Способ обеспечения бактерицидной активности кускового мыла
Изобретение относится к способам получения кускового мыла, обладающего бактерицидной активностью. Способ включает подбор, по крайней мере, одного компонента мыла во фракции мыл жирных кислот, обладающего наибольшей поверхностной активностью, но все еще растворимого, и оптимизацию состава кускового мыла путем увеличения процентного содержания указанного соединения во фракции мыл жирных кислот и/или оптимизацию противоиона на любом мыле фракции таким образом, что коэффициент растворения зеина составляет больше 1. Способ позволяет получить мыло с повышенной антибактериальной активностью. 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.
Настоящее изобретение относится к композициям кускового мыла, главным образом к чистым композициям кускового мыла или композициям, в которых мыло составляет больше, чем 60%, предпочтительно больше, чем 80% композиции поверхностно-активного вещества. В частности, изобретение относится к композициям кускового мыла, предпочтительно включающим бактерицидные соединения, обладающие способностью быстро убивать (т.е. за 60 секунд или меньше, предпочтительно за 30 секунд или меньше) большие количества бактерий. В частности, путем включения больших количеств удовлетворительно растворимого обладающего высокой поверхностной активностью мыла (например, мыла с высоким содержанием орехового масла) и/или противоионов, которые являются относительно более растворимыми в воде (например, К или NH4, а не Na), способность вызывать гибель бактерий увеличивается. Не вдаваясь в подробности теории, удовлетворительная растворимость мыл с высокой поверхностной активностью и противоионы, которые повышают растворимость мыл, как полагают, позволяют мылам быстрее взаимодействовать с бактериями.
Кроме того, данное изобретение относится к способу получения более растворимого мыла, обладающего большей поверхностной активностью (тем самым обеспечивая антибактериальную активность) путем оптимизации содержания "более" растворимого мыла в мыле, включающем смесь "более" растворимого и "менее" растворимого мыла, таким образом, что коэффициент растворения зеина составляет больше 1 (например, для талловый жир (82)/кокосовое масло (18)/натриевого мыла); или путем использования более растворимых противоионов (например, К, а не Na). Установлено, что мерой того, сколько мыла с максимальной поверхностной активностью необходимо добавить для проявления антибактериальной активности (т. е. насколько мыло является растворимым) является способность композиции солюбилизировать зеин. Таким образом, изобретение также относится к обеспечению возможности доставки наибольшего количества соединений с максимальной поверхностной активностью, обеспечивающего определенный уровень растворения зеина (коэффициент растворения зеина больше 1). Гермициды или бактерицидные средства, используемые для обеспечения бактерицидной эффективности в очищающих кожу композициях, известны в данной области техники. Так, например, известно кусковое мыло, содержащее бактериостатики, такие как Триклозан (Triclosan) (Triclosan DP300) или Триклокарбон (Triclocarbon) (ТСС). Бактериостатики ингибируют рост бактерий на коже, когда они присутствуют на коже. Таким образом, при одинаковом составе степень антибактериальной активности в любом кусковом мыле (измеряемая путем длительного реального усилия) зависит от природы и количества антибактериального средства в кусковом мыле. Эффективность антибактериальной активности очищающих кожу продуктов, содержащих бактериостатики, однако, может быть измерена различными способами. Эффективность антибактериальной активности очищающих кожу продуктов, содержащих бактериостатики, как правило, измеряют двумя типами методов. Первый тип измеряет действие бактерицидных средств, депонированных на коже, и поэтому является, по существу, отражением реального действия. Второй тип измеряет способность композиций вызывать быструю гибель бактерий (менее чем за 1 минуту), определяемую путем тестирования раствора in-vitro. Время контакта бактерий с очищающим средством в in-vitro анализе на короткое время гибели в некоторой степени отражает условия поверхностного мытья. Хотя в самом деле поверхностное мытье может занимать значительно меньше времени, чем одна минута. Поскольку многие или большинство людей, которые моются кусками мыла, не могут использовать кусок мыла в течение более длительного времени, чем несколько секунд (среднее время мытья для детей может составлять 10 секунд или меньше), то становится очевидно, что существует потребность в доставке антибактериального средства в течение короткого периода времени (например, 60 секунд или меньше, предпочтительно 30 секунд или меньше), нахождение способов, обеспечивающих эффект быстрой гибели бактерий, весьма существенно. В связи с этим заявителями неожиданно было обнаружено, что немедленная бактерицидная активность, т.