Фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностями

 

Использование: в медицине для приготовления лекарственных средств иммуносупрессорного и противомикробного действия. Сущность изобретения: композиция содержит соединение I, указанное в описании, или его фармацевтически приемлемую соль, с размером частиц не более 5 мкм и поверхностно-активное вещество при их массовом соотношении 1 : 0 : 01-5, где каждая из смежных пар R¹ и R², R³ и R⁴, или R⁵ и R⁶ являются независимо: /a/ двумя смежными атомами водорода или /b/ могут образовывать другую связь с атомами углерода, с которыми они связаны, и, кроме того, R² является алкильной группой, R⁷ является атомом водорода, гидроксильной группой, защищенной гидроксильной группой или алкоксильной группой, или образует вместе с R¹ оксигруппу, R⁸ и R⁹ являются независимо атомом водорода или гидроксильной группой, R¹⁰ является атомом водорода, алкильной группой, алкильной группой, замещенной одной или несколькими гидроксильными группами, алкенильной группой, алкенильной группой, замещенной одной или несколькими гидроксильными группами, или алкильной группой, замещенной оксогруппой, X¹ является атомом водорода или гидроксильной группой, X² является атомом водорода, или X¹ и X² могут вместе образовывать оксогруппу, или -CH₂O-, Y¹ - является атомом водорода или гидроксильной группой, Y² является атомом водорода, или Y¹ и Y² могут вместе представить оксигруппу, N-NR¹¹R¹² или N-OR¹³, R¹¹ и R¹² являются независимо атомом водорода, алкильной группой, арильной группой или тозильной группой, каждый из R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²² и R²³ является независимо атомом водорода или алкильной группой, R²⁰ и R²¹ каждый является оксогруппой или независимо / R²_a⁰ и атом водорода/ или / R²_a¹ и атом водорода/, где R²_a⁰ и R²_a¹ каждый является независимо гидроксильной группой, алкоксильной группой или группой формулы -OCH₂OCH₂CH₂OCH₃ или R²_a¹ является защищенной гидроксильной группой, или R²_a⁰ и R²_a¹ могут вместе представлять атом кислорода в эпоксидном кольце, n является целым числом 1, 2 или 3, Y¹, Y², R¹⁰, R²³ вместе с атомами углерода, с которыми они связаны, могут образовывать насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо с 5 или 6 членами, содержащее азот, серу и/или кислород, или указанное кольцо, замещенное одной или несколькими группами, выбранными из алкила, гидрокси, алкила, замещенного одной или несколькими гидроксильными группами, алкокси, бензила и группы формулы -CH₂Se(C₆H₅). 6 з.п. ф-лы, 2 табл.

Настоящее изобретение относится к суспендируемой композиции, состоящей из тонко измельченного трициклического соединения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества (ПАВ). Суспендируемая композиция настоящего изобретения предназначена для использования в качестве лекарственного средства для перорального введения или в виде глазных капель.

Используемые в настоящем изобретении трициклические соединения общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли известны как соединения, обладающие прекрасной фармакологической активностью, например иммуносуппрессорной активностью и противомикробной активностью, что обусловливает их применение для лечения и/или предупреждения отторжения при трансплантации органов или ткани, при реакциях трансплантат против хозяина, при различных аутоиммунных заболеваниях и при инфекционных болезнях /см. выложенную заявку на патент Японии N 61/1986/ 148181, EP-A-0323042/.

В частности, соединение FP 900506, которое аналогично веществу FK 506, и соединения FP 900520, FP 900523 и FP 900525 могут быть получены путем ферментации рода Streptomyces, а в частности, Streptomyces tsukubacnsis N 9993 /FEPM BP-927/ или Streptomyces hydroscopicus subsp, yakushimaewsis N 7238 FEPM BP-928/. В частности, соединение FP 506, имеющее представленную ниже формулу и обладающее прекрасной иммунодепрессивной активностью, может быть использовано для лечения и/или предупреждения отторжения трансплантата и заболеваний в области офтальмологии.

Известна твердая дисперсионная композиция, обладающая иммуносупрессивной и антимикробной активностями, содержащая трициклическое соединение I и растворимый в воде полимер, при массовом соотношении указанных компонентов соответственно 1 0,1 20.

