Производные 4,1-бензоксазепина

 

Изобретение относится к новым производным 4,1-бензоксазепин-2-она формулы (I), где R¹ - низший алкил, замещенный по крайней мере одной необязательно замещенной гидроксильной группой, R² и R³ независимо друг от друга - водород или фенил, который замещен 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей низшие C₁-C₄ алкоксигруппы; Х - связь, метиленовая группа или связывающая группа с длиной цепи 1-7 атомов, выбранная из группы, содержащей -(CH₂)m-E-(chr₆)n-, где m и n = 1 или 2 независимо друг от друга: E-связь или атом кислорода, -NR₅-, -CONR₇-, где R₅ -метилсульфонил, R₆ и R₇ независимо друг от друга -(i) водород, (ii) низший алкил, который не замещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей пиперидин, индолил, возможно этерифицированные карбоксигруппы, (iii) бензил, Y - необязательно замещенный карбамоил и/или заместители на атоме N карбамоила, взятые вместе, образуют кольцо, которое может быть замещено, или тетразолил, или пиперидин, и кольцо А замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей атомы галогенов, или их соли. Также раскрыты два конкретных соединения. Соединения обладают ингибирующим скваленсинтетазу и противогрибковым действиями. Изобретение может быть использовано при лечении гиперлипемии и артериосклероза. 3 с. и 3 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к производным 4,1-бензоксазепин-2-она или их солям, которые являются полезными для ингибирования скваленсинтетазы и роста грибков, и к их применению.

Гиперхолестеринемия, высокое кровяное давление и курение являются тремя основными известными факторами, вызывающими ишемические заболевания. Адекватный контроль концентрации холестерина в крови является крайне важным для профилактики или лечения, помимо ишемической болезни, также и коронарного склероза.

В качестве фармацевтических композиций для понижения холестерина в крови было обращено внимание на композиции для контроля биосинтеза холестерина наряду с теми, что ингибируют его абсорбцию путем связывания желчной кислоты, включая, наряду с другими, холестерин, колестипол (описанный, например, в патенте США N 4027009), и теми, что подавляют кишечное поглощение холестерина путем ингибирования ацикофермента A холестерин ацилтрансферазы (АСАТ), включая мелинамид (описанный во французском патенте N 1476569). В качестве фармацевтических препаратов для контроля биосинтеза холестерина для медицинского использования предназначены ловастатин (описан в патенте США N 4231938), симвастатин (описан в патенте США N 4444784), правастатин (патент США N 4346227) и т.д., которые способны ингибировать особенно 3-окси-3-метилглутарилкофермент (HMG-CoA) редуктазу. Однако при ингибировании HMG-CoA редуктазы ингибируется не только биосинтез холестерина, но и биосинтез некоторых других компонентов, таких как убихинон, долихол и гем А, которые являются необходимыми для живого организма, так что имеется опасность возникновения вызванных в результате нежелательных побочных эффектов. Скваленсинтетаза является ферментом, вовлеченным в фиксированную стадию де ново биосинтетического холестеринового пути. Этот фермент катализирует восстановительную димеризацию двух молекул фамезилпирофосфата в форму сквалена.

С другой стороны, соединения, предлагаемые в качестве ингибиторов биосинтеза холестерина при ингибировании скваленсинтетазы, описаны в JPA HI (1989) - 213288, JPA Н2 (1990) - 101088, JPA Н2 (1990) - 235820, JPA Н2 (1990) - 235821, JPA H3 (1991) - 20226, JPA H3 (1991) - 63591, JPA H3 (1991) - 48288, патенте США N 5019390, Journal of Medicinal Chemistry, 51 (10), стр. 1369-1871 (1988), патенте США N 5135935 и WO 9215579.

Также, соединения, предлагаемые как ингибиторы роста грибков при ингибировании скваленсинтетазы, описаны в JPA Н4 (1992) - 279589, ЕР 475706-A, EP 494622-A и ЕР 503520-A.

Среди производных 4,1-бензоксазепина производные 4,1-бензоксазепин-2-она, у которых 2-положение замещено кето-группой, те, у которых один из атомов водорода в 3-положении замещен другим заместителем, описаны в JPA 557 (1982) - 345765 и в Chem. Pharm. Bull., 34, 140 (1986).

Известно, что убихинон, долихол и гем А синтезируются из фарнезилпирофосфата по пути биосинтеза холестерина. Следовательно, чтобы избежать побочных эффектов из-за отсутствия этих веществ желательно иигибировать ферменты после фарнезилпирофосфата, особенно скваленсинтетазу, в пути биосинтеза холестерина.

После интенсивных исследований с приведенной выше точки зрения настоящие изобретатели нашли, что производные 4,1-бензоксазепин-2-она обладают отличным ингибирующим скваленсинтетазу действием и противогрибковым действием, и разработали настоящее изобретение.

Следовательно, настоящее изобретение обеспечивает: (1) Производные 4,1-бензоксазепин-2-она общей формулы (I) в которой R¹ - низший алкил, замещенный по крайней мере одной необязательно замещенной гидроксильной группой; R² и R³ независимо друг от друга означают: (i) водород, (ii) низший алкил, (iii) фенил, который не замещен или замещен 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей 1) атомы галогенов, 2) низшие C₁-C₄ алкилы, 3) низшие C₁-C₄ алкоксигруппы, 4) гидроксигруппу, где группа 2) не замещена или замещена 1-3 атомами галогенов, группа 4) не замещена или замещена заместителями, выбранными из группы, содержащей низшие C₁-C₄ алкилы и бензил; и два соседних заместителя на фенильной группе могут вместе образовывать кольцо, или (iv) пиридил; X - связь или связывающая группа с длиной цепи 1-7 атомов, выбранная из группы, содержащей -(CH₂)_m-E-(chr₆)_n-, где m и n обозначают, независимо друг от друга, 0, 1, 2 или 3, E - связь или атом кислорода, атом серы, сульфоксид, сульфон, - NR₅-, -NHCO-, -CONR₇- или -NHCONH-, где R₅ - водород, низший алкил, метилсульфонил, 4-метилбензолсульфонил или ацил, R₆ и R₇ независимо друг от друга означают (i) водород, (ii) низший алкил, который не замещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей гетероциклическую группу, выбранную из группы, содержащей 1) индолил, 2) гидроксигруппу, 3) возможно этерифицированные карбоксигруппы и 4) фенил, (iii) бензил; (iv) фенил; Y представляет необязательно замещенный карбамоил и/или заместители на атоме N карбамоила, взятые вместе, образуют кольцо, которое может быть замещено, или азотсодержащую гетероциклическую группу; и кольцо A не замещено или замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей 1) атомы галогенов, 2) низшие C₁-C₄ алкилы и 3) низшие C₁-C₄ алкоксигруппы; в которой группа 2) не замещена или замещена 1-3 атомами галогена, и эти заместители могут образовывать кольцо с каждым из соседних заместителей или их соли.

Предпочтительно в соединениях формулы I и их солях R¹ представляет низшую алкильную группу, замещенную одной гидроксильной группой, которая может быть замещена; R², R³ - атом водорода или фенильная группа, замещенная C₁-C₄ алкоксигруппой, причем R² и R³ являются одинаковыми или различными; X представляет метиленовую группу;
Y - карбамоильная группа, которая может быть замещена; кольцо A представляет бензольное кольцо, замещенное атомом галогена.

