразитозов жвачных животных
Владельцы патента RU 2699799:
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук (СФНЦА РАН) (RU)
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный Алтайский научный центр агробиотехнологий" (ФГБНУ ФАНЦА) (RU)
Группа изобретений относится к ветеринарной паразитологии и представляет собой противопаразитарную композицию, включающую супрамолекулярный комплекс альбендазола с арабиногалактаном, супромолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (бланоза) и воду при следующих соотношениях компонентов, мас.%: супрамолекулярный комплекс альбендазола с арабиногалактаном в весовом соотношении 1:10 - 3,0, супрамолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном в весовом соотношении 1:10 - 0,3, карбоксиметилцеллюлоза (бланоза) - 0,25, вода остальное и способ применения указанной противопаразитарной композиции для лечения гельминтозов жвачных животных, включающий пероральное введение противопаразитарной композиции в дозе 0,6 мл/кг массы животного, однократно, индивидуально. Использование заявленной группы изобретений позволяет повысить эффективность лечения паразитозов животных. 2 н.п. ф-лы, 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к ветеринарной паразитологии, а именно к средствам и способам лечения паразитарных болезней животных.
Паразитозы сельскохозяйственных животных имеют повсеместное распространение и существенно снижают продуктивность и качество получаемой продукции.
Смешанные инвазии у животных, обусловленные эндо- и эктопаразитами, являются наиболее часто встречающейся формой проявления паразитарной патологии (М.А. Шихалиева, М.И. Биттирова, С.Ш. Мантаева З.X. Юсупова С.Ш. Чилаев. численность и ассоциации паразитов у крупного рогатого скота и коз в регионе Северного Кавказа Российский паразитологический журнал - 2014. - вып. 4. - С. 16-21; Марченко В.А., Ефремова Е.А., Саитов В.Р, Айрапетян А.Р. Паразитокомплекс мясных пород крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Алтай // Ветеринарный врач / Научно-производственный журнал. - Казань.- №.4 - 2015. - С. 50-55).
Возбудители арахноэнтомозов и гельминтозов как компоненты паразитоценозов обитают на хозяевах в различных ассоциациях, обуславливая многовекторное вредоносное влияние. Паразитические насекомые и клещи в сочетании друг с другом, а также с гельминтами, вызывают наиболее тяжелое течение болезней, которое характеризуется многообразием негативных воздействий на организм хозяина, приводит к возникновению вторичного иммунодефицита, нарушениям механизмов гомеостаза макроорганизма (Чебышев Н.В., Богоявленский Е.А., Гришина Е.А. Гельминтозы: органно-системные процессы в их патогенезе. М., «Медицина». 1998, 236 с.). Поэтому профилактика и лечение смешанных гельминтозов одна из наиболее актуальных задач современной ветеринарии.
Наукой и практикой накоплен значительный опыт применения в животноводстве различных антигельминтиков и противопаразитарных средств, относящихся к различным химическим группам. Они относятся к различным классам соединений и, как правило, обладают эффективностью против определенного круга паразитов.
Для лечения гельминтозов широко применяется альбендазол (АБЗ) и его лекарственные формы Препарат эффективен против нематод, цестод и трематод. Недостатком альбендазола является относительно высокие терапевтические дозировки при отдельных гельминтозах (5-75 мг/кг массы животного) и необходимость длительного курса лечения [Архипов И.А. Антгельминтики: фармакология и применение. - Россельхозакадемия, 2009. - С. 148-158]. Также АБЗ не эффективен в отношении паразитических членистоногих.
В последние годы разработаны и предложены к применению новые противопаразитарные препараты, которые имеют широкий спектр действия против многих эндо - и эктопаразитов животных и птиц. К числу таких препаратов относятся антгельминтики, содержащие в качестве действующего вещества (ДВ) ивермектин, который является высокоэффективным лечебным средством против нематод и эктопаразитов (Miller T.W. et.all., 1979; Campbell W.C., et.all., 1984; Campbell W.C. 1989).
Однако, инъекционные препараты на основе ивермектина, в которых в качестве растворителя используются такие вещества как глицероформаль, пропиленгликоль и поливинилпирролидон имеют ряд недостатков. Эти лекарственные формы обладают высокой вязкостью, что затрудняет инъекцию, вызывает раздражение и другие реакции в месте введения, а в результате преципитации ивермектина в тканях могут оказывать токсическое действие на организм животных. Также недостатком использования ивермектина и его лекарственных форм является ограничение спектра его противопаразитарного действия, антгельминтик не обладают противоцестодозным действием и не эффективен при трематодозах животных.
