Способ размножения растений in vitro
Владельцы патента RU 2279212:
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ - МСХА имени К.А.ТИМИРЯЗЕВА" (RU)
Изобретение относится к выращиванию растений. После высадки побегов в сосуды с питательной средой сосуды закрывают двумя слоями пленки. Ближний к растениям слой выполнен из пленки, пропускающей влагу, а верхний - из термоусадочной пленки, которую после укоренения растений удаляют. За счет дальнейшей акклиматизации надземной системы растений до их пересадки в нестерильные условия увеличивается выход размноженных in vitro растений. 1 табл.
Предлагаемое изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано в плодовых питомниках.
Известен способ размножения растений in vitro (Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и ягодных культур. М.: Издательство МСХА, 1997).
Основным недостатком указанного способа является низкий процент приживаемости растений в нестерильных условиях.
Наиболее близким техническим решением к заявляемому изобретению является способ, предусматривающий покрытие сосудов пленкой Parafilm. Однако при использовании пленки Parafilm развиваются сверховодненные растения, которые при пересадке в нестерильные условия погибают, вследствие чего процент прижившихся растений снижается (Thomas M. Contolling vitrification of petunia in vitro. Programm and Abstracts 1988, p.758).
Задача предлагаемого изобретения - увеличить выход растений, размноженных in vitro, за счет акклиматизации надземной системы еще до пересадки в нестерильные условия. Для решения указанной задачи сосуды с побегами для укоренения закрывают двумя слоями пленки. Первый слой из пленки, пропускающей влагу, например целлофан, второй слой - пленки, не поглощающей влагу, например термоусадочная пленка. После чего растения оставляют на укоренение. После укоренения побегов верхнюю пленку удаляют, среда постепенно высыхает, надземная система акклиматизируется, грибная инфекция на поверхности не развивается, растения хорошо приживаются в нестерильных условиях.
Пример выполнения способа.
Для размножения in vitro использовали землянику сорта Редгонтлит. Верхушки побегов земляники высаживали на питательную среду Мурасига и Скуга, содержащую 0,5 мг/л БАП+0,01 мг/л ИМК+30 г/л сахарозы, витамины (пиридоксин, тиамин, никотиновая кислота по 0,5 мг/л), мезоинозит - 100 мг/л, агар 6 г/л. После пятого пассажа конгломерат побегов делили на отдельные побеги, высаживали на питательную среду, содержащую 1/2 макросолей M. С., 1 микросолей M. С., сахарозу 20 г/л, 0,2 мг/л ИМК. Остальные компоненты, как на этапе пролиферации побегов. Укоренение проходило при 16-часовом дне, интенсивности света 3-4 тыс. люкс, температуре 24-25°С, продолжительность укоренения - 30 дней. Часть сосудов для сравнения с предложенным способом закрывали пленкой Parafilm. Другую часть закрывали двумя слоями пленки, причем первый слой состоял из пленки, пропускающей влагу (целлофана), а второй слой - из термоусадочной пленки, не пропускающей влагу.
После укоренения растения, закрытые пленкой Parafilm, пересаживали:
1. непосредственно в нестерильные условия, процент прижившихся растений составил 50%;
2. после удаления пленки Parafilm сосуды оставляли открытыми в течение 10 дней.
После пересадки в нестерильные условия растения поражала грибная инфекция.
У укоренившихся растений в сосудах, закрытых двумя слоями пленки, снимали верхний слой из термоусадочной пленки и оставляли растения для акклиматизации под одним слоем пропускающей влагу пленки. После завершения акклиматизации растения пересаживали в нестерильные условия. Процент прижившихся растений составил 89-90%.
| Таблица | ||
| Влияние типа покрытия на приживаемость земляники в нестерильных условиях | ||
| Тип покрытия | Укореняемость, % | Приживаемость в нестерильных условиях, % |
| Известный способ: пленка Parafilm | 95 | 50 |
| После укоренения пленка снимается, сосуды открыты 10 дней | 95 | Грибная инфекция |
| Предлагаемый способ: целлофан-термоусадочная пленка | 95 | 89 |
Таким образом, предлагаемое изобретение позволит значительно увеличить приживаемость растений в нестерильных условиях.
Способ размножения растений in vitro, включающий укоренение побегов в стерильных условиях в закрытых сосудах с питательной средой с последующим выращиванием растений в нестерильных условиях, отличающийся тем, что после высадки побегов в питательную среду сосуды закрывают двумя слоями пленки, причем первый, ближний к растениям слой выполнен из пленки, пропускающей влагу, а второй верхний - из термоусадочной пленки, которую после укоренения растений удаляют, а пересадку осуществляют после их акклиматизации под пленкой, пропускающей влагу.