е. обеспечивающая быструю гибель бактерий, является функцией не сколько бактерицидного средства, а скорее самого мыла, или, более конкретно, его растворимости и поверхностной активности. Таким образом, факторы, которые повышают как растворимость, так и поверхностную активность, также увеличивают антибактериальную активность в условиях быстрой гибели. Кроме того, заявителями было установлено, что более высокая растворимость и поверхностная активность коррелируют с более высокой степенью растворения зеина мылом (зеин является относительно нерастворимым кукурузным белком, и способность мыла (поверхностно-активного вещества) солюбилизировать зеин отражает его способность взаимодействовать с белками). Т.е. более высокая растворимость зеина является, по существу, отражением способности мыла взаимодействовать с мембранными белками бактерий и вызывать их гибель. Известно, что кусковое мыло готовят с использованием как растворимых (например кокосовые мыла), так и нерастворимых (например, мыло с талловым жиром) компонентов. Растворимая фракция может существовать в форме мономерного монослоя при низких концентрациях и образовывать агрегаты, называемые мицеллами, при некоторой критической концентрации, определяемой как концентрация мицеллообразования. Таким образом, концентрация мицеллообразования для чистого компонента соответствует максимальной концентрации его мономерного состояния, возможного в водной фазе. Растворимость в воде и концентрация мицеллообразования мыла и других поверхностно-активных веществ уменьшаются с увеличением длины углеводородной цепи. Поверхностная активность поверхностно-активного вещества, с другой стороны, увеличивается с увеличением длины цепи. Таким образом, увеличение длины цепи противоположным образом влияет на растворимость и поверхностную активность (более низкая растворимость и более высокая поверхностная активность). Для того, чтобы взаимодействовать с бактериями и вызвать их гибель, молекулы мыла должны присутствовать в водной фазе и связаться с мембранами при экспозиции с бактериями. Обычно считают, что мономеры связываются с мембранами, а мицеллы, в основном, действуют как резервуар мономеров. Степень связывания возрастает с увеличением поверхностной активности молекулы при условии, что она доступна в водной фазе. Таким образом, для увеличения быстрой гибели при данной температуре должно иметься достаточное количество молекул мыла с высокой поверхностной активностью в мономерной форме, доступной для взаимодействия с бактериями. Это подразумевает, что молекулы мыла должны иметь высокую поверхностную активность, высокую концентрацию мицеллообразования и подходящую растворимость. По этой причине, при данной температуре существует оптимальная длина цепи, которая обладает подходящей растворимостью и поверхностной активностью для связывания с бактериями. При комнатной температуре эта оптимальная длина цепи мыла составляет примерно С12. Растворимость мыла с определенной длиной цепи можно увеличить посредством выбора соответствующих противоионов. Например, известно, что растворимость мыла уменьшается в ряду: NH4 мыло или триэтаноламиновые мыло > К мыло > Na мыло. Следовательно, можно ожидать, что антибактериальная активность мыла также будет соответствовать порядку: NH4 мыло > К мыло > Na мыло. Поэтому для данной системы мыла ее немедленная убивающая активность может быть увеличена просто путем замены противоионов Na на К или NH4. Как уже было отмечено ранее, другой способ повышения растворимости состоит просто в увеличении "растворимой" фракции (для данной температуры) мыла в куске. Результирующее влияние растворимости и поверхностной активности отражается на бактериальной гибели, а также на растворении зеина. В одном варианте воплощения настоящее изобретение относится к композициям кускового мыла (т.е. содержащим больше, чем 60% мыла), необязательно включающим антибактериальные соединения, обладающим способностью "быстро убивать бактерии". В частности, использованием всех или некоторых компонентов мыла, обладающих оптимальной растворимостью и поверхностной активностью, удается получить кусковое мыло с повышенной способностью вызывать быструю гибель бактерий (способность убивать за приблизительно 60 секунд или меньше). Например, композиции обладают повышенной способностью обеспечивать быструю гибель бактерий по сравнению со стандартным талло-коко-Na кусковым мылом. В частности, путем подбора наиболее поверхностно-активного, но все же еще растворимого (длина цепи достаточно длинная для того, чтобы быть поверхностно-активным, но еще не настолько длинная, чтобы не растворяться) мыла (или фракции мыла) и оптимизации состава кускового мыла (путем увеличения процентного содержания указанного соединения или фрагмента по отношению к общему содержанию