Белковое лекарственное средство в виде гидрогеля

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к лекарственной форме. Объектом изобретения является лекарственная форма белка в виде гидрогеля, содержащее терапевтически активный протеин, гелеобразователь, буферное вещество, консервант, стабилизатор и деионизированную воду, при этом в качестве стабилизатора оно содержит по меньшей мере одно гидрофобное вещество при следующем содержании компонентов (г/100 г): терепевтически активный протеин 0,0005-0,1, гелеобразователь 1,75-17,5, буферное вещество 0,09-1,1362, консервант 0,195-0,213, стабилизатор 0,1-3,0, деионизированная вода - остальное. Использование изобретения позволяет повысить стабильность при хранении лекарственного средства белковой природы, 2 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к фармацевтическим препаратам для топического применения, содержащих по меньшей мере один терепевтически активный протеин, в частности к лекарственному средству в виде гидрогеля.

Известно лекарственное средство в виде гидрогеля, содержащее терапевтически активный протеин, например, -интерферон, гелеобразователь, например, желатину, стабилизатор, например, про изводное алкилцеллюлозы, буферное вещество, консервант и деионизированную воду (см. заявку ДЕ 36 03 444 AI, м. кл. А 61 к 45/02, опубл. 6.8.1987 г.).

Недостаток известного средства заключается в том, что стабильность к хранению гедрогеля не является полностью удовлетворительной.

Задачей изобретения является повышение стабильности к хранению лекарственного средства в виде гидрогеля.

Поставленная задача решается предлагаемым лекарственным средством в виде гидрогеля, содержащим терапевтически активный протеин, гелеобразователь, буферное вещество, консервант, стабилизатор и деионизированную воду, за счет того, что в качестве стабилизатора оно содержит, по меньшей мере, одно гидрофобное вещество при следующем содержании компонентов (г/100 г ): Терапевтически активный протеин 0,0005 0,1 Гелеобразователь 1,75 -17,5 Буферное вещество 0,09 1,1362 Консервант 0,195 0,213 Стабилизатор 0,1 -3,0 Деионизированная вода Остальное Предлагаемое лекарственное средство может дополнительно содержать эмульгатор в количестве 0,01 0,3 г/100 г и ускоритель проницания протеина через кожу в количестве 0,01 г/100 г.

Предлагаемое лекарственное средство приготовляют известными приемами. На первой стадии эмульгатор распределяют в гидрофобной веществе и медленно добавляют воду до получения очень грубой эмульсии типа воды в масле. На этой стадии, которая обычно достигается при содержании воды 20 40% процесс перемешивания прекращают и эмульсии дают отстаиваться. При последующем повторном перемешивании и добавлении воды до содержания около 50% тип эмульсии меняется с образованием тонкой эмульсии типа масла в воде. На второй стадии полученную эмульсию вмешивают в предварительно полученный и стерильно-фильтрованный буферный раствор и диспергируют ее в нем, после чего добавляют гелеобразователь, которому затем дают набухаться. Момент добавления раствора протеина не является критическим, предпочтительно добавление его осуществляют в качестве заключительной стадии.

Гидрофобное вещество распределяется в стерильно-фильтрованном буферном веществе либо в виде содержащей эмульгатор эмульсии, либо как таковое, причем в последнем случае стерильно-фильтрованное буферное вещество содержит растворенный в нем эмульгатор.

В качестве гидрофобного вещества, в частности, используют парафиновые масла, высшие жирные кислоты, как, например, линолевую кислоту и пальмитиновую кислоту, или высшие спирты, как, например, миристиловый спирт, или сложные эфиры жирных кислот, как, например, триглицериды, или модифицированные, например, полиоксиэтиленовые и гликозилированные, глицериды, или смеси указанных веществ.

В качестве эмульгатора используют прежде всего неионогенные вещества, как, например, монолаурат полиоксиэтиленсорбитана, простой нонилфениловый эфир полиоксиэтилена и полиэтилен-полипропиленгликоль.

В качестве консерванта используют, например, сложный эфир n-оксибензойной кислоты, сорбиновую кислоту, диглюконат хлоргексидина, хлорид бензалкония и бромид гексадецилтриметиламмония, а в качестве ускорителя проницания протеина через кожу например, диметилсульфоксид или таурогликолевую кислоту.

В качестве гелеобразователя пригодны желатина и производные целлюлозы, как, например, метилцеллюлоза, оксиэтилцеллюлоза, оксипропилцеллюлоза и синтетические полимеры, как, например, поливиниловый спирт. Вид и количество используемого гелеобразователя или его смесей зависит от желаемой вязкости приготовленного гидрогеля.

