Способ определения резистентности биоматериала ксеноклапанов сердца к кальцификации
Использование: в области медицины и может применяться для экспресс-оценки новых методов обработки ксеноклапанов сердца на предмет ингибирования кальцификации, что имеет важное практическое значение для обеспечения прочностных свойств применяемых в них консервированных биологических тканей. Технический результат: повышение точности оценки резистентности к кальцификации используемого в ксеноклапанах сердца биоматериала с сокращением времени проведения исследования. Сущность изобретения: определяют количество доступных титрованию щелочью боковых ионизируемых карбоксильных аспартата, глутамата и сульфгидрильных цистеина групп макромолекул биополимеров испытуемого ксеноматериала, который при их суммарном количестве, не превышающем 0,61017/см2, считается резистентным к кальцификации. 1 табл.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для экспресс-оценки новых методов обработки ксеноклапанов сердца к кальцификации, что имеет важное практическое значение для обеспечения прочностных свойств применяемых в них консервированных биологических тканей.
В настоящее время для оценки резистентности биоматериала ксеноклапанов сердца к кальцификации наряду с подкожной имплантацией лоскутов ксеноматериала грызунам применяются модели кальцификации in vitro. Прототипом заявляемого является метод, описанный (Nimni M.E. Cheung D. Strates B. et al. Chemically modified collagen: a natural biomaterial for tissue replacement. J. Biomed. Mater.Res. 1987, vol. 21, p. 741-771). Суть метода состоит в помещении испытуемого материала в метастабильный раствор фосфата кальция с последующим определением кальция в среде инкубации или в образце. Приведенный способ имеет существенный недостаток: о степени резистентности биоматериала к кальцификации судят либо по убыли кальция из раствора, что сопряжено с неизбежной погрешностью в силу спонтанного выпадения в осадок нерастворимого продукта реакции, либо по определению количества кальция, преципитированного на образце, что точнее, но требует большого числа определений. Кроме того, от момента постановки эксперимента до получения статистически достоверного заключения в отношении того или иного метода обработки биоматериала проходит весьма много времени (около трех суток). Это связано с подготовкой образца к химическому определению кальция (высушивание до постоянного веса, сжигание, растворение в кислоте). Во время этих операций происходит неизбежная потеря кальция, что может привести к искажению результата. Более того, указанные недостатки приводят к незначительной задержке внедрения новых типов ксеноклапанов сердца к клиническую практику. Целью изобретения является повышение точности оценки резистентности к кальцификации используемого в биоклапанах ксеноматериала с сокращением времени проведения исследования. Указанная цель достигается тем, что вместо химических методов определения кальция использован метод кислотно-основного титрования (КОТ). При этом образец испытуемого биоматериала титровали щелочью для определения количества ионизируемых групп, способных акцентировать ионы кальция. Методика КОТ широко применяется в молекулярной биологии и описана в литературе (Калоус В. Павличек З. Биофизическая химия. М. Мир, 1985. с. 183-185). Сущность способа состоит в определении количества доступных титрованию боковых карбоксильных групп аспартата, глутамата и сульфгидрильных групп цистеина исследуемого лоскута ксеноматериала. Участие этих групп в связывании ионов кальция достаточно точно установлено (Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М. Высшая школа, 1990, с. 124; Ленинджер А. Биохимия. М. Мир, 1976, с. 957). Результат выражают в количестве ионизируемых групп на квадратный сантиметр поверхности образца. Если суммарное число групп указанных типов не превышает 0,6










Формула изобретения
Способ определения резистентности биоматериала ксеноклапанов сердца к кальцификации, заключающийся в оценке способности биоматериала связывать ионы кальция, отличающийся тем, что проводится определение количества доступных титрованию щелочью специфических ионизируемых групп боковых цепей макромолекул биополимеров испытуемого биоматериала, который при их количестве, не превышающем 0,6
РИСУНКИ
Рисунок 1