Штамм бактерий moraxella bovis "г97-вниви", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота
Изобретение предназначено для диагностики и профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота. Новый штамм Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" депонирован в коллекции микроорганизмов ВНИВИ. Штамм стойко сохраняет S-форму и не диссоциирует при многократных пересевах. Характеризуется полным набором антигенов, типичных для Moraxella bovis. Изобретение позволит предотвратить распространение инфекционного кератоконъюнктивита, наносящего значительный экономический ущерб. 1 табл.
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и иммунологии и касается выделения, идентификации и селекции штамма Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" - основного возбудителя инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота (ИКК), впервые установленного в РФ и странах СНГ, который может быть использован для изготовления диагностикумов и вакцин против данной болезни.
Из источников научно-технической литеарутры известно, что в нашей стране первые сообщения об эпизоотических вспышках ИКК, имевшие место в хозяйствах Гомельской области и Северо-Западной зоне РСФСР, появились лишь в 70-80-е годы (Бобырь В.К. "Инфекционные кератоконъюнктивиты крупного рогатого скота в хозяйствах Гомельской области." //Болезни с.-х. животных и птиц, их профилактика и лечение. //Сборник работ ЛВИ, выпуск 39. - Л., 1974, с. 167 - 179; Андриасян В.Б. "Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в Северо-Западной зоне РСФСР. " //Инфекционные болезни с.-х. животных. //Сборник научных трудов ЛВИ. - Л., 1988, с. 6 - 11), в которых описаны только лишь клинико-эпизоотологические особенности болезни и отсутствуют данные по выделению, идентификации и получению штаммов возбудителя, его этиологической роли в возникновении болезни и результаты изучения его биологических свойств. Нерасшифрованность этиологии болезни в нашей стране, отсутствие методов и средств диагностики и специфической профилактики ИКК крупного рогатого скота привели к появлению стационарно-неблагополучных по инфекционному кератоконъюнктивиту очагов и сохранению тенденции дальнейшего распространения болезни, наносящей значительный экономический ущерб вследствие снижения удоев и прироста массы животных из-за частичной или полной потери зрения. Целью изобретения является выделение, идентификация и получение штамма "Г97-ВНИВИ" бактерий Moraxella bovis - основного возбудителя данной формы патологии, полученного впервые и до настоящего времени неизвестного в РФ и странах СНГ, циркулирующего у крупного рогатого скота и вызывающего инфекционный кератоконъюнктивит. Штамм "Г97-ВНИВИ" выделен из пробы смыва глаз больного теленка (с признаками острого конъюнктивита) Учхоза Казанской государственной академии ветеринарной медицины Республики Татарстан путем 50-кратного пассажа на кровяном агаре и постоянной селекции культур после каждого пересева по S-форме колоний и по способности вызывать гемолиз эритроцитов в кровяной агаровой среде, характеризующей их вирулентность. Этот штамм депонирован в коллекции микроорганизмов спецлаборатории (банк) Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института. Регистрационный номер, присвоенный штамму 08.06.1998 г. N 1. Штамм Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" характеризуется следующими свойствами. Морфологические признаки. Штамм представляет собой короткие толстые палочки длиной 1,5 - 2,0 и в диаметре 0,5 - 1,0 мкм с округленными концами, обычно наблюдается парами или в виде коротких цепочек. Старые культуры прогрессивно становятся плеоморфными; штамм микроорганизма неподвижный, не образует спор; окрашивается грамотрицательно. Культуральные свойства. На кровяном агаре при pH от 7,2 до 7,6 штамм Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ" после 24-часовой инкубации при 37oC образует колонии диаметром от 1,0 до 3,0 мм в диаметре с зоной бета-гемолиза шириной 0,5 - 1,0 мм. Колонии круглые, выпуклые в центре, блестящие, полупрозрачные, серовато-белые, слегка вросшие в среду. После 48-часовой инкубации колонии становятся в диаметре 3-4 мм и бывают с гладкими краями. Зона гемолиза двукратно увеличивается при ее инкубации в течение 24 часов при 37oC и дополнительно в течение 24 часов при 25oC. На триптозо-соевом бульоне через 48 - 72 ч инкубации при 37oC наблюдается скудный рост, который по мере старения слегка мутноватый, но образуется осадок, который при взбалтывании разрушается на грубые частицы. При инкубации в условиях реактора бульон становится мутнее через 24 часа с образованием небольшого количества осадка. Рост в дальнейшем усиливается при добавлении в 5%-ном объеме кроличьей или телячьей сыворотки. Штамм стойко сохраняет S-форму и не диссоциирует при многократных пересевах на питательных средах. Ферментативные свойства. Штамм "Г97-ВНИВИ" - факультативный аэроб, не ферментирует сахаров, не восстанавливает нитраты в нитриты, не образует индола; разжижает желатину, т.е. обладает протеолитической активностью; проба на оксидазу дает положительный результат, что является характерным признаком для микроорганизмов семейства Neisseriaceae, рода Moraxella. При 24-часовой инкубации селекционированный штамм M. bovis в ламусовом молоке образует темную синюю полосу в верхней части пробирки, а при дальнейшей инкубации среда прогрессивно становится более щелочной. В течение 6 дней появляется отчетливо выраженные 3 зоны: в верхней части - темно-синяя жидкость, средняя зона - лилового цвета, творожистая по консистенции, а нижний слой - коагулированный казеин бледно-лилового цвета. Продолжение инкубации приводит к полной пептонизации лакмусового молока однородного ярко-розового цвета. Антигенные свойства. Штамм характеризуется полным набором антигенов, типичных для Moraxella bovis. Вирулентные свойства. Штамм имеет стабильную высокую вирулентность для белых мышей массой 12 - 16 г: вызывает быструю смертность их (от 1 до 3 часов) после интраперитонального введения свежей живой культуры в дозе 0,5 мл. Штамм активно образует эндотоксин, переходящий в анатоксин под действием тепла и формалина. Продуцируемый токсин обладает гемолитическим и некротическим действиями и является смертельным для мышей и кроликов. Телята 1 - 2-месячного возраста сравнительно легко заражаются путем введения в конъюнктивальный мешок 24-часовой культуры в дозе 0,5 мл, содержащей не менее 3


Формула изобретения
Штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота.РИСУНКИ
Рисунок 1