Известны препараты и способы их применения для лечения животных, включающие альбендазол или ивермектин в сочетании с другими противопаразитарными средствами и в различных формах (П РФ №2294196 от 27.02.2007, П РФ №2469716 от 10.11.2011), «Эффективность празивера при паразитозах овец» // Е.Е. Белова, К.М. Садов, И.А. Архипов, Российский паразитологический журнал, 2010 г., №3, с. 93-97).
Однако, ангельминтные препараты в данных композициях обладают низкой биодоступностью, так как действующее вещество в них находится в нативной форме, без предварительной механохимической подготовки и вещество, используемое в качестве наполнителя (КМЦ) обеспечивает достаточно кратковременный стабилизирующий эффект водных суспензий антгельминтиков, что требует дополнительных затрат для ускорения процедуры дегельминтизации.
С развитием нового научного направления в фармации - нанотехнологии, появилась уникальная возможность конструирования новых лекарственных форм, основой которых являются микроколлоиды, мицеллы, липосомы и микроэмульсии (Kwon G.S., 2003; Goodsell D.S., 2004). Основываясь на этих исследованиях, стало возможным создание новой лекарственной формы ивермектина, удобной в применении, нетоксичной в терапевтических дозах и эффективной против эндо- и эктопаразитов даже после однократного применения препарата.
Известен препарат Никломек, в состав супрамолекулярного комплекса Никломек входят ивермектин и никлозамид. Однако, в качестве наполнителя использован синтетический полимер поливинилпирролидон (ПВП) (Енгашева Е.С. Токсикологическая оценка супрамолекулярного препарата Никломек, полученного путем механохимической технологии // Международный Вестник Ветеринарии - 2016. - №4. - С. 42-45).
Недостатком данного препарата является то, что его антгельминтная эффективность в отношении цестод определена только на лабораторных животных и не изучена его эффективность против паразитических насекомых.
Известны препараты и способы их использования для лечения гельминтозов животных на основе физиологических водорастворимых полимеров, содержащие в качестве ангельминтика супрамолкулярный альбендазол (Создание антигельминтных препаратов повышенной эффективности на основе межмолекулярных комплексов действующих веществ с водорастворимыми полимерами, в том числе с полисахаридами // С.С. Халиков, Ю.С. Чистяченко, А.В. Душкин, и др. Ж. Химия в интересах устойчивого развития. - 2015. - №5. - С. - 567-577).
Однако данные препараты также имеют ограниченный спектр действия - только на кишечные гельминтозы, а также не всегда содержат полимеры, способствующие оптимальной пролонгации противопаразитарных свойств ангельминтиков.
Наиболее близким решением, принятым за прототип, является препарат на основе альбендазола и способ его применения при гельминтозах млекопитающих (см. П РФ №2546535 от 10.04.2015 г., A61K 31/00).
Однако, существенным недостатком, является ограниченный спектр воздействия ангельминтного препарата альбендазол (только на кишечные паразиты), а также недостаточная стабильность образованных водных суспензий при использовании только какого либо одного из физиологических наполнителей.
Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала противопаразитарных средств и способов лечения гельминтозов и эктопаразитозов жвачных животных.
Сущность способа заключается в том, что противопаразитарная композиция, включающая супромолекулярный комплекс альбендазола с водорастворимым полимером арабиногалактан, согласно изобретению, дополнительно в качестве антгельминтика используют супромолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном и дополнительно в качестве наполнителя натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (бланоза), при следующих соотношениях компонентов, масс. %: альбендазол - 3,0, ивермек - 0,3, арабиногалактан - 1:10, карбоксиметилцеллюлоза (бланоза) - 0,25, вода остальное.
Сущность изобретения также заключается в том, что в способе лечения гельминтозов жвачных животных, включающем пероральное введение противопаразитарного препарата, согласно изобретению, в качестве противопаразитарного препарата используют противопаразитарную композицию по п. 1, в дозе 0,6 мл/кг массы животного, однократно, индивидуально.
Примеры осуществления изобретения.
1. Получение противопаразитарной композиции.
Для получения противопаразитарной композиции использовали известные антгельминтики - Альбендазол (АБЗ) и Ивермектин (Ивер) в форме супрамолекулярных субстанций с водорастворимым полимером арабиногалактаном (АГ). Альбендазол в форме межмолекулярного комплекса (АБЗ с АГ) был получен методом механохимической технологии (по методу С.С. Халикова и др., см. П РФ №2546535 от 10.04.2015 г.).
Межмолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном (Ивер с АГ) получили аналогичным способом с использованием механохимической технологии, включающий обработку смеси твердых компонентов интенсивными механическими воздействиями, реализуемые в мельницах ударно-истерающего действия. При получении супрамолекулярных комплексов смеси субстанции АБЗ с арабиногалактаном и ИВЕР с арабиногалактаном, взяты в весовых соотношениях 1:10.
В сухие заявляемые ангельминтные композиции (АБЗ с АГ) и (ИВЕР с АГ) добавляли измельченную натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы. Полученную смесь тщательно перемешивали до однородной массы, которая представляет собой сухой концентрат суспензии, готовый к применению. Воду добавляли непосредственно перед введением препарата животным, затем емкость встряхивали до образования стойкой водной суспензии.
Введение в состав натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (бланоза) было обусловлено тем, что данное вещество стабилизирует и повышает вязкость лекарственной формы композиции, увеличивает эффект оптимальной пролонгации действующего вещества.
Определение оптимальной рецептуры противопаразитарной композиции иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Для приготовления противопаразитарной композиции бланозу измельчали в ступке. Затем в емкость помещали в заданных пропорциях супрамолекулярный комплекс Ивер с АГ - 0,6 г, АБЗ с АГ 6,0 г, измельченную бланозу - 0,36 г и добавляли воду до объема 200 мл. Полученную смесь тщательно перемешивали для получения однородной взвеси. Однако полученная взвесь была не устойчива при хранении и в течение 60 минут после приготовления расслаивалась на две фракции.
Пример 2. Для приготовления противопаразитарной композиции бланозу измельчали в ступке. Затем в емкость помещали в заданных пропорциях супрамолекулярный комплекс Ивер с АГ - 0,6 г, АБЗ с АГ 6,0 г, измельченную бланозу - 0,5 г и добавляли воду до объема 200 мл. Полученную смесь тщательно перемешивали для получения однородной взвеси. Полученная взвесь сохраняла устойчивость в течение 4 часов.
Пример 3. Для приготовления противопаразитарной композиции бланозу измельчали в ступке. Затем в емкость помещали в заданных пропорциях супрамолекулярный комплекс Ивер с АГ - 0,6 г, АБЗ с АГ - 6,0 г, измельченную бланозу - 0,7 г и добавляли воду до объема 200 мл и добавляли воду до объема 200 мл. Полученную смесь тщательно перемешивали для получения однородной взвеси. Полученная взвесь также как и в примере 2 была устойчива при хранении, однако использование бланозы в этом количестве мы считаем не целесообразным.
Пример 4. Для приготовления противопаразитарной композиции (без бланозы) в емкость помещали в заданных пропорциях супрамолекулярный комплекс Ивер с АГ - 0,6 г, АБЗ с АГ 6,0 г и добавляли воду до объема 200 мл. Полученную смесь тщательно перемешивали для получения однородной взвеси. Однако полученная взвесь была не устойчива при хранении и в течение 30 минут после приготовления расслаивалась на две фракции.
Таким образом, что для приготовления противопаразитарной композиции наиболее оптимальное соотношение действующих веществ и вспомогательных компонентов отражено в примере 2, что в пересчете на масс. % составило: альбендазол - 3,0, ивермек - 0,3, арабиногалактан - 1:10, карбоксиметилцеллюлоза (бланоза) - 0,25, вода остальное.
2. Определение эффективности действующих веществ (АБЗ и ИВЕР) предлагаемого препарата при различных паразитозах овец
Изучение паразитоцидной эффективности при кишечных гельминтозах проводились в период со 2 по 17 июля 2017 г. в Шебалинском районе Республики Алтай на отаре овец индивидуального предпринимателя Чичинова В.Ю.
На фоне отобранных инвазированных животных, опытные и контрольные группы формировали по принципу аналогов по 10 голов, контрольная 20 голов. Перед постановкой опыта все животные были взвешены и забиркованы.
Препараты задавали овцам индивидуально в виде водной суспензии перорально в дозе 0,6 мл/кг массы животного (м.ж.), из шприца с резиновой трубочкой на корень языка, применялись композиции механомодифицированных препаратов в дозировке по ивермектину по 0.2 мг/кг м.ж. и альбендазола из расчета по ДВ 1, 2, 3 мг/ кг м.ж.
Базовые (официнальные) препараты ивермектина и альбендазола (без арабиногалактана) применяли в контрольных группах в форме водных суспензий в дозировках по ДВ 0.2 и 2 мг на кг м.ж. соответственно.
После применения препаратов видимого токсического воздействия на животных не обнаружено.
