Способ выявления вспышек аденовирусных конъюнктивитов среди населения

 

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может быть использовано при регистрации прогрессирующго нарастания числа больных с острыми конъюнктивитами. Сущность изобретения заключается в том, что при нарастании числа случаев заболеваний конъюнктивитом более чем в 1,8 раз по сравнению со средним его значением в аналогичный период в течение предшествующего года осуществляют взятие крови у больного острым конъюнктивитом при сроке болезни с 3-го по 10-й день, проводят выделение лейкоцитов параллельно в двух пробах, в одну из них добавляют аденовирус типа 8, а в другую - физиологический раствор, анализируют число поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле и при разнице их значений более 5 (при подсчете не менее 100 клеток) выявляют вспышку аденовирусных конъюнктивитов. Техническим результатом является сокращение времени и упрощение способа выявления вспышек аденовирусных конъюнктивитов среди населения.

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может быть использовано при регистрации прогрессирующего нарастания числа обращений в глазные кабинеты лечебных учреждений больных с острыми конъюнктивитами.

Известен способ выявления аденовирусного конъюнктивита (АВК) путем исследования соскоба конъюнктивы на антигены аденовируса с использованием метода флюоресцирующих антител (МФА). В основе лежит прямая иммунофлюоресценция с использованием поливалентной сыворотки для обнаружения группоспецифических антигенов аденовирусов. Однако способ не дает возможность определить тип аденовируса, а также выявить вспышку среди населения (Каспарова Е.А., Марченко Н.Р., Лосева И.Е. Метод флюоресцирующих антител в экспресс-диагностике аденовирусных поражений глаза. Вестник офтальмологии, 1998, №4).

Известен диагностический тест с использованием культуры клеток. Он требует длительного времени для изоляции вируса в клеточных культурах и его типирования. Кроме того, он трудоемкий, и для его проведения необходима специализированная вирусологическая лаборатория (Азнабаев М.Т., Мальханов В.Б., Южаков А.М., Майчук Ю.Ф., Орловская Л.Е. Клинико-лабораторная диагностика, лечение и организационно-профилактические мероприятия при острых конъюнктивитах. Методические рекомендации. - Уфа, 1992, с.7 и 8).

Известен также способ выявления АВК и эпидемического эпикератоконъюнктивита (ЭКК) путем исследования парных сывороток в различных серологических реакциях, например иммуноферментный анализ (Казакбаев А.Г., Анджелов В.О., Кричевская Г.И. и др. Иммуноферментный анализ в диагностике аденовирусных заболеваний глаз. Вестник офтальмологии, 1988, т.104, №6, с. 75-77). Указанный способ дает возможность установить спорадические случаи аденовирусных конъюнктивитов лишь только ретроспективно и то через 2-3 недели от начала болезни.

Все указанные способы имеют один общий недостаток: выявляют спорадические случаи заболевания и не позволяют выявить вспышку аденовирусных конъюнктивитов среди населения.

Техническим результатом изобретения является сокращение времени и упрощение способа выявления вспышек аденовирусных конъюнктивитов среди населения.

Технический результат достигается способом выявления вспышек аденовирусных конъюнктивитов среди населения, заключающимся в регистрации прогрессирующего нарастания числа обращений в глазные кабинеты лечебных учреждений больных с острыми конъюнктивитами и анализе у них периферической крови, а именно при нарастании числа спорадических заболеваний конъюнктивитом по обращаемости за определенный период времени более чем в 1,8 раз по сравнению со средним его значением в аналогичный период в течение предшествующего года, осуществляют взятие крови у больного острым конъюнктивитом при сроке болезни с 3-го по 10-й день, проводят выделение лейкоцитов параллельно в двух пробах, после чего в одну из них добавляют аденовирус типа 8, а в другую физиологический раствор, анализируют число поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле и при разнице их значений более 5 (при подсчете не менее 100 клеток) выявляют вспышку аденовирусных конъюнктивитов.

Способ осуществляют следующим образом.