Конкретный представитель соединения I соединение FK 506 имеет формулу: и следующее химическое название: 17-алллил-1,14-дигидрокси-12-2-(4-гидрокси-3-метоксициклогексил) -1-метилвинил-23,25-диметокси-13,19,21,27-тетраметил-11,28-диоксида -4-азатрицикло[22.3.1.0.4,9] октакос-18-ен-2,3,10,16-тетраон.

Использование трициклического соединения (I) в виде инъекций и капсул для перорального введения является хорошо известным. Капсулы являются более предпочтительными препаратами, чем инъекции, с точки зрения удобства их применения, однако при использовании капсул трудно осуществлять небольшую коррекцию вводимого количества активного ингредиента, а также имеются некоторые трудности при введении капсул детям. Поэтому получение жидких препаратов с хорошей абсорбционной способностью при пероральном введении было бы крайне желательным.

При использовании трициклического соединения (I) настоящего изобретения в офтальмологии возможно появление побочных эффектов системного действия при их пероральном введении и при внутримышечных или внутривенных инъекциях. Поэтому в офтальмологии предпочтительным способом введения лекарственного средства является его наружное применение, например, в виде глазных капель, поскольку указанный способ введения позволяет уменьшить вероятность появления побочных эффектов и достигать желаемой цели при введении меньшего количества лекарственного средства.

Трициклическое соединение (I) настоящего изобретения хорошо растворяется в органических растворителях, жирах и жирных маслах, но при этом очень плохо растворяется в воде. Поэтому трициклическое соединение (I) необходимо вводить в виде масляных глазных капель или офтальмических мазей, аналогично всем плохо растворенным активным агентам, используемым в офтальмологии. Однако масляные глазные капли или офтальмические мази, содержащие соединение (I), обладают тем недостатком, что указанное трициклическое соединение (I) очень плохо проникает в глазные ткани и, кроме того, введение указанных препаратов обычно сопровождается кратковременным нарушением зрения и вызывает ощущение дискомфорта, что делает их применение малоэффективным.

В соответствии с вышеуказанным, очевидно, что крайне необходимо получить такие глазные капли, которые бы содержали трициклическое соединение (I), обладали бы повышенной способностью проникать в глазные ткани и не имели бы вышеуказанных недостатков.

Настоящее изобретение относится к суспендируемой композиции, содержащей тонко измельченные частицы трициклического соединения, имеющего следующую формулу: где каждая из смежных пар R¹ и R²; R³ и R⁴ или R⁵ и R⁶ являются независимо: (a) двумя смежными атомами водорода или (b) могут образовывать другую связь с атомами углерода, с которыми они связаны; и кроме того, R² является алкильной группой; R⁷ является атомом водорода, гидроксильной группой, защищенной гидроксильной группой или алкоксильной группой, или образует вместе с R¹ оксигруппу; R⁸ и R⁹ являются независимо атомом водорода или гидроксильной группой; R¹⁰ является атомом водорода; алкильной группой; алкильной группой, замещенной одной или несколькими гидроксильными группами; алкенильной группой, алкенильной группой, замещенной одной или несколькими гидроксильными группами; или алкильной группой, замещенной оксогруппой; X¹ является атомом водорода или гидроксильной группой;
X² является атомом водорода, или
X¹ и X² могут вместе образовывать оксогруппу или -CH₂O-,
Y¹ является атомом водорода или гидроксильной группой;
Y² является атомом водорода, или
Y¹ и Y² могут вместе представлять оксогруппу, N-NR¹¹R¹² или N-OR¹³;
R¹¹ и R¹² являются независимо атомом водорода, алкильной группой, арильной группой или тозильной группой;
каждый из R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²² и R²³ являются независимо атомом водорода или алкильной группой;
R²⁰ и R²¹ каждый является оксогруппой или независимо (R²_a⁰ и атом водорода) или (R²_a¹ и атом водорода), где R²_a⁰ и R²_a¹ каждый является независимо гидроксильной группой, алкоксильной группой или группой формулы -OCH₂OCH₂CH₂OCH₃, или R²_a¹ является защищенной гидроксильной группой, или R²_a⁰ и R²_a¹ могут вместе представлять атом кислорода в эпоксидном кольце;
n является целым числом 1, 2 или 3;
и в дополнение к вышеуказанным определениям Y¹, Y², R¹⁰, R²³ вместе с атомами углерода, с которыми они связаны, могут образовывать насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо с 5 или 6 членами, содержащее азот, серу и/или кислород, и необязательно замещенное одной или несколькими группами, выбранными из алкила; гидрокси; алкила, замещенного одной или несколькими гидроксильными группами; алкокси, бензила и группы формулы -CH₂Se(C₆H₅);
или композиция настоящего изобретения содержит фармацевтически приемлемую соль описанного выше соединения, причем размер частиц указанного трициклического соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет 5 мкм или менее и, кроме этого, композиция настоящего изобретения содержит фармацевтически приемлемое поверхностно-активное вещество (ПАВ) и необязательно водную среду.

