Фрагмент днк, плазмидный вектор, способ получения полипептида и полипептид, обладающий il-1 протеазной активностью

 

Изобретение относится к получению биологически активной IL-1 протеазы с помощью технологии рекомбинантных ДНК и может быть использовано в медицине. Изолирована последовательность ДНК, кодирующая полную аминокислотную последовательность (предшественник) IL-1 протеазы, в которой идентифицирована область, кодирующая "зрелую" форму фермента. В результате экспрессии названных последовательностей ДНК в культуре клеток млекопитающего синтезируется биологически активная IL-1 протеаза, обладающая способностью расщеплять неактивный предшественник IL-1 в положении между 116 и 117 аминокислотными остатками с образованием активного цитокина. 4 с.п.ф-лы, 2 табл., 7 ил.

Текст описания в факсимильном виде. Тм

Формула изобретения

1. Фрагмент ДНК, кодирующий полипептид, обладающий IL-1 протеазной активностью и имеющий полинуклеотидную последовательность от нуклеотида 1 до нуклеотида 1232, или от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую вырожденностью генетического кода.

2. Плазмидный вектор для экспрессии IL-1 протеазной активности в клетках млекопитающего, содержащий в сайте клонирования фрагмент ДНК по п.1.

3. Способ получения полипептида, обладающего IL-1 протеазной активностью, включающий стадии: a) культивирования клеток млекопитающего, продуцирующих указанный полипептид, в условиях, подходящих для его биосинтеза; и б) выделения и очистки продукта, в котором клетки, продуцирующие указанный полипептид, трансформированы рекомбинантным экспрессирующим вектором, включающим фрагмент ДНК от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую вырожденностью генетического кода.

4. Полипептид, обладающий IL-1 протеазной активностью, получаемый способом по п.3.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74