Способ диагностики псориаза
Владельцы патента RU 2373536:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Смоленская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU)
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для диагностики псориаза. Для осуществления способа диагностики определяют клинические признаки псориаза, и в качестве дополнительного лабораторного критерия проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов низкой плотности и очень низкой плотности, выделенных из сыворотки крови пациентов. Для чего измеряют показатели светосуммы - S, интенсивности быстрой вспышки -I и рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I. Если Н больше 4,8, диагностируют наличие псориаза у обследуемого пациента. Использование изобретения позволяет провести объективную диагностику псориаза. 2 табл.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для выявления псориаза.
В клинической практике для постановки диагноза псориаз и псориатическая артропатия учитываются следующие критерии (Mathies Н, 1974; Хобейшн М.М. и соавт., 1999, Институт Ревматологии РАМН):
Псориатические высыпания на коже с триадой характерных признаков (феномен стеаринового пятна; феномен терминальной пленки, феномен точечного кровотечения), изоморфная реакция Кебнера, псориаз ногтевых пластинок, псориаз у близких родственников (указание на наличие больных серонегативным артритом и псориазом среди родственников).
1. Артрит дистальных межфаланговых суставов кистей.
2. Артрит трех суставов одного и того же пальца кистей (осевое поражение).
3. Разнонаправленное поражение (подвывих пальцев рук).
4. Асимметричный хронический артрит.
5. Параартикулярные явления.
6. Сосискообразная конфигурация пальцев стоп.
7. Параллелизм течения кожного и суставного синдромов.
8. Боль и утренняя скованность в позвоночнике, которые сохраняются в течение не менее 3 месяцев.
9. Серонегативность по ревмофактору.
10. Акральный остеолиз.
11. Анкилоз дистальных межфаланговых суставов кистей и/или
межфаланговых суставов стоп.
12. Рентгенологические признаки определенного сакроилеита.
13. Синдесмофиты или паравертебральные оссификаты.
Диагноз может считаться правомочным, если проявления заболевания совпадают с тремя из приведенных выше критериев, из которых обязательно должен быть один из приведенных в пунктах 1, 11. При обнаружении РФ необходимо совпадение по 5 критериям, из них обязательны два - кожные псориатические высыпания и остеолизис (из книги Беляев Г.М., Рыжко П.П. Псориаз. Псориатическая артропатия. М.: МЕДпресс-информ, 2000).
Существующий метод не количественный, и диагностика наличия псориаза является субъективной.
Задачей изобретения является объективизация способа диагностики псориаза с целью выработки лабораторного критерия псориаза.
Сущность предложенного способа заключается в том, что наряду с определением клинических признаков проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов низкой и очень низкой плотности (ЛПНП ЛПОНОП), выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы (S) и интенсивности быстрой вспышки (I), после чего рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I, и если Н больше 4,8, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.
Патогенез псориаза связан с гиперсекрецией провоспалительных медиаторов, что в свою очередь приводит к цитолизу и активации системы мононуклеарных фагоцитов. Все эти процессы стимулируют перекисное окисление липидов, что приводит к их молекулярной трансформации.
Поэтому при псориазе изменяется характер хемилюминесценции липопротеидов сыворотки крови, что стало основой данного диагностического метода.
ПРИМЕР: Пациент К. Возраст: 59 лет.
Клинический диагноз: псориаз обыкновенный, распространенный, полиартрит II ст.
Сопутствующие заболевания: АГ 2 ст, риск 2. Атеросклеротический кардиосклероз.
Диагноз поставлен на основании:
- жалоб пациента на сильный зуд, высыпания на волосистой части головы, туловище, верхних, нижних конечностях, боли в локтевых суставах, мелких суставах кисти, стопы, скованность по утрам;
- данных анамнеза заболевания: больной себя считает в течение 8 лет, когда впервые после психоэмоционального стресса появились высыпания. Обострения 1 раз в год в осенне-зимний период;
- данных объективного осмотра: процесс распространенный, локализован на волосистой части головы, туловище, верхних, нижних конечностях, представлен ярко-красными папулами, сливающимися в бляшки, покрытые серебристо-белыми чешуйками с инфильтрацией в основании. Псориатическая триада положительная. Наблюдается незначительное ограничение активных и пассивных движений в локтевых, коленных суставах, мелких суставах кистей и стоп.
Кровь из локтевой вены забирали утром натощак. Сыворотку крови получали путем центрифугирования в течение 15мин при 2400 g.
