Способ получения вируса-индуктора интерферона

Авторы патента:

Бобкова Е.В.

Муллагулова М.Н.

C12N15/20 - интерфероны

C12N15/19 - интерфероны; лимфокины; цитокины

A61K39/17 - вирус болезни Ньюкастла

A61K38/21 - интерфероны

A61K35/14 - кровь

Изобретение относится к области биотехнологической промышленности, в частности к получению вируса-индуктора для производства человеческого лейкоцитарного интерферона. Способ предусматривает получение вируса-индуктора интерферона; полученный маточный материал (штамм "Н" вируса болезни Ньюкастл ГКВ 2348) разводят фосфатно-солевым буфером с добавлением 10,0% Д(+)-лактозы, вводят в аллантоисную полость куриных эмбрионов в концентрации 10⁶ ЦПД/50/0,2 мл с последующим инкубированием и отбором вируссодержащей жидкости. Способ обеспечивает получение титров интерферона с активностью 16000 - 18000 МЕ/мл против 11000 - 14000 МЕ/мл у аналога. 1 табл.

Изобретение относится к области медицинской промышленности, в частности к получению вируса-индуктора для производства человеческого лейкоцитарного интерферона.

В производстве человеческого лейкоцитарного интерферона предусматривается использование в качестве вируса-индуктора интерферона вакцинного штамма "Н" вируса болезни Ньюкастл (ВБН). Этот штамм используется во многих странах мира, выпускающих человеческий лейкоцитарный интерферон для медицинской и ветеринарной практики или в научных исследованиях. Это наиболее безопасный вирус-индуктор, обладающий индуцирующими свойствами при получении лейкоцитарного интерферона человека или животных.

Известен способ получения вируса-индуктора интерферона путем культивирования штамма "Н" вируса болезни Ньюкастл в 9-11 дневных куриных эмбрионах [1] . Заражающая доза вируса составляет 10⁶ ЦПД/50/0,2 мл. Вирус-индуктор разводят в 0,1 М фосфатно-солевом буфере. Эта доза вводится в аллантоисную полость эмбриона шприцем с соблюдением условий стерильности. Затем эмбрионы инкубируют 48 ч при (32

0,5)^oC. После инкубации эмбрионы охлаждают при 4^oC и отсасывают вируссодержащую аллантоисную жидкость, которая после необходимых контролей используется в качестве вируса-индуктора интерферона. Вируссодержащая жидкость должна отвечать следующим требованиям: быть бактериологически стерильной, иметь гемагглютинирующую активность (ГА) 256 единиц, инфекционный титр не ниже 10¹¹ ЦПД/50/мл. При использовании этого индуктора в производстве человеческого лейкоцитарного интерферона получают интерферон с противовирусной активностью 11 000 - 14 000 МЕ/мл.

Задача изобретения - повышение интерферониндуцирующей способности вирусного индуктора.

Для решения поставленной задачи в способе получения вируса-индуктора интерферона маточный материал (штамм "Н" вируса болезни Ньюкастл ГКВ N 2348) разводят фосфатно-солевым буфером с добавлением 10,0% Д(+)-лактозы, вводят в аллантоисную полость куриных эмбрионов в концентрации 10⁶ ЦПД/50/0,2 мл, с последующим инкубированием и отбором вируссодержащей жидкости.

Отличительным признаком предлагаемого способа является добавление Д(+)-лактозы в фосфатно-солевой буфер при разведении маточного штамма, что обеспечивает получение более высоких титров интерферона с активностью 16 000 - 18 000 МЕ/мл против 11 000 - 14 000 МЕ/мл у прототипа (cм. таблицу).

Пример 1. Штамм "Н" вируса болезни Ньюкастл (ГКВ N 2348) использовали в качестве маточного штамма. Для получения производственного штамма в аллантоисную полость 9-10 дневного куриного эмбриона вводят с соблюдением условий стерильности в концентрации 10⁶ ЦПД/50/0,2 мл исходной суспензии маточного штамма, разведенного в фосфатно-солевом буфере, с добавлением 10,0% Д(+)-лактозы. Инкубируют в течение 48 ч при температуре (32

0,5)^oC. После инкубации эмбрионы охлаждают в течение 18-20 ч при ^oC, отсасывают вируссодержащую аллантоисную жидкость. Титр интерферона

-типа, полученный с данным индуктором, составляет 16 000 МЕ/мл.

Пример 2. Штамм "Н" вируса болезни Ньюкастл (ГКВ N 2348) использовали в качестве маточного штамма. Для получения производственного штамма в аллантоисную полость 9-10 дневного куриного эмбриона вводят с соблюдением условий стерильности в концентрации 10⁶ ЦПД/50/0,2 мл исходной суспензии маточного штамма, разведенного в фосфатно-солевом буфере, с добавлением 10,0% Д(+)-лактозы. Инкубируют в течение 48 ч при температуре (32

-типа, полученный с данным индуктором, составляет 18 000 МЕ/мл.

Источники информации 1.Патент РФ N 2140284, кл. А 61 К 38/21, публ. 27.10.99.