Настоящее изобретение также относится к способу получения вышеуказанной суспендируемой композиции.

Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения.

Ниже представлены предпочтительные примеры и подробные разъяснения различных определений, входящих в объем настоящего изобретения.

Термин "суспендируемая композиция" означает композицию, которая может быть суспендирована в водной среде. Указанной суспендируемой композицией является композиция, уже суспендированная в водной среде, или композиция, предназначенная для суспендирования по мере ее использования.

Термин "низшая", используемый в описании изобретения, относится (если это не оговорено особо) к группе, имеющей 1-6 атомов углерода.

Предпочтительными "алкильными группами" являются алифатические углеводородные остатки с прямой или разветвленной цепью, например низшие алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил, неопентил, гексил, и т.п.

Предпочтительными "алкенильными группами" являются алифатические углеводородные остатки с прямой или разветвленной цепью, имеющие одну двойную связь, например низшие алкенильные группы, такие как винил, пропенил, бутенил, метилпропенил, пентенил, гексенил и т.п.

Примерами "арильных групп" являются фенил, толил, ксилил, куменил, мезитил, нафтил и т.п.

Предпочтительными защитными группами в "защищенных гидроксильных группах" являются 1-(низшие)алкилтио (низшие)алкильные группы, такие как низшие алкилтиометильные группы (например, метилтиометил, этилтиометил, пропилтиометил, изопропилтиометил, бутилтиометил, изобутилтиометил, гексилтиометил, и. т. при этом предпочтительной является C_1-4-алкилтиометильная группа, а наиболее предпочтительной является метилтиометильная группа); тризамещенные силильные группы, такие как три низший алкилсилил (например, триметилсилил, триэтилсилил, трибутилсилил, трет-бутилдиметилсилил, три-трет-бутилсилил, т. п. ) или низший алки-диарилсилил (например, метилдифенилсилил, этилдифенилсилил, пропилдифенилсилил, трет-бутилдифенилсилил и т.п. при этом более предпочтительными являются три-C_1-4алкилсилильная группа и C_1-4-алкилдифенилсилильная группа, а наиболее предпочтительными являются трет-бутиодиметилсилильная группа и трет-бутилфенилсилильная группа); или ацильные группы, такие как алифатическая или ароматическая группы, происходящие от карбоновой кислоты, сульфоновой кислоты или карбаминовой кислоты, или алифатическая ацильная группа, замещенная ароматической группой.

Примерами алифатических ацильных групп являются низшая алканоильная группа, необязательно имеющая один или несколько подходящих заместителей, таких как карбоксильная группа (например, формил, ацетил, пропионил, бутурил, изобутурил, валерил, изовалерил, пивалоил, гексаноил, карбоксиацетил, карбоксипропионил, карбоксибутурил, карбоксигексаноил, и т.п.); цикло (низшая) алкокси (низшая) алканоильная группа, необязательно имеющая один или несколько подходящих заместителей, таких как низший алкил (например, циклопропилоксиацетил, циклобутилоксипропионил, циклогептилоксибутурил, ментилоксиацетил, метилоксипропионил, метилоксибутурил, метилоксипентаноил, метилоксигексаноил, т.п.); камфарсульфонильная группа или низшая алкилкарбамоильная группа, имеющая одного или нескольких заместителей, таких как карбоксильная или защищенная карбоксильная группа, например, карбокси(низшая)алкилкарбамоильная группа (например, карбоксиметилкарбамоил, карбоксиэтилкарбамоил, карбоксипропилкарбамоил, карбоксибутилкарбамоил, карбоксипентилкарбамоил, карбоксигексилкарбамоил, и т.п.), защищенная карбокси (низшая)алкоксикарбонил(низшая)алкилкарбамоильная группа (например, триметилсилилметоксикарбонилэтилкарбамоил, триметилсилилэтоксикарбонилпропилкарбамоил, триэтилсилилэтоксикарбонилпропилкарбамоил, третичный бутилметилсилилэтоксикарбонилпропилкарбамоил, триметилсилилпропоксикарбонилбутилкарбамоил и т.п.) и т.п.