Спустя 15 дней после постановки опыта было проведено обследование 20 голов овец контрольной группы методом овоскопии по Фюллеборну с подсчетом яиц в камере ВИГИС. В результате исследования были получены следующие результаты - кишечными стронгилятами животные заражены на 95,0% при ИО 949,3 я/г. ф., мониезиями зараженность животных составила 25,0% при ИО 475,4 я/г. ф., трихоцефалами - 10,0%, при ИО 9,5 я/г. ф. Все животные контрольной группы оказались заражены имаго овечьей кровососки, при ИО - 11,0 экз (табл. 1 -3).
Обобщенные результаты испытаний препаратов при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) овец представлены в таблице 1.
мм *- механомодифицированный
В результате постановки опыта по оценке эффективность композиций механомодифицированных препаратов ивермектина и альбендазола при стронгилятозах ЖКТ установлено, что экстенсэффективность (ЭЭ) различных дозировок композиций находилась в пределах 68,5 - 100%, интенсэффективность (ИЭ) 96,2 - 100%.
Паразитоцидная эффективность примененных дозировок базовых препаратов ивермектина и альбендазола оказалась существенно ниже и составила соответственно - ЭЭ - 57,9%, ИЭ - 98,2% и - ЭЭ - 15,8%, ИЭ - 93,0%.
В целом, наиболее приемлемой можно считать композицию с дозировкой ивермектина мм 0.2 и альбендазола мм 2-3 мг на кг м.ж., ЭЭ которых составила 89,5 - 100%, ИЭ - 99,4 - 100%.
Результаты испытаний препаратов при мониезиозе овец представлены в таблице 2.
мм *- механомодифицированный
Из таблицы видно, что эффективность композиции механомодифицированных препаратов ивермектина и альбендазола при мониезиозе в различных дозировках по показателю экстенсэффективности находилась в пределах от 20 до 100%, интенсэффективности от 76.4 до 100%.
Применение базовых препаратов в дозировках по ивермектину и альбендазолу соответственно 0,2 и 2,0 мг/кг м.ж. оказались малоэффективными.
С учетом оценки эффективности при кишечных стронгилятозах, наиболее приемлемой дозировкой при мониезиозе можно считать композицию ивермектина мм 0.2 и альбендазола мм 2 мг на кг м.ж., эффективность которого в опыте составила 100%.
Результаты испытаний препаратов при мелофагозе овец представлены в таблице 3.
мм *- механомодифицированный
Из таблицы видно, что эффективность композиции механомодифицированных препаратов ивермектина и альбендазола при мелофагозе в испытанной дозировке по показателю экстенсэффективности составила 90,0%, интенсэффективности - 92,8%. Эффективность базового ивермектина была в 1,3 раза ниже и составила 70,0%, в то же время исходный альбендазол не продемострировал энтомоцидного действия.
Проведенные опыты по оценке эффективности композиций механомодифицированных препаратов ивермектина и альбендазола с использованием арабиногалактана с дополнительным введением в композицию в качестве наполнителя натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (бланозы) при кишечных гельминтозах и эктопаразитозах (мелофагоз) показали существенное преимущество данной композиции перед исходными формами препаратов.
Наиболее приемлемой по эффективности можно считать композицию с дозировкой ивермектина мм 0.2 и альбендазола мм 2-3 мг на кг м.ж., экстенсэффективность которых при смешанных гельминтозах (стронгилятозы и мониезиозы) составила 89,5 - 100%, ИЭ - 99,4 - 100%.
Достаточно эффективной оказалась композиция механомодифицированных препаратов ивермектина и альбендазола при мелофагозе в дозировке ивермектина мм 0.2 и альбендазола мм 2 мг на кг м.ж. с показателями ЭЭ - 90,0% и ИЭ - 92,8%.
1. Противопаразитарная композиция, включающая супрамолекулярный комплекс альбендазола с арабиногалактаном, супромолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (бланоза) и воду при следующих соотношениях компонентов, мас.%:
- супрамолекулярный комплекс альбендазола с арабиногалактаном в весовом соотношении 1:10 - 3,0,
- супрамолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном в весовом соотношении 1:10 - 0,3,
- карбоксиметилцеллюлоза (бланоза) - 0,25,
- вода остальное.
2. Способ применения противопаразитарной композиции для лечения гельминтозов жвачных животных, включающий пероральное введение противопаразитарной композиции, отличающийся тем, что используют противопаразитарную композицию по п. 1, в дозе 0,6 мл/кг массы животного, однократно, индивидуально.