Среди указанных производных 4,1-бензоксазепина и их солей предпочтительны соединения формулы

где R¹ представляет низшую алкильную группу, которая замещена гидроксильной группой или гидроксильной группой, замещенной ацетильной группой;
R_a - C₄-C₄ алкоксигруппа;
Y - карбамоильная группа, которая может быть замещена CH₃SO₂, или пиперидино-карбонильная группа, которая может быть замещена;
Z представляет атом галогена; и их соли;
а также соединения формулы

где R¹ представляет C₁-C₇ алкильную группу, которая замещена гидроксильной группой или гидроксильной группой, замещенной ацетильной группой;
Y представляет карбамоильную группу, которая может быть замещена CH₃SO₂ или пиперидино-карбонильную группу, которая замещена гидроксильной группой и/или группой -CH₂-COOR_b (где R_b - атом водорода, метильная группа или этильная группа), и их соли.

Особый интерес представляют:
(3R, 5S)-N-метилсульфонил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- (3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетамид формулы

и его соли,
и N-[(3R, 5S)-1-(3-ацетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин- 4-уксусная кислота формулы:

и ее соли.

В качестве солей соединения (I) можно упомянуть фармацевтически приемлемые соли, включающие неорганические соли, такие как гидрохлорид, гидробромид, сульфат, нитрат, фосфат и т.п., соли органических кислот, такие как ацетат, тартрат, цитрат, фумарат, малеат, толуолсульфонат, метансульфонат и т. п. , соли металлов, такие как натриевая соль, калиевая соль, кальциевая соль, алюминиевая соль и т.п., и основные соли, такие как триэтиламинная соль, гуанидиновая соль, аммонийная соль, гидразиновая соль, хининовая соль, цинхониновая соль и т. п.

Способ получения производных 4,1-бензоксазепина, представленного формулой (I)

где каждый из символов имеет значения, определенные выше, или их фармацевтически приемлемых солей, заключающийся в реакции циклизации соединения, представленного формулой:

где W означает
где R₈ - галоген (например фтор, хлор, бром и йод) или группа -OSO₃CH₃, а другие символы имеют значения, указанные выше.

Как отмечалось выше, соединение, представленное формулой (I) настоящего изобретения обладает способностью ингибировать скваленситетазу и противогрибковым действием. Кроме того, соединения настоящего изобретения способны ингибировать другие ферменты в пути биосинтеза холестерина. По существу можно сказать, что соединение формулы (I) настоящего изобретения ингибирует биосинтез холестерина, оно является полезным для профилактики или лечения гиперхолестеринемии или коронарного склероза у млекопитающих (например мышей, крыс, кроликов, собак, кошек, коров, свиней и людей) и, кроме того, для профилактики или лечения грибковых инфекций.

Указанное соединение (I) может быть введено человеку орально или неорально. Вводимые орально композиции могут быть в твердой или жидкой форме, более конкретно, в виде таблеток (включая покрытые сахаром таблетки и таблетки, покрытые пленкой), сиропы, эмульсии, суспензии или т.п. Эти композиции могут быть приготовлены известными вообще способами и содержат носители или экципиенты, обычно используемые для фармацевтических препаратов, например такие носители или экципиенты, как лактоза, крахмал, сахароза или стеарат магния, при производстве таблеток.

Примерами композиций для неорального введения являются препараты для инъекций и свечи, а инъекции включают гиподермические инъекции, интрадермальные инъекции, внутримышечные инъекции. Эти препараты для инъекций могут быть приготовлены известными вообще способами, более конкретно, путем суспендирования или эмульгирования соединения настоящего изобретения в стерильной воде или масле, обычно используемом для приготовления композиций для инъекций. Водные жидкости, используемые для приготовления препаратов для инъекций, включают физиологический солевой раствор и изотонический раствор и, при необходимости, подходящий суспендирующий агент, такой как натрийкарбоксиметил-целлюлоза, неионное поверхностно-активное вещество или т.п., также могут быть использованы. В качестве масла можно привести кунжутное масло, соевое масло и т.п. и бензилбензоат, бензиловый спирт и т.п. можно использовать в качестве солюбилизатора. Приготовленные таким образом препараты для инъекций обычно заливают в соответствующие ампулы.

Соединение формулы (I) или его соль может быть безопасно использовано при низкой токсичности. Хотя ежедневная доза варьирует в зависимости от состояния и массы пациента, вида соединения, пути введения и других факторов, например, в случае введения соединения настоящего изобретения для лечения гиперхолестеринемии, ежедневная оральная доза для взрослого человека составляет примерно 1-500 мг, предпочтительно - примерно 10-200 мг. В этом интервале совсем не наблюдалось токсичности.

Соединения формулы (I) в качестве ингибиторов скваленсинтетазы эффективно применяются по отношению к млекопитающим, например человеку, в терапевтически эффективном количестве, что обычно обеспечивается оральной ежедневной дозой для взрослого человека от примерно 1 до примерно 500 мг, предпочтительно - примерно 10-200 мг. В случае неорального применения (например в виде инъекции или свечей) терапевтически эффективное количество ежедневной дозы составляет от примерно 0,1 до примерно 100 мг, предпочтительно - примерно 1-20 мг.

Соединения настоящего изобретения также показывают широкий диапазон противогрибковой активности, как определено по методам разбавления в бульоне или на агаре.

В случае введения соединения настоящего изобретения для лечения грибковых инфекций обычно применяют 2-5 мг/кг в виде единичной дозы при противогрибковом лечении.

Соединения формулы (I) при противогрибковом лечении эффективно применяются к млекопитающему, например человеку, в терапевтически эффективном количестве, которое обычно обеспечивается оральной дневной дозой для взрослого человека от примерно 0,1 до примерно 100 мг, предпочтительно примерно 1-50 мг. При неоральном применении, таком как инъекции или свечи, терапевтически эффективная дневная доза составляет примерно 0,1-100 мг, предпочтительно - примерно 1-50 мг.

В последующем описании получают два типа рацемических диастереоизомеров в зависимости от вида соединений, которые получают благодаря наличию асимметрического атома углерода в 3-м и 5-м положениях. Изомеры, у которых заместители в 3-м и 5-м положениях ориентированы в одинаковом направлении по отношению к плоскости 7-членного кольца, называются цис-изомерами, тогда как те, у которых заместители в 3-м и 5-м положениях ориентированы в противоположных друг другу направлениях, называются транс-изомерами.

Наилучший вариант осуществления изобретения
Нижеследующие рабочие примеры, примеры композиций и экспериментальные примеры приводятся лишь для более подробной иллюстрации настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничение изобретения.

[Примеры]
Ссылочный пример 1
Сложный метиловый эфир N-[(3R,5S)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-1-неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетил]пиперидин-4-карбоновой кислоты

К раствору (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты (0,5 г) и 0,25 г гидрохлорида сложного метилового сложного эфира пиперидин-4-карбоновой кислоты в диметилформамиде (10 мл) добавляют при комнатной температуре диэтилцианофосфонат (0,28 г) и триэтиламин (0,38 мл) и смесь перемешивают в течение 1 ч. К смеси добавляют воду (100 мл) и этилацетат (100 мл). Органический слой промывают 1н. HCl и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, после чего сушат водным сульфатом магния. Растворитель отгоняют и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюенты:гексан: этилацетат = 1:1) (об/об) с получением 0,62 г бесцветного кристаллического продукта, т.пл. 124-126^oC.

Элементный анализ для C₃₁H₃₉ClN₂O₇ 0,3H₂O:
Вычислено: C 62,84; H 6,74; N 4,73
Найдено: C 62,78; H 6,69; N 4,72.

Ссылочный пример 1
Нижеследующее соединение было получено способом, в основном описанным в Примере 1.

Соединение N 2-38,
Y ,
т. пл. (^oC) 150-151.

