Способ определения образования бактериоцинов и витаминов стафилококками

25I767

СПИ

ИЗОБ

Союз Советскик

Социалистических

Республик

К АВТОР СКО

Зависимое от авт.

Кл, 30h, 14

Заявлено 24.1 V.196 с присоединением з

Приоритет

Опубликовано 04.1

Дата опубликовани

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

МПК А 61Ь

С 12k

УДК 576.851.252:577.16 (088.8) Авторы изобретения

Заявители

А. А. Гришко и В. Л. Надтока

Харьковский научно-исследовательский институт микробиологии вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова и Харьковский научно-исследовательский институт охраны здоровья детей и подростков им. H. К. Крупской

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБРАЗОВАНИЯ БАКТЕРИОЦИНОВ

И ВИТАМИНОВ СТАФИЛОКОККАМИ

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способам определения образования бактериоцинов и витаминов стафилококками, Известен опособ определения образования бактериоцинов и витаминов стафилококками с помощью чашечного метода путем аведения витаминозависимого штамма,;например

Е. Coli-113/а или В. proteus vulgaris, в состав, питательной среды, не содержащей соотвепствующего витамина.

Указанный способ требует сра внительно многого времени,и не во iBicex случаях .поз валяет обнаружить бактериоцины в отношении

В. proteus vulgaris.

Целью изобретения является одновременное обнаружение биосинтеза витаминов В„ и PP и бактериоци нов, а также ускорение исследования.

Для достижения этой цели предлагается способ определения образования бактериоциioB и витаминов стафилококками с помощью чашечного метода путем введения витаминоза внсимого штамма, например E. со11-113ja или В. proteus vulgaris, в состав питательной среды, не содержащей соответствующего штамма. В стеклянные цилиндрики, устано вленные IHa |поверхности питательной среды, вносят суопензию 5 — 10-суточных культур испытуемых штаммов сгафилококков, Для исследования используют питательную среду, содержащую в 1 л дистиллированной воды 2 г хлористого аммония, 3 г поваренной еоли, 0,4 г двухзамещенного фосфата калия, 3 г цитрата натрия, 3 г ла ктозы и 15 г агарага ра. Среду стерилизуют 20 мин .при 120 С и добавляют к ней 407»-ный раствор глюкозы (2,5 мл на 40 мл расплавленной среды). 3атем в среду вносят витаминозависимые штам1р мы E. col!-113/а IB колиiecBBe 10» микробных тел на 40 мл среды и В. proteus vulgaris в количестве 5 108 микробных тел |на 40 мл среды. После смешива ния разливают по 20 мл среды, и на застывший агар наносят стеклян15 ные цилиндрики с 0,2 мл бактериальной суспензии старой 5 — 10-суточной культуры стафилококко в, приготовленной из одной .петли культуры и 1 мл физиологического раствора поваренной соли. На од ной чашке Петри од2О HoBpeNeHiHO испытывают по десять штаммов стафилокакков.

После 24-часовой инкубации:при 37 С производят учет опыта. При наличии у испыту2б емых штаммо в стафилококкцинов вокруг ци. ли ндриков образуются резко очерченные зоны отсутствия роста индикаторного штамма.

Если штаммы обладают при этом способностью синтезировать витамины В12 и РР, то

ЗО вслед за зоной отсутствия роста располагает251767

Составигель В. Таратута

Редактор К. С. Опенченко Текред Л. В. Куклина Корректор С. А. Кузовенкбва

Заказ 1312/4 Тираж 500 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ся зона усиленного роста .витаминоза висимых индикаторных штаммов.

В случае отсутствия у стафилококкав способ ности K бактер.иоциногении и IK биосинтезу витаминов вокруг цилиндрикоB:íå образуется никаких зон. При наличии одной из изучаемых функций вокруг цилиндриков образуется лишь одна зона.

Пр едм ет из о бр ете н ия

Способ определения образования бактериоцинов и витаминов стафилококками с IIIQмощью чашечного метода путем введения витаминозBIBHcHìого штамма, например

Е. со11-113/а или В. proteus vulgaris, в состав питательной среды, IHe содержащей coollBeT5 ствующего витамина, отличающийся тем, что, с целью одновременного обнаружения биосинтеза витаминов В» и PP и бактериоци но в, а также ускорения и"следования, в стеклянные цилиндрики, установленные на поверх ности

10 питательной среды, вносят суспензию 5 — 10суточных,куль гур испытуемых штаммов стаф илококков.