В глазном кабинете лечебно-профилактического учреждения (ЛПУ) регистрируют в течение определенного времени, например недели, увеличение числа больных конъюнктивитами в 1,9 раз по сравнению с аналогичным периодом со средними значениями. У одного из больных с острым конъюнктивитом берут кровь в количестве 1,5 мл из пальца в стерильную пробирку видалевского типа (видалевскую пробирку), добавляют 0,5 мл 5%-ного цитрата натрия. Затем Пастеровской пипеткой по 3 капли цитратной крови вносят в 2 стерильные пробирки. В одну из них добавляют 1 каплю культуральной жидкости, содержащей аденовирус типа 8 при сроке болезни с 3-го по 10-й день, а в другую пробирку 1 каплю физиологического раствора. После перемешивания пробирки помещают в термостат при 37C на 1 ч. Затем из каждой пробирки делаются тонкие мазки, окрашивают их по Романовскому-Гимзе и подсчитывают по 100 нейтрофилов, среди которых учитывают нормальные клетки и поврежденные под воздействием аденовируса и в контроле, и при разнице их значений более 5 выявляют вспышку аденовирусных конъюнктивитов. Таким образом, можно диагностировать вспышку аденовирусного конъюнктивита среди населения.

Пример 1. Отделение приемного покоя и пункта оказания неотложной помощи Уфимского научно-исследовательского института глазных болезней. Учитываемый период 10 дней, май 2000 года, когда число больных составило 367 человек, тогда как в учитываемый срок 10 дней среднее значение числа больных составило в 1999 году 186 человек. Рост числа пациентов, обратившихся в глазной кабинет в десять дней мая 2000 года, в 2 раза больше по сравнению со средней величиной за 10 дней предшествующего периода в 1999 году. У одного из больных с острым конъюнктивитом на 7-й день болезни взяли кровь. При анализе числа поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле разница их значений составила 6 поврежденных нейтрофилов (при подсчете не менее 100 клеток). Таким образом, диагностирована вспышка аденовирусного конъюнктивита среди населения.

Пример 2. Глазной кабинет городской муниципальной поликлиники. Учитываемый период 30 дней августа 2000 года, когда число больных, обратившихся в глазной кабинет, составило 24 человека, тогда как в срок 30 дней среднее значение числа больных в августе 1999 года составило 11 человек, рост числа пациентов в августе 2000 года в 2,2 раза больше по сравнению со средней величиной в этот период в 1999 году. У одного из больных с острым конъюнктивитом на 10-й день болезни взяли кровь. При анализе числа поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле разница их значений составила 9 поврежденных нейтрофилов (при подсчете не менее 100 клеток). Таким образом, диагностирована вспышка аденовирусного конъюнктивита среди населения.

Пример 3. Глазной кабинет центральной районной поликлиники. Учитываемый период 15 дней, июнь 2000 года. Число больных, обратившихся в глазной кабинет в июне 2000 года, когда число больных составило 15 пациентов, тогда как в срок 15 дней среднее значение числа больных составило в 1999 году 10 человек. Рост числа пациентов, обратившихся в глазной кабинет в 15 дней июня 2000 года в 1,5 раза больше по сравнению со средней величиной за 15 дней июня предшествующего периода в 1999 году. У одного из больных с острым конъюнктивитом на 2-й день болезни взяли кровь. Вспышку диагностировать не удалось, так как рост числа пациентов, обратившихся в глазной кабинет в этом году, связан с сезонным характером увеличения заболеваемости конъюнктивитами аллергической этиологии. Это нашло отражение и в лабораторном тесте при анализе числа поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле, разница их значений составила 2 поврежденных нейтрофила (при подсчете не менее 100 клеток).

Таким образом, видна очевидность преимущества этого способа, а именно его упрощение по сравнению с аналогичными лабораторными решениями. Так, к примеру, отпадает необходимость в специальном дорогостоящем оборудовании, используются небольшие объемы крови для исследования. Нет необходимости в длительном культивировании материала и типировании выделенных вирусов. Применение предложенного способа дает возможность в короткие сроки выявить вспышку аденовирусных конъюнктивитов среди населения.

Формула изобретения

Способ выявления вспышек аденовирусных конъюнктивитов среди населения, заключающийся в регистрации прогрессирующего нарастания числа обращений в глазные кабинеты лечебных учреждений больных с острыми конъюнктивитами и анализе у них периферической крови, а именно, при нарастании числа случаев заболеваний конъюнктивитом по обращаемости за определенный период времени более чем в 1,8 раз, по сравнению со средним его значением в аналогичный период в течение предшествующего года, осуществляют взятие крови у больного острым конъюнктивитом при сроке болезни с 3 по 10 день, проводят выделение лейкоцитов параллельно в двух пробах, после чего в одну из них добавляют аденовирус типа 8, а в другую - физиологический раствор, анализируют число поврежденных нейтрофилов в опыте и контроле и при разнице их значений более 5 (при подсчете не менее 100 клеток) выявляют вспышку аденовирусных конъюнктивитов.