Ссылочный пример 2
N-[(3R, 5S)-7-Хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-неопентил-2-оксо-1,2,3,5- тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил]пиперидин-4-карбоновая кислота

Соединение (0,5 г), полученное, как описано в Ссылочном примере 1, растворяют в смеси 1н. водного раствора гидроксида натрия (4 мл), метанола (10 мл) и тетрагидрофурана (5 мл). Раствор перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем добавляют 1н. HCl (50 мл) и этилацетат (100 мл). Органический слой промывают водой и сушат безводным сульфатом магния. Растворитель удаляют и остаток перекристаллизовывают из гексана-диэтилового эфира с получением 0,47 г бесцветных кристаллов, т.пл. 145-147^oC.

Элементный анализ для C₃₀H₃₇ClN₂O₇ 0,3H₂О:
Вычислено: C 62,29; H 6,55; N 4,84
Найдено: C 62,20; H 6,65; N 4,83.

Ссылочный пример 3
N-Толуолсульфонил-(3R, 5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетиламид

К раствору (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты (0,5 г) и п-толуолсульфонамида (0,22 г) в дихлорметане добавляют 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил) карбодиимид (0,27 г) и диметиламинопиридин (20 мг). Смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре и концентрируют при пониженном давлении. Концентрат растворяют в этилацетате (100 мл). Раствор промывают водой и сушат, а затем растворитель отгоняют. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюенты: дихлорметан: метанол: вода = 200: 10: 1 (об/об) с получением 0,6 г бесцветных кристаллов, т.пл. 110-113^oC.

Элементный анализ для C₃₁H₅₅ClN₂O₇S H₂O:
Вычислено: C 58,81; H 5,89; N 4,42
Найдено: C 58,73; H 5,73; N 4,62.

Ссылочный пример 4 (3R, 5S)-N-фосфонометил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-неопентил-2-оксо- 1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамид

К раствору соединения (1,0 г), полученного, как описано в Ссылочном примере 1, в дихлорметане (5 мл), добавляют триметилсилилбромид (0,38 г). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и добавляют этилацетат. Эту смесь промывают 0,5 н. водным раствором гидроксида натрия, насыщенным водным раствором хлорида аммония и воды, а затем сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из смеси этанола и диэтилового эфира (1:10) с получением 0,41 г бесцветных кристаллов, т.пл. 152-155^oC.

Элементный анализ для C₂₅H₃₂ClH₂O₇P 1,7H₂O:
Вычислено: C 51,28; H 6,09; N 4,78
Найдено: C 51,20; H 6,11; N 4,77.

Ссылочный пример 5
(3R, 5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-неопентил-1,2,3,5- тетрагидро-3-(1H(или 3H)-тетразол-5-ил)-метил-4,1-бензоксазепин-2-он

(1) Диметилформамидный раствор (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-1-неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-уксусной кислоты (2,0 г), хлорида аммония (1,2 г) и триэтиламина (1,0 мл) охлаждают в ледяной бане. К раствору добавляют диэтилцианофосфонат (0,85 г) и триэтиламин (0,5 мл). Смесь перемешивают еще 20 мин, добавляют воду со льдом и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают водой и сушат безводным сульфатом магния.

Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из диэтилового эфира с получением 1,0 г (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-1-неопентил-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетамида в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 170-172^oC.

(2) Соединение (3,2 г), полученное в стадии (1), и тионилхлорид (1,8 мл) суспендируют в толуоле (40 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 1 ч при 110 - 120^oC. Растворитель удаляют. К остатку добавляют этилацетат (100 мл) и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл). Органический слой сушат безводным сульфатом натрия, а затем растворитель отгоняют. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюенты: гексан: этилацетат = 3: 1) (об/об) с получением 1,7 г (3R,5S)-7- хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-неопентил-1,2,3,5-тетрагидро-3- цианометил-4,1-бензоксазепин-2-она в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 193-194^oC.

(3) К раствору соединения (1,7 г), полученного в стадии (2) в толуоле (20 мл), добавляют триметилсилилазид (0,45 г) и окись дибутилолова (IV) (30 мг). Смесь перемешивают в течение 24 ч при 110 - 120^oC. Реакционную смесь концентрируют, добавляют диэтиловый эфир (20 мл), а затем промывают водным раствором гидроксида натрия. Водный слой подкисляют 1н. HCl и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают водой, а затем сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из дихлорметана-гексана с получением бесцветных кристаллов, т.пл. 148-150^oC.

Элементный анализ для C₂₄H₃₈ClN₅O₄ 0,5H₂О:
Вычислено: C 58,24; H 5,91; N 14,15
Найдено: C 58,43; H 6,18; N 13,76.

Рабочий пример 1
(3R, 5S)-7-Хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)- 1,2,3,5-тетрагидро-3-[1H-(или 3H)-тетразол-5-ил]метил-4,1-бензоксазепин-2-он

(1) К раствору (3)-4-хлор-2-[ - -гидрокси-[2,3- диметоксифенил)метил] анилина (2,0 г) и бикарбоната натрия (0,86 г) в этилацетате (20 мл) по каплям добавляют раствор сложного моноэтилового эфира хлорида диметилмалоновой кислоты (1,3 г) в этилацетате (20 мл). Смесь перемешивают в течение 3 ч при охлаждении льдом. К раствору добавляют воду (30 мл) и органический слой сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением сложного этилового эфира (S)-2-[N-(2-(2,3-диметокси -- гидроксибензил)-4- хлорфенил] карбамоил] -2,2-диметилуксусной кислоты (2,92 г) в виде бесцветного маслянистого соединения.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 1,22 (3H, т, J=7,4 Гц), 1,37 (3H, с), 1,42 (3H, с), 3,84 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,05-4,19 (3H, м), 6,01 (1H, с), 6,61 (1H, d, J= 1,8, 7,4 Гц), 6,90-7,05 (3H, м), 7,28 (1H, d, J=3,0, 8,8 Гц), 8,07 (1H, д, J=8,4 Гц), 9,49 (1H, шир).

(2) К раствору соединения (2,83 г), полученного в стадии (1) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляют, при охлаждении льдом, алюмогидрид лития (0,5 г). Смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия (13 мл) и воду (50 мл), а затем нерастворившиеся вещества отфильтровывают. Фильтрат экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают водой и сушат, после чего растворитель отгоняют. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюенты: гексан: этилацетат = 1:1 (об/об) с получением (S)-[5-хлор-2-(2,2-диметил-3-гидроксипропил) аминофенил](2,3-диметоксифенил)метанола (0,88 г) в виде бесцветного маслянистого соединения.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,91 (3H, с), 0,93 (3H, с), 2,95 (2H, с), 3,37 (2H, с), 3,83 (3H, с), 3,88 (3H, с), 5,99 (1H, с), 6,63 (1H, д, J=8,8 Гц), 6,77 (1H, дд, J= 1,6, 7,6 Гц), 6,90 (1H, дд, J=1,6, 7,6 Гц), 7,03 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,03 (1H, т, J=7,6 Гц), 7,13 (1H, d, J=2,6, 6,8 Гц).

(3) К раствору соединения (0,88 г), полученному в (2) в этилацетате (10 мл), добавляют бикарбонат натрия (0,39 г). К смеси добавляют раствор сложного моноэтилового эфира хлорида фумаровой кислоты (0,45 г) в этилацетате (10 мл) и перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь промывают водой и сушат, а затем растворитель отгоняют. Остаток растворяют в этаноле (10 мл), к которому добавляют карбонат калия (0,70 г). Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют этилацетат (50 мл), а затем промывают водой и сушат. Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из этилацетата-гексана с получением сложного этилового эфира (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(2,2- диметил-3-гидроксипропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3- уксусной кислоты (0,57 г) в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 188-190^oC.