Формула изобретения

Способ получения вируса-индуктора интерферона, включающий введение вируса болезни Ньюкастла, штамм "Н", ГКВ 2348 в фосфатно-солевом буфере в аллантоисную полость куриных эмбрионов с последующим их инкубированием и отбором вируссодержащей жидкости, отличающийся тем, что используют фосфатно-солевой буфер с добавлением 10% Д (+)-лактозы.

РИСУНКИ

Рисунок 1

TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели"

Страница: 299

Напечатано: Адрес для переписки: 450024, г. Уфа, ул. Новороссийская, 105, ГУП “Иммунопрепарат”, отдел промышленной собственности

Следует читать: Адрес для переписки: 119021, Москва, Зубовский б-р, 4, ФГУП НПО “Микроген”, патентно-лицензионный отдел

Номер и год публикации бюллетеня: 31-2001

Код раздела: FG4A

Извещение опубликовано: 10.04.2005 БИ: 10/2005

Способ получения собачьего @ -интерферона // 1669402

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения веществ с антивирусной активностью

Способ получения лошадиного @ - и @ -интерферона // 1642956

Изобретение относится к биотехнологии

Способ получения гибридного интерферона типа @ 1/ @ 2 // 1604164

Изобретение относится к генетической инженерии, в частности к способам получения гибридных интерферонов типа ω<SB POS="POST">1</SB>/α<SB POS="POST">2</SB>

Рекомбинантный белок-фактор ингибирования липогенеза, днк, его кодирующая, вектор экспрессии, рекомбинантный штамм клеток млекопитающих соs 1-продуцент фактора ингибирования липогенеза, способ его получения и композиция, обладающая активностью ингибирования липогенеза // 2158307

Изобретение относится к биотехнологии

Способ получения биомасс рекомбинантных штаммов бактерий escherichia coli, обогащенных полипептидами со свойствами цитокинов человека // 2158303

Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии и представляет собой способ получения биомасс рекомбинантных штаммов E.coli, содержащих плазмидные ДНК, кодирующие биосинтез цитокинов со свойствами факторов некроза опухолей и (ФНО-альфа и ФНО-бета), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) и гранулоцит-макрофаг колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека и несущие в качестве селективного маркера ген bla (устойчивость к ампициллину)

Фрагмент к днк, кодирующий гликопротеин tcf-ii // 2113480

Изобретение относится к биотехнологии

Рекомбинантная плазмидная днк plt 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, рекомбинантная плазмидная днк plt 16, используемая для конструирования днк plt 9, и штамм бактерий escherichia coli - продуцент полипептида со свойствами лимфотоксина человека // 1561510

Изобретение относится к генетической инженерии и биотехнологии, позволяет получать микробиологическим синтезом полипептид со свойствами лимфотоксина (ЛТ) человека и упростить технологию его получения

Рекомбинантная плазмида plfn-f-pa кодирующая синтез лейкоцитарного интерферона человека, и штамм e. coli - продуцент лейкоцитарного интерферона f человека // 1312962

Изобретение относится к микробиологической промышленности, молекулярной биологии и генетической инженерии и представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмиду, обеспечивающую биосинтез лейкоцитарного интерферона человека, и штамм E

Рекомбинантная плазмида plfn-a-p2 кодирующая синтез лейкоцитарного интерферона a человека, и штаммы e.coli - продуценты лейкоцитарного интерферона человека // 1312961

Вакцинный препарат и способ вакцинации птиц // 2169581

Изобретение относится к области ветеринарии

Сухая живая вакцина против ньюкаслской болезни и способ ее получения // 2162341

Вакцина против ньюкаслской болезни птиц // 2159129

Гранулированная вирусвакцина против ньюкаслской болезни птиц для перорального применения // 2153356

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, а именно, к вакцине против ньюкаслской болезни птиц, предназначенной для перорального применения

Способ изготовления гранулированной вакцины против ньюкаслской болезни птиц для перорального применения // 2153355

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, а именно к производству биологических препаратов для иммунизации птицы против ньюкаслской болезни

Вирусвакцина против ньюкаслской болезни птиц для перорального применения // 2149022

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, а именно к вакцине против ньюкаслской болезни птиц, предназначенной для перорального применения

Способ получения вакцины против чумы плотоядных // 2129442

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии, а именно к способам получения живых культуральных вакцин против чумы плотоядных, и может использоваться на предприятиях биологической промышленности

Способ повышения специфической устойчивости птиц к болезни ньюкасла // 2129030

Изобретение относится к ветеринарии

Способ изготовления сухой вакцины преимущественно против болезни ньюкасла // 2122429

Изобретение относится к способу получения высокоэффективной сухой вирусвакцины из штамма Ла-Сота против болезни Ньюкасла для профилактической иммунизации кур и цыплят в благополучных и угрожаемых по ньюкаслской болезни хозяйствах промышленного и индивидуального (фермерские хозяйства) птицеводства

Иммунобиологический препарат для лечения и профилактики чумы, парвовирусного энтерита и вирусного гепатита собак ("иммунокан") // 2108805

Изобретение относится к ветеринарии и касается препарата для лечения и профилактики чумы, паровирусного энтерита и вирусного гепатита собак ("иммунокан")

Оральный препарат интерферона в виде таблеток // 2175554

Изобретение относится к медицине, фармацевтической промышленности и касается создания новых лекарственных форм, содержащих ЧЛИ