веществ мыла, и/или варьируя противоионы), удается достичь быстрой гибели. Фракция поверхностно-активного, но все еще растворимого мыла должна быть такой, чтобы коэффициент растворения зеина был выше 1. Обычно чем ниже отношение таллового жира к кокоату, тем выше этот коэффициент. Соответственно желательно уменьшить содержание талловата и увеличить содержание кокоата. Во втором варианте воплощения изобретение включает способ, обеспечивающий солюбилизацию мыла с наибольшей поверхностной активностью (включающее часть или все компоненты мыла). Этот результат, в свою очередь, достигается путем подбора противоионов (некоторые противоионы делают мыло с данной длиной цепи более растворимым по сравнению с другими) и/или путем оптимизации фрагментов мыла в композиции мыла (подбирая соотношение мыла с менее "растворимой" и более длинной цепью и мыла с более "растворимой" и более короткой длиной цепью таким, чтобы коэффициент растворения зеина был больше 1). Изобретение в дальнейшем характеризуется примером со ссылкой на соответствующие фигуры. Перечень фигур Фигура 1 показывает, что обеспечивающие большую растворимость противоионы, такие как калий, NH4, МЕА или ТЭА (TEA) приводят к увеличению бактерицидной активности по сравнению с отсутствием активности для противоиона натрия. Фигура 2 снова показывает, что использование противоиона калия (Lifebuoy



*Соотношение талловата и кокоата составляет 82/18 ТСС=триклокарбонTM
Протокол
Анализ на время бактерицидного контакта (ВСТ Assay) (Curry, J.C., Soap & Chemical Specialties, March, 1968; A Modified Version of the "Curry" Test was Used to Stimulate Hand Washing Conditions)
Все растворы кускового мыла получают в стерильной деионизованной воде и тестируют при концентрациях 0,5, 1, 2, 4 и 8% маc/маc. Растворы постоянно перемешивают на водяной бане при 30oС. Активность растворов кускового мыла оценивают по отношению к трем штаммам грамположительных бактерий (Staphylococcus aureus ATCC #6538, Staphylococcus epidermidis ATCC #155, и Staphylococcus epidermidis ATCC #12228) и двум штаммам грамотрицательных бактерий (Klebsiella pneumoniae ATCC # 4352 и Escherichia coli ATCC #10536). S. epidermidis и S. aureus являются обычными кожными резидентными (постоянно живущими на коже) бактериями, а другие бактерии являются характерными представителями бактерий, в основном временно обнаруживаемых на коже. Готовили два последовательных разведения каждой бактериальной культуры в питательном бульонеTM Difco. Все культуры инкубировали в течение 24 часов при 34oС. Бульонные культуры второго дня (~108 клеток/мл) использовали для тестирования, для чего их разбавляли в 0,1% пептонной воде до ~106 клеток/мл. Пять мл агараTM (Difco), содержащего 0,5% Твина 80 и 0,07% лецитина в качестве нейтрализаторов для ингибирования дальнейшего действия гермицидов, и 1% декстрозы (LMCTA), суспендировали в специально сконструированных овальных пробирках. Один мл раствора тестируемой композиции добавляли в пробирки (25

1,5% зеина перемешивали в 30 мл раствора 1% раствора поверхностно-активного вещества при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь центрифугировали при 2000 об./мин в течение 30 минут. К осадку зеина добавляли 10 мл воды, инкубировали в течение 30 минут, а затем высушивали в сушильном шкафу при 45oС под вакуумом в течение 48-72 часов до тех пор, пока вся вода не испарится. Коэффициент растворимости зеина в поверхностно-активном веществе определяли как выраженную в % разницу в массе зеина. Как правило, согласно изобретению увеличенное количество зеина коррелирует с повышенной растворимостью (то есть более растворимое мыло более свободно взаимодействует с белком, и количество растворяемого зеина увеличивается). ПРИМЕР 1
Настоящее изобретение демонстрирует, что с помощью подбора соединений, которые являются поверхностно-активными, однако все еще растворимыми, удается достичь значительной антибактериальной активности (т.е. убить более чем 99,9% микроорганизмов за 60 секунд или меньше). Признаком поверхностной активности является низкое поверхностное натяжение (низкое поверхностное натяжение коррелирует с высокой поверхностной активностью, которая, в свою очередь, коррелирует с хорошим антибактериальным потенциалом), в то же время признаком растворимости является критическая концентрация мицеллообразования (более высокая концентрация мицеллообразования, как правило, означает, что мономерное соединение более растворимо в воде). Кроме того, растворимость зеина выше определенного уровня (например, коэффициент растворимости зеина больше 1, например, измеренное при соотношении талловат/кокоат 82/18, которое равно 1) означает, что поверхностно-активное вещество солюбилизует белок, и поэтому может иметь более высокую тенденцию к солюбилизации бактерий. В частности, коэффициент растворимости зеина представляет собой