(4) Соединение (0,5 г), полученное в стадии (3), растворяют в смеси тетрагидрофурана (5 мл) и этанола (3 мл). К раствору добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия (1 мл), а затем перемешивают в течение 20 мин при 60^oC. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл) с последующей экстракцией этилацетатом. Экстракт сушат, а растворитель отгоняют. Остаток перекристаллизовывают из этилацетата-гексана с получением (3R,5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(3-гидрокси-2,2- диметоксипропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин- 3-уксусной кислоты (0,33 г) в виде бесцветных кристаллов, т. пл. 199-202^oC.

(5) К раствору соединения (2 г), полученного в стадии (4), и 3-аминопропионитрила (0,29 г) в диметилформамиде (20 мл), при комнатной температуре, добавляют диэтилцианофосфонат (0,75 г) и триэтиламин (0,51 г). Смесь перемешивают в течение 30 мин, а затем добавляют сложный этиловый эфир уксусной кислоты (100 мл). Смесь промывают водой и сушат. Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из гексана с получением 3-[[(3R,5S)-7-хлор-(2,3-диметоксифенил)-1-(3- гидрокси-2,2-диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетил]амино]пропионитрила (2,25 г) в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 118-121^oC.

(6) Соединение (2 г), полученное в стадии (5), и уксусный ангидрид (0,39 г) растворяют в пиридине (20 мл). К раствору добавляют диметиламинопиридин (0,1 г) и смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Растворитель отгоняют и остаток растворяют в этилацетате (100 мл). Раствор промывают 1н. HCl и водой, а затем сушат безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют и получают 3-[(3R,5S)-1-(3-ацетилокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин- 3-ацетил] аминопропионитрил (2,2 г) в виде бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,95 (3H, с), 1,01 (3H, с), 2,03 (3H, с), 2,55-2,71 (2H, м), 2,92 (1H, d, J=8,0, 14,4 Гц), 3,41- 3,59 (3H, м), 3,62 (3H, с), 3,72 (1H, д, J=11,2 Гц), 3,86 (1H, д, J=11,2 Гц), 3,90 (3H, с), 4,33 (1H, дд, J= 5,0, 8,0 Гц), 4,56 (1H, д, J=14,2 Гц), 6,26 (1H, с), 6,50-6,60 (1H, шир.), 6,64 (1H, с), 6,97-7,38 (5H, м).

(7) Раствор соединения (2,2 г), полученного в стадии (6), трифенилфосфина (2,0 г), диэтилазидокарбоксилата (0,87 г) и триэтилсилилазида (1,3 г) в тетрагидрофуране (10 мл) перемешивают в, течение 2 ч при 60^oC. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Концентрат очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюенты: гексан:этилацетат = 1:1 (об/об)) и получают (3R,5S)-7-хлор-3-[1- (2-цианоэтил)-1H-тетразол-5-ил]метил-5-(2,3-диметоксифенил)-1- (2,2-диметил-3-гидроксипропил)-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-2-она в виде бесцветного маслянистого соединения. Это соединение растворяют в смеси метанола (10 мл) и тетрагидрофурана (10 мл) и добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия (8 мл). Смесь перемешивают в течение одного часа при 60^oC. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл), подкисляют 1н. HCl и экстрагируют этилацетатом. Экстракт сушат, а растворитель отгоняют. Остаток перекристаллизовывают из этилацетата-гексана с получением 0,96 г бесцветных кристаллов, т.пл. 158-160^oC.

Элементный анализ для C₂₄H₂₈HClN₃O₅:
Вычислено: C 57,43; H 5,62; N 13,95
Найдено: C 57,55; H 5,58; N 13,75.

Рабочий пример 2
Соединение, полученное, как описано в Примере 1-(4), подвергают реакции по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 1, и получают соединения, указанные в Таблице 1.

Рабочий пример 3
Соединение, полученное, как описано в Примере 2, подвергают реакции по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 2, и получают соединения, представленные в Таблице 2.

Рабочий пример 4
(3R, 5S)-N-Метилсульфонил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- (3-гидрокси-2,2-диметоксипропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетамид

Используя соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 1 (4) (0,4 г), и метансульфонамид (0,1 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Рабочем примере 14, и получают 0,075 г бесцветного кристаллического продукта, т.пл. 221-223^oC.

Элементный анализ для C₂₅H₃₁ClN₂O₅S:
Вычислено: C 54,10; H 5,63; N 5,05
Найдено: C 54,30; H 5,69; N 4,87.

Рабочий пример 5
(3R, 5S)-N-Метилсульфонил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(3- гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1- бензоксазепин-3-ацетамид

(1) К раствору оксалилхлорида (2,2 мл) в дихлорметане (120 мл) при -78^oC по каплям добавляют раствор диметилсульфоксида (2,4 мл) в дихлорметане (20 мл). Смесь перемешивают при -78^oC в течение 10 мин, а затем добавляют раствор 5-(гидроксиметил)-2,2,5-триметил-1,3-диоксана (2 г) в дихлорметане (40 мл). Смесь перемешивают при -78^oC еще 15 мин. К этому раствору добавляют триэтиламин (13,2 мл). Смесь нагревают вплоть до 0^oC и добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (40 мл). Органический слой промывают водой и сушат безводным сульфатом натрия с последующей отгонкой растворителя. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле [элюенты: гексан: этилацетат (3: 1)] с получением 2 г альдегида в виде бесцветного маслянистого соединения. К метаноловому раствору этого альдегида (2 г) добавляют (S)-4-хлор-2-[ - гидрокси-(2,3- диметоксифенил)метил]анилин (3,3 г) и уксусную кислоту (0,75 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин, а затем добавляют цианоборогидрид натрия (0,8 г). Смесь перемешивают в течение ночи при 60^oC, добавляют воду и экстрагируют этилацетатом. Экстракт последовательно промывают водным 1 н раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле [элюенты: гексан-этилацетат (2:1)], в результате чего получают 3,7 г (S)-[2-(2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-илметил)-амино-5-хлорфенил] (2,3- диметоксифенил)метанола в виде бесцветного маслянистого соединения.

¹H-ЯМР (CDCl₃) ,81 (3H, с), 1,38-1,45 (6H, м), 3,22 (2H, с.), 3,30-3,40 (1H, шир. ), 3,60 (4H, с), 3,83 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,90-5,00 (4H, шир.), 5,97 (1H, с), 6,71-7,27 (6H, м).

(2) К раствору соединения, полученного в стадии (1) (3,7 г), в этилацетате (40 мл), добавляют бикарбонат натрия (1,78 г). К смеси при 0^oC добавляют сложный моноэтиловый эфир хлорида фумаровой кислоты (1,41 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. К раствору добавляют воду. Органический слой промывают водой, а затем сушат безводным сульфатом натрия с последующей отгонкой растворителя. Остаток (5,2 г) растворяют в этаноле (100 мл) и добавляют карбонат калия (1,1 г). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют воду с последующей экстракцией этилацетатом. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия, а затем растворитель отгоняют. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле [элюенты:гексан-этилацетат (2:1) - этилацетат] с получением 2,65 г сложного этилового эфира (3R,5S)-7-хлор-1-(2,2,5- триметил-1,3-диоксан-5-илметил)-5-(2,3-диметоксифенил)-2- оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты (A) и 1,12 г сложного этилового эфира (3R,5S)-7-хлор-1-(3- гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропил)-5-(2,3-диметоксифенил) -2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты (B), каждый из которых представляет собой бесцветный аморфный твердый продукт.