Используемые буферные системы выбирают в зависимости от оптимума pH для соответствующего протеина. Используют как органические, так и неорганические буферы, например, сукцинатные ацетатные и фосфатные буферы.

Нижеследующие примеры иллюстрируют изобретение.

Упомянутые при этом торговые проукты Натрозоль 250 ИХ, Полисорбат 20, Плуроник F68, ВАП и Лабравиль 2735 С5 означают следующие химические продукты: Натроль 250 HX оксиэтилцеллюлоза Полисорбат 20 полиоксиэтиленсорбитан-монолаурат с 20 этиленоксидными группами
Плуроник F68 полиэтилен-полипропиленгликоль
ВАП васкулярно-антикоагулирующий протеин
Лабрафиль 1944 и 2735 С5 полиоксиэтиленированные и гликозилированные глицериды.

Пример 1
Приготовляют терапевтически активный гидрогель нижеследующего состава (на 100 г);
Гамма-интерферон 0,1г
Метилпарабен 0,1г
Моногидрат дигидрогенфосфата натрия 0,05г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04г
Натрозоль 250 HX 1,75г
Полисорбат 20 0,1г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,0г
Деионизированная вода до 100 г 96,76 г
При приготовлении гидрогеля поступают следующим образом:
а ) Получение эмульсии парафинового масла
В парафиновом масле распределяют эмульгатор Полисорбат 20 посредством быстровращающегося гомогенизатора. При перемешивании медленно добавляют только такое количество воды, которое позволяет получить примерно 30%-ную грубую эмульсию типа воды в масле. Эту эмульсию оставляют стоять на краткое время; при этом она разделяется. После повторного включения мешалки в эмульсии осуществляют перевод фаз, вследствие чего получают очень тонко распределенную эмульсию типа масла в воде.

б ) Получение гидрогеля
В воде с температурой 80^oC растворяют при перемешивании фосфаты и консервирующее средство метилпарабен и затем раствор охлаждают до комнатной температуры и подвергают стерильной фильтрации. В полученный таким образом буферный раствор вмешивают парафиновую эмульсию и мелко распределяют ее. Затем к эмульсии добавляют микробиологически чистую оксиэтилцеллюлозу, которую распределяют при перемешивании. С целью достижения полного набухания, гель оставляют стоять в течение 10 15 ч. Наконец медленно вмешивают содержащий 4 мг гаммаинтерферона/мл раствор. Полученный препарат подают в стерильные тюбики, которые хранят при температуре 4^oC в течение 200 дней. При этом практически не обнаруживается потери активности по сравнению с исходным гелем.

Пример 2
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г);
Гамма-интерферон 0,1 г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат дигидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Плуроник F 68 0,1 г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,0 г
Деионизированная вода до 100г 96,76 г
В воде с температурой 80^oC при перемешивании растворяют фосфаты, консервирующее средство метилпарабен и эмульгатор Плуроник F68 и затем раствор охлаждают до комнатной температуры и подвергают стерильной фильтрации. Добавляют парафиновое масло, которое распределяют при помощи гомогенизатора. Затем при перемешивании добавляют под вакуумом оксиэтилцеллюлозу. Наконец добавляют содержащий 4 мг гамма-интерферона/мл раствор, после чего гидрогель заполняют в стерильные тюбики.

Пример 3
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Альфа-фактора опухолевого некроза 0,1 г
Метилпарабен 0,213 г
Моногидрат гидрогенфосфата натрия 0,053г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,0427 г
Натрозоль 250 HX 1,87 г
Полисорбат 20 0,107 г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,07 г
Деионизированная вода до 100 г 96,5443 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что в примере 1.

Пример 4
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Альфа-интерферон 0,0005 г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат гидрогенфосфата натрия 0,5 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,1 г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,0 г
Деионизированная вода до 100г 96,8595 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 5
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,100 г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат гидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0.04 г
Таурогликолевая кислота 0,01 г
Натрозоль 250 HX 0,75
Полисорбат 20 0,1 г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,0 г
Деионизированная вода до 100г 95,75 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1, причем ускоритель проницания активного вещества через кожу, таурогликолевую кислоту, вмешивают в буферное вещество. ъ
Пример 6
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,05 г
Метилпарабен 0,2г
Моногидрат гидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04 г
Натрозоль 250 HX 1,75
Полисорбат 20 0,1г
Жидкотекучее парафиновое пасло 0,6 г
Вязкотекучее парафиновое масло 0,4 г
Деионизированная вода до 100 г 95,81 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 7
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,05 г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат гидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Миристиловый спирт 1,0 г
Деионизированная вода до 100 г 96,91 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что в примере 2. Миристиловый спирт распределяют в нагретом до температуры около 60^oC стерильно-фильтрованном буферном растворе. После охлаждения буферного раствора поступают согласно примеру 2.

