Средство для лечения глубоких кожных дефектов
Изобретение относится к области биологии и медицины, а именно к трансплантологии. Сущность изобретения: клеточную суспензию аттестованного диплоидного штамма или коллагеновые микроносители с выращенным клеточным монослоем иммобилизуют в гель полиэтиленоксида для последующего нанесения на ожоговые поверхности, длительно незаживающие кожные раны или другие кожные дефекты. Техническим результатом изобретения является сокращение сроков заживления ран, упрощение условий транспортировки, снижение трудоемкости получения и переноса клеточного материала, расширение сферы применения фибробластов аттестованного диплоидного штамма. 1 з.п.ф-лы.
Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к трансплантологии.
В последние годы в клинической практике широкое распространение получил метод восстановления поврежденного кожного покрова с помощью культивированных in vitro ауто- и аллофибробластов клеток человека [1, 2]. Известно, что фибробласты посредством синтеза компонентов экстрацеллюлярного матрикса не только стимулируют адгезию, пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов при культивировании, но и оказывают непосредственное влияние на заживление ран, стимулируют рост сохранившихся очагов эпителия, а также способствуют лучшему приживлению аутодермального расщепленного лоскута [3]. Фибробласты предварительно культивируют на различных подложках в виде пленок и на микроносителях, а затем, после образования монослоя, переносят на раневую поверхность [2, 5]. Однако используемые алло- и аутофибробласты взрослой кожи намного уступают фетальным фибробластам, как по ростовым свойствам, так и в отношении стимуляции роста кератиноцитов в ране. Кроме того, они быстро стареют в культуре и не могут длительно размножаться. В связи с этим диплоидные штаммы от взрослых доноров непригодны для приготовления и полной аттестации банков и, следовательно, являются потенциально опасными для использования в клинической медицине. Для иммобилизации клеток в биотехнологии используют различные гели; некоторые из них способны поддерживать пролиферацию клеток, другие сохранять жизнеспособность длительное время при определенных условиях. В ряде работ по реконструкции дермы чаще всего применяются гели, основой которых служит коллаген [6, 7], в других случаях используют для временной иммобилизации клеток агар, агарозу, метилцеллюлозу и другие [8]. Вышеперечисленные гели могут создавать на ране дополнительную питательную среду для развития микрофлоры и нежелательны для использования в медицине. В связи с этим гель полиэтиленоксида, благодаря своим качествам, является наиболее приемлемым для временной иммобилизации клеток с последующей трансплантацией на раневую поверхность [9]. Наиболее близким к заявленному изобретению является аллотрансплантат для восстановления кожного покрова и способ лечения кожных дефектов с помощью культивированных клеток диплоидного штамма [10, прототип]. Согласно данному способу аттестованные клетки диплоидного штамма Л-68 размораживают из рабочего банка, после чего подвергают 5-7 кратному пассированию. Последнее субкультивирование проводят в чашках Петри на целлофановой пленке в течение 3-5 суток до получения полного монослоя. Чашки Петри, стерильно упакованные, доставляют в операционную и клетки вместе с мембраной переносят на раневую поверхность. Несмотря на то, что этот метод зарекомендовал себя как достаточно эффективный для восстановления кожного покрова, он имеет некоторые недостатки. Данный способ предполагает использование пленки, которая деформируется на неровных и глубоких раневых поверхностях, что препятствует миграции клеток на рану. Кроме того, пленки с выращенными фибробластами должны транспортироваться в чашках Петри в стерильном контейнере при соблюдении температурного режима, в строго горизонтальном положении с исключением грубого механического встряхивания. Задачей изобретения является возможность сокращения сроков заживления ран, упрощение условий транспортировки, снижение трудоемкости получения и переноса клеточного материала, расширение сферы применения клеток аттестованного диплоидного штамма в виде гелевой формы, способных проникать в неровные и глубокие раны. Поставленная задача решается применением средства, содержащего суспензию клеток в питательной среде ИГЛА MEM в концентрации 2,5-5,0![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/8226.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/8226.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/8226.gif)
1. Саркисов Д. С., Глушенко Е.В., Гуруков Ш.Р. и др. Бюллетень экспер. биол. и мед. 1991. Т. 5, 542, с. 542-544. 2. Глушенко Е.В., Алексеев А.А., Морозов С.С. и др. Хирургия, 1993, 11, 26-29. 3. Саркисов Д.С., Алексеев А.А., Глушенко Е.В., и др. Вестн. РАМН, 1994, т. 6, с. 6-11. 4. Колокольцова Т. Д. , Юрченко Н.Д., Колосов Н.Г. и др. Вестник РАМН, 1998, 3, с. 32-35. 5. Заявка РФ 93037867/14 "Способ лечения длительно незаживающих ран и трофических язв кожных покровов". А 61 К 35/14. 6. Lubertret L. Skin Pharmacol 1990, 3, Р. 144-148. 7. Jeffry R, Yarmush M. Science 1997, 4, P. 6-15. 8. Freshney R.I. Culture of Animal Cells. Second Editor - 1987, Alan R. Liss, Inc., New York. 9. Патент РФ 2139044 "Средство для лечения гнойно-некротических ран и ожогов "коллагель". 6 А 61 К 9/06, 38/48, бюл. 28. 10. Патент РФ 2142820 "Аллотрансплантат для восстановления кожного покрова, способ его получения и способ восстановления кожного покрова при повреждениях различной этиологии". 6 А 61 L 27/00, бюл. 35. 11. Патент РФ 2112545 "Способ получения живой коревой вакцины". А 61 К 35/19, бюл. 16. 12. Патент РФ 2010028 "Способ восстановления кожного покрова у тяжелообожженных". С 12 N 5/00, бюл. 6.
Формула изобретения
Суспензия клеток в питательной среде ИГЛА MEM с концентрацией клеток 2,5-5,0
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/8226.gif)
Питательная среда для культур клеток, % - 10
Носитель, % - Остальное до 100
2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что в качестве питательной среды для культур клеток используют среду ИГЛА MEM 10-кратную, а в качестве носителя - гель полиэтиленоксида.
PC4A Государственная регистрация перехода исключительного права без заключения договора
Лицо(а), исключительное право от которого(ых) переходит без заключения договора:
Федеральное государственное унитарное предприятие «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
(73) Патентообладатель:
Федеральное государственное учреждение науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Дата и номер государственной регистрации перехода исключительного права: 16.04.2010 № РП0000704
Извещение опубликовано: 27.05.2010 БИ: 15/2010