A: ¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,95 (3H, с), 1,24 (3H, т, J=7,0 Гц), 1,36 и 1,39 (каждый 3H, с), 2,77 (1H, дд, J=5,8, 16,4 Гц), 3,04 (1H, дд, J=7,8, 16,4 Гц), 3,29 (1H, д, J=12,2 Гц), 3,40 (1H, д, J=12,2 Гц), 3,58 (3H, с), 3,68 (2H, с), 3,89 (3H, с), 4,07-4,19 (3H, м), 4,40 (1H, d, J=5,8, 7,8 Гц), 4,48 (1H, д, J=14,2 Гц), 6,16 (1H, с), 6,63 (1H, д, J=1,8 Гц), 6,95-7,45 (6H, м).

В: ¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,62 (3H, с), 1,25 (3H, т, J=7,0 Гц), 2,78 (1H, дд, J=5,2, 16,6 Гц), 3,07 (1H, дд, J=8,2, 16,6 Гц), 3,39-3,80 (4H, м), 3,60 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,13 (2H, дкв., J=1,8, 7,0 Гц), 4,20-4,28 (1H, м), 4,41 (1H, дд, J=5,2, 18,2 Гц), 4,85 (1H, д, J=14,6 Гц), 6,12 (1H, с), 6,63 (1H, с), 6,89-7,39 (6H, м).

(3) К этаноловому раствору соединения (A), полученного в стадии (2) (2,25 г), добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия (4,0 мл). Смесь перемешивают при 60^oC в течение 1 ч, а затем добавляют воду с последующей нейтрализацией путем добавления 1н. HCl. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия, а растворитель отгоняют и получают 2,3 г (3R,5S)-7-хлор-1-(2,2,5- триметил-1,3-диоксан-5-илметил)-5-(2,3-диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5- тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты в виде бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,95 (3H, с), 1,35 и 1,39 (каждый 3H, с), 2,84 (1H, дд, J=7,8, 16,4 Гц), 3,08 (1H, дд, J=7,8, 16,4 Гц), 3,28 (1H, д, J=12,2 Гц), 3,41 (1H, д, J=12,2 Гц), 3,58 (3H, с), 3,69 (2H,с), 3,89 (3H, с), 4,16 (1H, д, J= 13,8 Гц), 4,35 (1H, дд, J=5,4, 7,8 Гц), 4,89 (1H, д, J=13,8 Гц), 6,16 (1H, с), 6,65 (1H, д, J=2,0 Гц), 6,96-7,47 (5H, м).

(4) К раствору соединения, полученного в стадии (3) (0,15 г) в диметилформамиде (2 мл) добавляют метансульфонамид (29 мг), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид (65 мг) и диметиламинопиридин (10 мг). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, а затем к этой смеси добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают, а затем сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток растворяют в ацетоне (2 мл). К раствору добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,1 г). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и к этой смеси добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают водой, сушат безводным сульфатом натрия, а растворитель отгоняют. Остаток промывают смесью этилового эфира и гексана (1:1) и фильтруют с получением 40 мг бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,63 (3H, с), 2,85-2,92 (2H, м), 3,28 (3H, с), 3,25-3,70 (5H, м), 3,59 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,43 (1H, т, J=6,1 Гц), 4,78 (1H, д, J=14,2 Гц), 8,16 (1H, с), 6,67 (1H, с), 6,95-7,40 (6H, м).

Рабочий пример 6
N-Mетилсульфонил-N-[3R, 5S)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- (3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин- 3-ацетил] пиперидин-4-ацетамид

Используя соединение (0,5 г), полученное, как описано в Рабочем примере 3-1, и метансульфонамид (0,1 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 3, в результате чего получают 90 мг бесцветных кристаллов, т.пл. 175-180^oC.

Элементный анализ для C₃₂H₄₂ClN₃O₉S₁:
Вычислено: C, 56,50; H, 6,22; N, 6,18
Найдено: C, 56,70; H, 6,50; N, 5,90.

Рабочий пример 7
(3R, 5S)-N-бис(Этокси)фосфинилметил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1- (3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин- 3-ацетамид

Используя соединение (1,0 г), полученное, как описано в Рабочем примере 1-(4), и диэтиламинометилфосфонат (0,38 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 1, в результате чего получают 1,24 г бесцветных кристаллов, т.пл. 138-140^oC.

Элементный анализ для C₂₉H₄₀ClN₂O₉P:
Вычислено: C, 55,55; H, 6,43; N, 4,47
Найдено: C, 55,25; H, 6,47; N, 4,44.

Рабочий пример 8
(3R, 5S)-N-Фосфонометил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(3-гидрокси-2,2- диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамид

Соединение (0,3 г), полученное, как описано в Рабочем примере 7, подвергают реакции, в основном по методике, описанной в Ссылочном примере 4, в результате чего получают 0,26 г аморфного твердого соединения.

¹H-ЯМР (CD₃OD) : 0,94 (3H, с), 0,93 (3H, с), 2,75-2,82 (2H, м), 3,20 (1H, д, J=11,4 Гц), 3,40-3,70 (3H, с), 3,58 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,35-4,46 (2H, м), 6,18 (1H, с), 6,53 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,08-7,61 (5H, м).

Рабочий пример 9
N-[(3R, 5S)-7-Хлор-1-(2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5-илметил-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты сложный этиловый эфир,

Используя соединение (2,0 г), полученное, как описано в Рабочем примере 5-(3), и гидрохлорид сложного этилового эфира пиперидин-4-уксусной кислоты (0,7 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 1, в результате чего получают 2,4 г бесцветного аморфного твердого продукта.

^H-ЯМР (CDCl₃, ) : 0,96 (3H, с), 1,25 (3H, т, J=7,2 Гц), 1,36 и 1,39 (каждый 3H, с), 1,65-1,82 (4H, м), 1,95-2,08 (1H, м), 2,18-2,26 (2H, м), 2,49-2,63 (1H, м), 2,73 (1H, дл, J=4,8, 15,8 Гц), 2,92-3,06 (1H, м), 3,12 (1H, дд, J=8,2, 15,8 Гц), 3,31 (1H, д, J=12,0 Гц), 3,10 (1H, д, J=12,0 Гц), 3,58 (3H, с), 3,65 (1H, д, J=11,8 Гц), 3,73 (1H, д, J=11,8 Гц), 3,89 (3H, с), 3,94-3,99 (1H, м), 4,04-4,18 (3H, м), 4,46-4,56 (3H, м), 6,16 (1H, с), 6,60-6,62 (1H, м), 6,95-7,46 (5H, м).

Рабочий пример 10
N-[(3R, 5S)-7-Хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метил-пропил)-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты сложный этиловый эфир

К раствору соединения, полученного, как описано в Рабочем примере 9, (2,0 г), в ацетоне (20 мл), добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (35 мг) и воду (2 мл). Смесь перемешивают при 50^oC в течение 6 ч. К реакционной смеси добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают 1н. водным раствором гидроксида натрия и воды, а затем сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют с получением 1,62 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,62 (3H, с), 1,00-1,34 (2H, м), 1,26 (3H, т, J=7,4 Гц), 1,70-1,81 (2H, м), 1,95-2,08 (1H, м), 2,19-2,28 (2H, м), 2,51-2,78 (2H, м), 3,01-3,08 (1H, м), 3,17 (1H, дд, J=9,0, 15,2 Гц), 3,40-3,74 (5H, м), 3,60 (3H, с), 3,89 (3H, с), 3,89-3,94 (1H, м), 4,13 (2H, кв., J=7,4 Гц), 4,48-4,54 (2H, м), 4,83 (1H, д, J=14,6 Гц), 6,13 (1H, с), 6,61 (1H, д, J=1,8 Гц), 6,97-7,44 (5H, м).