Пример 8
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,005 г
Метилпарабен 0,20 г
Сукцинатный буфер с pH 6,00 0,0191 M
Хлорид натрия 0,1435 M
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,0952 г
Жидкотекучее парафиновое масло 0,952 г
Деионизированная вода До 100 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1. Стерильные тюбики хранят при температуре 4^oC в течение 131 дней При этом практически не обнаруживают потери активности по сравнению с исходным гелем.

Пример 9
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,025 г
Метилпарабен 0,20 г
Сукцинатный буфер с pH 6,2 0,2362 г
Хлорид натрия 0,8766 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,1 г
Лабрафиль 1944 С5 1,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Приготовление гидрогеля осуществляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 10
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,025 г
Метилпарабен 0,20 г
Сукцинатный буфер с pH 6,2 0,2362 г
Хлорид натрия 0,8766 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,1 г
Лабрафиль 2735 С5 1,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 11
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,025 г
Метилпарабен 0,20 г
Сукцинатный буфер с pH 6,2 0,90 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,1 г
Миристиловый спирт 1,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Приготовление осуществляют следующим образом.

Миристиловый спирт расплавляют при температуре 50 60^oC и затем приготовляют эмульсию миристилового спирта аналогично примеру 2, однако при температуре 50 6О^oC. Далее поступают тем же образом, что и в примере 1. Стерильные тюбики хранят при температуре 4^oC в течение 72 дней. При этом не обнаруживается потери активности по сравнению с исходным гелем.

Пример 12
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (на 100 г):
Бета-фактор опухолевого некроза 0,05г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат дигидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,2 г
Жидкотекучее парафиновое масло 2,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 13
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (100 г):
Лизоцим 2,4 мил. единиц
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат дигидрогенфосфата натрия 0,5 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,2 г
Жидкотекучее парафиновое масло 2,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 14
Приготовляют терапевтически активный гидрогель следующего состава (100г):
Альфа-ВАП 0,30 г
Метилпарабен 0,2 г
Моногидрат дигидрогенфосфата натрия 0,05 г
Тригидрат гидрогенфосфата дикалия 0,04 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,1 г
Жидкотекучее парафиновое масло 1,0 г
Деионизированная вода До 100 г
Гидрогель приготовляют тем же образом, что и в примере 1.

Пример 15
Повторяют пример 1 с той разницей, что приготовляют терапевтически активный препарат следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,025 г
Метилпарабен 0,195 г
Янтарная кислота 0,231 г
Хлорид натрия 0,857 г
Натрозоль 250 HX 1,75 г
Полисорбат 20 0,01г
Жидкотекучее парафиновое масло 0,1 г
Деионизированная вода До 100 г
Пример 16
Повторяют пример 1 с той разницей, что приготовляют терапевтически активный препарат следующего состава (на 100 г):
Гамма-интерферон 0,1 г
Метилпарабен 0,2 г
Янтарная кислота 0,236 г
Хлорид натрия 0,877 г
Натрозоль 250 HX 17,5 г
Полисорбат 30 0,3 г
Жидкотекучее парафиновое масло 3,0 г
Деионизированная вода до 100 г

Формула изобретения

1. Белковое лекарственное средство в виде гидрогеля, содержащее терапевтически активный протеин, гелеобразователь, буферное вещество, консервант, стабилизатор и деионизированную воду, отличающееся тем, что в качестве стабилизатора оно содержит по крайней мере одно гидрофобное вещество липидного происхождения при следующем содержании компонентов, г/100 г:
Терапевтически активный протеин 0,0005 0,1
Гелеобразователь 1,75 17,5
Буферное вещество 0,09 1,113
Консервант 0,195 0,213
Гидрофобное вещество липидного происхождения 0,1 3,0
Деионизированная вода До 100 г
2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что дополнительно содержит эмульгатор в количестве 0,01 0,3 г.

3. Средство по п. 1, отличающееся тем, что дополнительно содержит ускоритель проникновения протеина через кожу в количестве 0,01 г.