Липопротеиды сыворотки крови выделяли осаждением в присутствии гепарина и СаСl2. К 2 мл 15 мМ раствора СаСl2 добавляли 0,2 мл сыворотки крови и 0,04 мл 1% раствора кристаллического гепарина. Пробирку осторожно встряхивали. Образовавшуюся суспензию через 5 мин инкубации при комнатной температуре центрифугировали в течение 5 мин при 200 g. Надосадочную жидкость, состоящую из ЛПВП и белков, удаляли пипеткой в отдельную пробирку. Осадок, который представлял собой суммарную фракцию ЛПНП и ЛПОНП, ресуспензировали в фосфатном буфере (Лопухин Ю.М., Владимиров Ю.А., Молоденков М.Н., Клебанов Г.И., Сергиенко В.И., Наумов А.В., Максимов В.А., Шерстнев М.П. Регистрация хемилюминесценции составных частей сыворотки крови в присутствии двухвалентного железа // Бюллетень экспериментальной биологии и клинической медицины. - №5. - 1982. - С.61-63).
Суспензию ЛПНП и ЛПОНП в количестве 200 мкл помещали в кювету хемилюминесцентной установки, добавляли 200 мкл фосфатного буфера (20 мМ КН2РO4, 10 мМ КСl pH 7,4). Для инициации ХЛ вводили 50 мкл FeSO4·7H2O, на 7 цикле вводили 100 мкл 3% Н2O2 (Климкина Е.И. Влияние производных 3-оксипиридина и 4-тиосульфокислоты на функциональное состояние печени при ее токсическом поражении. Автореферат дисс…. канд.мед.наук. - Смоленск, 2005. - С.59-60).
Регистрировали ХЛ в течение 20 циклов и рассчитывали высоту быстрой вспышки I=5616 у.е. и светосумму S=32124 у.е. После чего определяли коэффициент Н, равный отношению S к I, Н=32124/5616=5,8. Так как 5,8 больше 4,8, то пациент страдает псориазом.
Провели хемилюминесцентный анализ суспензии ЛПНП и ЛПОНП, выделенной из сыворотки у 12 пациентов с псориазом и 12 практически здоровых доноров по описанной выше методике. Данные исследования сведены в таблицу (табл.1).
У всех пациентов с псориазом значение коэффициента Н больше 4,8, в группе здоровых доноров меньше 4,8. Среднегрупповое значение коэффициента Н у пациентов с псориазом и здоровых доноров соответственно было равным 5,43±0,18 и 4,49±0,08 (р<0,001) (табл.2).
Таким образом, предложенный способ диагностики псориаза является простым, объективным, надежным, может быть широко использован в клинике как дополнительный лабораторный критерий в постановке диагноза.
Таблица 1 | ||||||
№ | Пациенты с псориазом | Здоровые доноры | ||||
I | S | Н | I | S | Н | |
1 | 17344 | 87171 | 5,026003 | 15177 | 69798 | 4,598933 |
2 | 17342 | 94311 | 5,4383 | 11220 | 57984 | 5,167914 |
3 | 13874 | 81522 | 5,875883 | 15256 | 71511 | 4,687402 |
4 | 14570 | 77718 | 5,334111 | 32022 | 128028 | 3,998126 |
5 | 17172 | 87801 | 5,113033 | 14528 | 67371 | 4,637321 |
6 | 13997 | 69807 | 4,987283 | 31325 | 120390 | 3,843256 |
7 | 18202 | 90777 | 4,987199 | 18566 | 85311 | 4,595012 |
8 | 8262 | 56973 | 6,895788 | 17723 | 81828 | 4,617051 |
9 | 9565 | 52854 | 5,525771 | 20608 | 86484 | 4,196623 |
10 | 9270 | 48387 | 5,219741 | 20047 | 83724 | 4,176385 |
11 | 11552 | 57345 | 4,964075 | 18602 | 87318 | 4,694011 |
12 | 7017 | 40794 | 5,813596 | 18407 | 86136 | 4,679524 |
Таблица 2 | ||||||
Группа | Н | |||||
(М±m) | ||||||
Пациенты с псориазом | 5,43±0,18 | |||||
Здоровые доноры | 4,49±0,08 |
Способ диагностики псориаза, включающий определение клинических признаков, отличающийся тем, что дополнительно проводят оценку хемилюминесценции суспензии липопротеидов низкой и очень низкой плотности, выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы S и интенсивности быстрой вспышки I, после чего рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I, и, если Н больше 4,8, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.