Рабочий пример 11
N-[(3R, 5S)-7-Хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метил-пропил)-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты

К этаноловому раствору соединения, полученного, как описано в Рабочем примере 10, добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия. Реакционную смесь перемешивают при 60^oC в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют воду (100 мл) и этилацетат (50 мл), а затем подкисляют 1н. HCl. Органический слой промывают водой и сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют с получением 0,94 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,63 (3H, с), 1,05-1,36 (2H, м), 1,70-1,85 (2H, м), 1,92-2,05 (1H, м), 2,23-2,32 (2H, м), 2,51-2,80
(2H, м), 2,96-3,23 (2H, м), 3,44-3,70 (5H, м), 3,60 (3H, м), 3,89 (3H, с), 3,91-4,00 (1H, м), 4,48-4,54 (2H, м), 4,78 (1H, д, J=15,2 Гц), 6,12 (1H, с), 6,61 (1H, с), 6,97-7,39 (5H, м).

Рабочий пример 12
N-[(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2-ацетоксиметил-2-метилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты сложный этиловый эфир

К раствору соединения, полученного, как описано в Рабочем примере 10, (0,5 г), в пиридине (5 мл), добавляют уксусный ангидрид (0,20 г) и диметиламинопиридин (10 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают 1н. HCl и водой, а затем сушат с последующей отгонкой растворителя. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат) и получают 0,50 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 1,02 (3H, с), 1,00-1,40 (2H, м), 1,25 и 1,26 (всего 3H, каждый т, J=7,2 Гц), 1,60-1,80 (2H, м), 1,92-2,05 (1H, м), 2,00 (3H, с), 2,03 (3H, с), 2,16-2,26 (2H, м), 2,46-2,65 (1H, м), 2,67-2,77 (1H, м), 2,99-3,19 (2H, м), 3,60 (3H, с), 3,64-4,19 (6H, м), 3,89 (3H, с), 4,44-4,54 (2H, м), 4,67 (1H, д, J=14,6 Гц), 6,23 (1H, с), 6,65 (1H, с), 6,96-7,34 (5H, м).

Рабочий пример 13
N-[(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2-ацетоксиметил-2-метилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусная кислота

Используя соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 11, проводят реакцию по методике, в основном описанной в Рабочем примере 12, в результате чего получают 0,28 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,95-1,36 (2H, м), 1,03 (3H, с), 1,71-1,83 (2H, м), 1,93-2,07 (1H, м), 2,00 (3H, м), 2,05 (3H, с), 2,23-2,33 (2H, м), 2,48-2,63 (1H, м), 2,65-2,78 (1H, м), 3,00-3,18 (2H, м), 3,60 (3H, с), 3,65-4,14 (6H, м), 3,89 (3H, с), 4,46-4,56 (2H, м), 4,66 (1H, д, J=14,8 Гц), 6,24 (1H, с), 6,64 (1H, с), 6,96-7,34 (5H, м).

Рабочий пример 14
(3R,5S)-N-Метилсульфонил-1-(3-ацетокси-2-ацетоксиметил-2-метилпропил)-7- хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин- 3-ацетамид

Используя соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 5, (0,1 г), уксусный ангидрид (39 мг) и диметиламинопиридин (5 мг), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Рабочем примере 12, в результате чего получают 70 мг бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 1,00 (3H, с), 2,00 и 2,02 (каждый 3H, с), 2,85 (1H, дд, J=5,4, 15,4 Гц), 2,98 (1H, дд, J=7,2, 15,4 Гц), 3,26 (3H, с), 3,61 (3H, с), 3,70 (1H, д, J=14,2 Гц), 3,84 (1H, д, J=11,4 Гц), 3,89 (3H, с), 3,94-3,99 (2H, м), 4,11 (1H, д, J=11,4 Гц), 4,40 (1H, д, J=6,2 Гц), 4,46 (1H, д, J=14,2 Гц), 6,28 (1H, с), 6,69 (1H, д, J=1,6 Гц), 6,97-7,43 (5H, м).

Рабочий пример 15
N-[(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты сложный этиловый эфир

Используя соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 2-1, (0,5 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Рабочем примере 12, в результате чего получают 0,35 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,93 (3H, с), 1,02 (3H, с), 1,26 (3H, т), 2,02 (3H, с), 3,61 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,14 (2H, кв.), 4,5 (3H, м), 6,26 (1H, с), 6,62 (1H, с), 6,9-7,4 (5H, м).

Рабочий пример 16
N-[(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусной кислоты

Используя соединение (0,37 г), полученное, как описано в Рабочем примере 3-1, проводят реакцию по методике, в основном описанной в Рабочем примере 12, в результате чего получают 0,35 мг бесцветного кристаллического продукта, т. пл. 194- 196^oC.

Элементный анализ для C₃₂H₄₁ClN₂O₉:
Вычислено: C, 61,4, H, 6,41; N, 4,34
Найдено: C, 61,23; H, 6,18; N, 4,39.

Рабочий пример 17
N-[(3R, 5S)-7-Хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропил-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] -4- гидроксипиперидин-4-уксусной кислоты метиловый сложный эфир

(1) К раствору сложного этилового эфира (3R,5S)-7-хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропил)-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты (1,0 г) в этаноле (10 мл) добавляют 1н. водный раствор гидроксида натрия. Смесь перемешивают в течение 1 ч при 60^oC. К реакционной смеси добавляют воду, нейтрализуют 1н. HCl и подвергают экстракции этилацетатом. Раствор экстракта сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют, а остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетата и гексана, в результате чего получают 0,38 г (3R,5S)-7-xлop-1-(3-гидpoкcи-2-гидpoкcимeтил-2-метилпропил-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5- тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-уксусной кислоты, т.пл. 208-210^oC.

(2) Используя соединение, полученное в (1), (0,25 г), и гидрохлорид метилового сложного эфира 4-гидроксипиперидин-4- уксусной кислоты (0,105 г), проводят реакцию по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 1, в результате чего получают 0,125 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 1,35-1,84 (6H, м), 2,47 (2H, д), 2,65-2,85 (1H, м), 2,95-3,28 (2H, м), 3,35-3,78 (7H, м), 3,62 (3H, с), 3,73 (3H, с), 3,90 (3H, с), 4,22-4,40 (2H, м), 4,52 (1H, дд), 4,84 (1H, дд), 6,13 (1H, д), 6,62 (1H, м), 6,95-7,43 (5H, м).

Рабочий пример 18
N-[(3R,5S)-7-Хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метил-пропил)-1,2,3,5- тетрагидро-5-(2,3-диметоксифенил)-3-(1H (или 3H)-тетразол-5-ил) -метил-4,1-бензоксазепин-2-он

(1) К раствору соединения (0,5 г), полученного, как описано в Рабочем примере 5-(3), хлорида аммония (0,25 г) и триэтиламина (0,17 г) в диметилформамиде (5 мл) добавляют диэтилцианофосфонат (0,21 г) и триэтиламин (0,17 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, а затем добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают водой, а затем сушат безводным сульфатом натрия с последующей отгонкой растворителя. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат) и получают 0,52 г амидного соединения в виде аморфного твердого вещества.

(2) К раствору диметилформамида (41 мг) в ацетонитриле (1,5 мл) добавляют оксалилхлорид (65 мг) при 0^oC. Смесь перемешивают в течение 10 мин, после чего добавляют раствор соединения, полученного в стадии (1) (0,25 г) в ацетонитриле (1,5 мл) и пиридине (82 мг). Смесь перемешивают при 0^oC в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают водой и сушат безводным сульфатом натрия с последующей отгонкой растворителя. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле [элюент: гексан: этилацетат (2:1)] с получением 0,31 г нитрилового соединения.