отношение процента зеина, растворенного конкретной композицией, деленное на процент зеина, растворенного натриевым мылом соотношением талловата и кокоата 82/18 при сравнении при том же самом составе композиции мыла. Таким образом, коэффициент растворимости зеина является признаком того, является ли соединение поверхностно-активным и может ли быть активным в отношении бактерий. Обычно более высокая растворимость зеина коррелирует с более высокой антибактериальной активностью. Принимая во внимание эти факторы, заявители провели измерения критической концентрации мицеллообразования и поверхностного натяжения при 25oС для различных композиций натриевого мыла. Данные, полученные от А.N. Campbell и G.R. Lakshminaraganam, Can. J. Chem. (1965), 43, 1729-1737), являются следующими (см. табл. А). Как следует из приведенных данных, С8, С10 и C12 (высокие ККМ) обладают большей растворимостью, чем C14. Поэтому, хотя C14 является также поверхностно-активным, как и С10 или C12 (поверхностные натяжения сравнимы), С8 и С10 должны быть более доставляемы. Наилучшим кандидатом, однако, является C12, поскольку C12 имеет наибольшую поверхностную активность (наименьшее поверхностное натяжение) и ККМ, достаточно высокую для обеспечения растворимости и доставки мыла С12. Это также подтверждает анализ данных растворимости зеина, представленных в табл. Б. Данные растворимости зеина подтверждают, что поверхностная активность мыла С8 и С10 не является близкой к поверхностной активности мыла С12, и особенно при более низких концентрациях. Т.е. высокая растворимость зеина подтверждает, что мыло C12 является растворимым и имеет хорошую поверхностную активность по отношению к зеину. Можно ожидать, что те же свойства мыло C12 будет проявлять по отношению к бактериям, а не только к зеину, т.е. мыло С12 имеет наилучшую комбинацию поверхностной активности и растворимости (что подтверждается высокой растворимостью зеина). Додецил сульфат натрия, будучи более растворимым, чем мыло C12, обеспечивает даже более высокое растворение зеина, чем мыла С12. Это также проявляется в более высокой антибактериальной активности додецил сульфата натрия. Высокий коэффициент растворимости зеина для С18:1 и С18:2 (моно- и ди-ненасыщенных карбоновых кислот) также подтверждает, что эти компоненты имеют хорошую комбинацию поверхностной активности и растворимости. ПРИМЕР 2
Мыло с разной длиной цепи изучали следующим образом. Бактерицидная активность натриевого мыла против S. aureus зависела от длины цепи и степени ненасыщенности мыла. Оказалось, что бактерицидная активность возрастала с увеличением концентрации мыла и времени контакта с бактериями. Бактерицидная активность (

С12-С10>С18:2>С18:1>С8>С14-С16-С18
Явно наблюдается тенденция, демонстрирующая, что мыло с большей длиной цепи и степенью ненасыщенности обычно превосходит мыло с меньшей длиной цепи (например, С16 и C18). В этом случае, не вдаваясь в теорию этого вопроса, полагают, что это происходит, поскольку мыло С12 представляет собой мыло с наибольшей длиной цепи (наиболее поверхностно-активное), которое все еще способно растворяться, и поэтому способно взаимодействовать с зеином и, что более интересно, с бактериями. Соединения С14 имеют сходную поверхностную активность (аналогичную C16), однако не могут растворяться также хорошо (низкая ККМ), как C12 или С10, и поэтому влияние на антибактериальную активность композиции сильнее у С10, чем у С14. ПРИМЕР 3
Как следует из фигуры 3, обработка фракции более "растворимым" кокоатом по сравнению с менее "растворимым" талловатом приводит к увеличению коэффициента растворимости зеина (больше 1), что, в свою очередь, коррелирует с увеличением бактерицидной активности. Было исследовано влияние различных противоионов на бактерицидную активность натриевых мыл. Как показано на фигуре 1, замена противоиона на аммоний, калий, моноэтаноламин (МЕА) или триэтаноламин (TEA) увеличивает бактерицидную активность натрий миристата против S. aureus. Следует иметь в виду, что бактерицидная активность С16 и натриевых мыл с большей длиной цепи не улучшалась при замене противоиона на калий. Не касаясь теории этого вопроса, это может быть связано с тем, что растворимость мыла с большей длиной цепи, как правило, имеет большую ККМ, что коррелирует с меньшей растворимостью в воде мыла с большей длиной цепи, и возрастает незначительно. Замена противоиона на калий путем добавления КСl в LifebuoyTM повышает его бактерицидную активность. Фигура 2 показывает бактерицидную активность LifebuoyTM по отношению к различным организмам при различных концентрациях КСl. Введение КСl повышает активность Индонезийского LifebuoyTM как против испытанных грамположительных, так и грамотрицательных организмов, за исключением S.epidermldls АТСС 12228.
Формула изобретения
РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9