(3) Раствор соединения, полученного в стадии (2), (1,0 г), в толуоле (15 мл) подвергают реакции по методике, в основном описанной в Ссылочном примере 5-(3), с использованием триметилсилилазида (0,43 г) и окиси дибутилолова (IV) (45 мг), в результате чего получают (3R,5R)-7-хлор-1-(2,2,5- триметил-1,3-диоксан-5-илметил)-5-(2,3-диметоксифенил)-1,2,3,5- тетрагидро-3-(тетразол-5-ил) метил-4,1-бензоксазепин-2-она (1,03 г) в виде бесцветного аморфного твердого продукта.

(4) К раствору соединения, полученного в стадии (3) (1,0 г), в ацетоне (10 мл) добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (50 мг) и воду (1 мл). Смесь перемешивают при 60^oC в течение ночи. К реакционной смеси добавляют воду (50 мл) с последующей экстракцией этилацетатом. Органический слой сушат безводным сульфатом натрия. Растворитель отгоняют и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат-метанол (20:1) с получением 0,87 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,69 (3H, с), 3,45 (1H, дд, J=4,4, 14,4 Гц), 3,56-3,75 (5H, м), 3,62 (3H, с), 3,90 (3H, с), 4,29 (1H, дд, J=4,4, 8,8 Гц), 4,63 (1H, д, J=15,2 Гц), 6,18 (1H, с), 6,67 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,05-7,43 (5H, м).

Рабочий пример 19
(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2-ацетоксиметил-2-метилпропил)-7-хлор-1,2,3,5- тетрагидро-5-(2,3-диметоксифенил)-3-(1H (или 3H)-тетразол-5-ил)-4,1- бензоксазепин-2-он

К раствору соединения, полученного, как описано в Рабочем примере 18, (0,77 г), в пиридине (7 мл) добавляют уксусный ангидрид (0,335 г) и диметиламинопиридин (40 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, а затем добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают 1н. HCl и водой, а затем сушат безводным сульфатом натрия с последующей отгонкой растворителя. Остаток промывают этиловым эфиром-гексаном (1:1), фильтруют и собирают 0,80 г бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,98 (3H, с), 2,03, 2,04 (каждый 3H, с), 3,40 (1H, дд, J= 5,1, 15,8 Гц), 3,55-3,67 (2H, м), 3,65 (3H, с), 3,82-3,91 (2H, м), 3,89 (3H, с), 4,04 (1H, д, J=11,6 ГЦ), 4,18 (1H, д, J=11,2 Гц), 4,30 (1H, дд, J= 5,2, 6,6 Гц), 4,66 (1H, д, J=14,6 Гц), 6,27 (1H, с), 6,69 (1H, д, J=2,2 Гц), 6,95-7,42 (5H, м).

Рабочий пример 20
(3R, 5S)-N-[2-(Пирролидин-1-ил)этил] -7- хлор-1-(3-гидрокси-2-гидроксиметил-3-метилпропил)-5-(2,3-диметоксифенил)- 2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамид

(1) К раствору соединения, полученного, как описано в Рабочем примере 5-(3), (0,5 г), и диэтилцианофосфоната (54 мг) в диметилформамиде (1,5 мл) добавляют 1-(2-аминоэтил) пирролидин (0,16 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, а затем добавляют этилацетат (50 мл). Смесь промывают водой и сушат с последующей отгонкой растворителя. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле [элюент:этилацетат-метанол-триэтиламин (10: 1: 0,1) с получением (3R,5S)-N-[2-(пиридин-1-ил)этил] -7-хлор-1-(2,2,5- триметил-1,3-диоксан-5-илметил)-5-(2,3-диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5- тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамида (0,19 г) в виде бесцветного аморфного твердого продукта.

(2) К раствору соединения, полученного в стадии (1) (0,19 г) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляют концентрированную HCl (1 мл). Полученную смесь перемешивают при 60^oC в течение 30 мин, а затем добавляют воду (50 мл) с последующей нейтрализацией путем добавления 1н. NaOH. Полученное вещество экстрагируют этилацетатом, промывают водой и сушат, после чего растворитель отгоняют. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат-метанол-триэтиламин (2: 1: 0,1)) и получают 97 мг бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,62 (3H, с), 1,75-1,80 (4H, м), 2,50-2,72 (7H, м), 2,87 (1H, дд, J=7,0, 14,2 Гц), 3,31-3,76 (7H, м), 3,59 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,45 (1H, т, J=6,4 Гц), 4.82 (1H, д, J=15,0 Гц), 6,12 (1H, с), 6,35-6,50 (1H, шир.), 6,62 (1H, с), 6,99-7,37 (5H, м).

Рабочий пример 21 (3R,5S)-N-Метилсульфонил-1-(3-ацетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамид

Соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 19, (1,2 г), подвергают реакции по методике, в основном описанной в Рабочем примере 19, в результате чего получают 1,01 г бесцветного кристаллического продукта, т.пл. 108-112^oC.

Элементный анализ для C₂₇H₃₂ClN₂O₉S:1,5H₂O:
Вычислено: C, 51,96; H, 5,81; N, 4,49
Найдено: C, 52,01; H, 5,82; N, 4,30.

Рабочий пример 22
(3R, 5S)-1-(3-Aцетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3- диметоксифенил)-1,2,3,5-тетрагидро-3-[1H(или 3H) тетразол-5-ил] метил-4,1-бензоксазепин-2-он

Соединение, полученное, как описано в Рабочем примере 1. (80 мг), подвергают реакции по методике, описанной в основном в Рабочем примере 19, в результате чего получают 25 мг бесцветного аморфного твердого продукта.

¹H-ЯМР (CDCl₃) : 0,97 (3H, с), 0,99 (3H, с), 2,05 (3H, с), 3,3-3,8 (4H, м), 3,65 (3H, с), 3,89 (3H, с), 4,05 (1H, д), 4,28 (1H, дд), 4,62 (1H, д), 6,27 (1H, с), 6,68 (1H, д), 6,9-7,4 (5H, м).

Примеры композиций:
Терапевтическое средство для лечения гиперлипемии, содержащее в качестве своего эффективного компонента соединение настоящего изобретения (1) или его соль, может быть получено, например, в соответствии с нижеследующей рецептурой:
1. Капсулы, мг:
(1) Соединение Примера 16 - 10
(2) Лактоза - 90
(3) Микрокристаллическая целлюлоза - 70
(4) Стеарат магния - 10
1 капсула - 180
Смешивают (1), (2), (3) и одну половину (4) и смесь гранулируют, а затем добавляют остальное количество (4). Полученной смесью заполняют желатиновые капсулы.

2. Таблетки, мг:
(1) Соединение Примера 16 - 10
(2) Лактоза - 35
(3) Кукурузный крахмал - 150
(4) Микрокристаллическая целлюлоза - 30
(5) Стеарат магния - 5
1 таблетка - 230
Смешивают (1), (2), (3), две трети (4) и одну половину (5), смесь гранулируют, а затем добавляют остальное количество компонентов (4) и (5). Полученную смесь формуют путем прессования и получают таблетки.

3. Инъекции, мг:
(1) Соединение Примера 16 - 10
(2) Инозит - 100
(3) Бензиловый спирт - 20
1 ампула - 130
Компоненты (1), (2) и (3) растворяют в дистиллированной воде для инъекций до полного объема 2 мл, а затем помещают в ампулу и эту ампулу герметично запаивают. Все операции проводят в стерильных условиях.

Экспериментальный Пример 1:
Активность, ингибирующая скваленсинтетазу
Аналитический метод
Активность, ингибирующую скваленсинтетазу, анализировали как описано ниже, с использованием растворов фермента, полученных способом, описанным ниже.

Более конкретно, раствор фермента (содержание белка 0,8 мкг), полученный методом, описанным ниже, добавляют к раствору (полный объем 50 мкл), содержащему 5 мкМ [1-³H]фернезилпирофосфат (удельная активность 25 мкКи/моль), 1 мМ NADPH (никотинамил-аденин-динуклеотид-фосфат восстановленного типа), 5 мМ MgCl₂, 6 мМ глутатион, 100 мМ буферный раствор фосфата калия (pH 7,4) и тестируемое лекарственное средство (используемое в виде водного раствора или раствора ДМСО), а затем оставляют на 45 мин при 37^oC для прохождения реакции. Для суспендирования реакционной смеси к этой реакционной смеси добавляют 150 мкл смеси хлороформа и метанола (1:2) с последующим добавлением 50 мкл хлороформа и 50 мкл 3н. раствора гидроксида натрия. 50 мкл хлороформового слоя (нижнего слоя), содержащего реакционную смесь, включающую сквален в качестве основного компонента, и 3 мл жидкого сцинтиллятора на основе толуола смешивают и определяют его радиоактивность с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика.

Активность, ингибирующую скваленсинтетазу, выражают как концентрацию, ингибирующую 50% радиоактивности, включенной в хлороформовый слой (IC₅₀ молярная концентрация (М)), как показано в Таблице 3.

Получение фермента, происходящего от человека
Клетки карциномы печени человека HepG2 (около 1 10⁹ клеток), полученные путем инкубирования на модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (37^oC в присутствии 5% CO₂), содержащей 10% фетальную бычью сыворотку, суспендируют в 10 мл охлажденного льдом буферного раствора [100 мМ калий-фосфатный буфер (pH 7,4), 30 мМ никотинамид, и 2,5 мМ MgCl₂]. Эти клетки разрушают путем обработки ультразвуком (в течение 30 секунд, дважды). Полученную после обработки ультразвуком клеточную фракцию подвергают центрифугированию при 10000 х г в течение 20 мин (4^oC). Затем слой супернатанта подвергают центрифугированию при 105000 в течение 90 мин (4^oC). Затем осадок суспендируют в охлажденном льдом 100 мМ калий-фосфатном буфере (pH 7,4), после чего снова центрифугируют в течение 90 мин (4^oC) при 105000. Эту фракцию суспендируют в охлажденном льдом 100 мМ калий-фосфатном буферном растворе (pH 7,4) (концентрация белка около 4 мг/мл). Полученную суспензию используют в качестве ферментного раствора.

Как видно из этих результатов, соединения настоящего изобретения обладают прекрасной активностью, направленной на ингибирование скваленсинтетазы.

Экспериментальный пример 2:
Анализ на образование холестерина в печени:
Биосинтез холестерина в печени крысы анализировали следующим образом, 6-недельным тучным крысам Wistar перорально вводили тестируемое соединение [Соединение 4-2 (суспендированное в 0,5% растворе метилцеллюлозы)], а контрольной группе вводили перорально только 0,5%-ный раствор метилцеллюлозы. Через 1 ч в хвостовую вену крысы внутривенно вводили ацетат натрия, меченный радиоактивным изотопом ¹⁴C (поставляемый Amersham) (10 мкКи/0,3 мл физиологического раствора/крыса). Через 1 ч крыс умерщвляли путем обезглавливания и 1,5 г первой доли печени удаляли, а затем подвергали омылению путем погружения в 3,9 мл щелочного этанолового раствора (KOH:EtOH = 1:2) в течение 2 ч при 100^oC с последующей экстракцией, которую 1, проводили три раза 5 мл каждой порции петролейного эфира. Раствор экстракта сушили, а затем растворяли в 3 мл этанола: ацетона (1:1). К полученному раствору добавляли 2 мл 0,5%-ного раствора дигитонина-этанола. Полученную смесь оставляли на один час для отстаивания. Полученные осадки собирали в виде общего стерина, и его радиоактивность измеряли на жидкостном сцинтилляционном счетчике. Результаты представлены в Таблице 4.

Как видно из вышеуказанных результатов, соединение настоящего изобретения обладает превосходным ингибирующим действием, обеспечивающим 80%-ное или более ингибирование образования холестерина.

Промышленное применение
Соединения настоящего изобретения обладают активностью, ингибирующей скваленсинтетазу, активностью, снижающей уровень холестерина, и активностью, снижающей уровень триглицеридов, а поэтому эти соединения могут быть использованы в качестве профилактического и терапевтического средства для лечения гиперлипемии и в качестве средства, снижающего концентрацию липидов, и кроме того, они могут быть также использованы для профилактики и лечения, например, артериосклероза.

Формула изобретения

1. Производные 4,1-бензоксазепин-2-она формулы (I)

где R¹ - низший алкил, замещенный по крайней мере одной необязательно замещенной гидроксильной группой;
R² и R³ независимо друг от друга - водород или фенил, который замещен 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей низшие C₁-C₄ алкоксигруппы;
Х - связь, метиленовая группа или связывающая группа с длиной цепи 1-7 атомов, выбранная из группы, содержащей -(СН₂)m-E-(СНR₆)n-, где m и n = 1 или 2 независимо друг от друга, E - связь или атом кислорода, -NR₅-, -CONR₇-, где R₅ - метилсульфонил, R₆ и R₇ независимо друг от друга (i) водород, (ii) низший алкил, который не замещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей пиперидин, индолил, возможно этерифицированные карбоксигруппы; (iii) бензил;
Y - необязательно замещенный карбамоил и/или заместители на атоме N карбамоила, взятые вместе, образуют кольцо, которое может быть замещено, или тетразолил, или пиперидин;
кольцо А замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей атомы галогенов,
или их соли.

2. Соединение по п.1, где R¹ - низшая алкильная группа, замещенная одной гидроксильной группой, которая может быть замещена; R² и R³ - атом водорода или фенильная группа, замещенная C₁C₄ алкоксигруппой, причем R² и R³ являются одинаковыми или различными; X метиленовая группа; Y - карбамоильная группа, которая может быть замещена, или пиперидино-карбонильная группа, которая может быть замещена; кольцо А - бензольное кольцо, замещенное атомом галогена, или его соль.

3. Соединение по п.1 формулы

где R¹ - низшая алкильная группа, которая замещена гидроксильной группой или гидроксильной группой, замещенной ацетильной группой;
R_a - C₁-C₄ алкоксигруппа;
Y - карбамоильная группа, которая может быть замещена CH₃SO₂, или пиперидино-карбонильная группа, которая может быть замещена;
Z - атом галогена,
или его соль.

4. Соединение по п.1 формулы

где R¹ - C₁-C₇ алкильная группа, которая замещена гидроксильной группой или гидроксильной группой, замещенной ацетильной группой;
Y - карбамоильная группа, которая может быть замещена CH₃SO₂, или пиперидино-карбонильная группа, которая замещена гидроксильной группой и/или группой -СН₂СООR_b (где R_b - атом водорода, метильная группа или этильная группа),
или его соль.

5. (3R,5S)-N-Метилсульфонил-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)-1-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-2-оксо-1,2,3,5-тетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетамид формулы

или его соль.

6. N-[(3R, 5S)-1-(3-Ацетокси-2,2-диметилпропил)-7-хлор-5-(2,3-диметоксифенил)2-оксо-1,2,3,5-ттетрагидро-4,1-бензоксазепин-3-ацетил] пиперидин-4-уксусная кислота формулы

или ее соль.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 20.04.2009

Извещение опубликовано: 20.07.2010        БИ: 20/2010

---