Примерами ароматических ацильных групп являются ароильные группы, необязательно имеющие один или несколько заместителей, таких как нитро (например, бензоил, толуол, ксилоил, нафтоил, нитробензол, динитробензоил, нитронафтоил и т.п.); или аренсульфонильные группы, необязательно имеющие соответствующие заместители, такие как галоген (например, бензолсульфонил, толуолсульфонил, ксилолсульфонил, нафталинсульфонил, фторбензолсульфонил, хлоробензолсульфонил, бромобензолсульфонил, иодобензолсульфонил и т.п.).

Примерами алифатических ацильных групп, замещенных ароматической группой, являются ар(низшие)алканоильные группы, необязательно имеющие один или несколько заместителей, таких как низший алкокси или тригало(низший)алкил (например, фенилацетил, фенилпропионил, фенилбутурил, 2-трифторометил-2-метокси-2-фенилацетил, 2-этил-2-трифторометил-2-фенилацетил, 2-трифторометил-2-пропокси-2-фенилацетил и т.п.).

Из вышеуказанных ацильных групп более предпочтительными являются C_1-4-алканоильная группа, необязательно имеющая карбокси; цикло C_5-6)алкокси (C_1-4)алканоильная группа, имеющая два (C_1-4) алкила в циклоалкильной части; камфарсульфонильная группа; карбокси(C_{1 -4})алкилкарбамоильная группа; три(C_1-4)алкилсилил(C_1-4) алкоксикарбонил(C_1-4)алкилкарбамоильная группа; бензоильная группа, необязательная группа, имеющая галоген; или фенил(C_1-4)алканоильная группа, имеющая (C_1-4)алкокси или тригало(C_1-4)алкильную группу. Из указанных групп, наиболее предпочтительными являются ацетил, карбоксипропионал, ментилоксиацетил, камфарсульфонил, бензоил, нитробензоил, динитробензоил, иодобензолсульфонил и 2-трифторметил-2-метокси-2-фенилацетил.

Примерами "гетероциклических групп" в насыщенном или ненасыщенном кольце с 5 или 6 членами, содержащем азот, серу и/или кислород, являются пирролильная группа или тетрагидрофурильная группа.

Фармацевтически приемлемыми солями соединений (I) являются обычные нетоксичные и фармацевтически приемлемые соли, такие как соли неорганических или органических оснований, в частности, соли щелочных металлов, такие как калиевые или натриевые соли; соли щелочно-земельных металлов, такие как кальциевые или магниевые соли; соли аммония, или аминовые соли, такие как триэтиламиновая соль или N-бензил-N-метиламиновая соль.

В отношении трициклического соединения (I) настоящего изобретения следует указать, что оно может иметь одну или несколько конформаций или стереизомеров, таких как оптические и геометрические изомеры, обусловленные наличием асимметрического атома (или атомов) углерода и двойной связи (связей), причем указанные изомеры также входят в объем настоящего изобретения.

В соответствии с настоящим изобретением, трициклические соединения (I) и их соли используются в тонко измельченном виде с размером частиц 5 мкм или менее. Эти частицы могут быть либо кристаллическими либо аморфными. Предпочтительный размер указанных частиц составляет в среднем от 3 мкм или менее либо 2 мкм или менее, например 0,9; 0,8 или 0,7 мкм. Этот размер значительно меньше по сравнению с размером частиц (75 мкм или менее), который является предпочтительным при использовании суспензии типа глазных капель (имеется в виду определение глазных капель в Японской фармакопеи) или по сравнению с обычно используемым размером частиц (10 мкм или менее).

Рассматриваемое тонко измельченное трициклическое соединение (I) или его фармацевтически приемлемая соль настоящего изобретения могут быть получены следующим способом.

Этот способ включает в себя стадию растворения трициклического соединения (I) (включая его вышеуказанную соль) в растворителе и стадию осаждения из раствора, полученного в предыдущей стадии. Примерами растворителей, используемых для растворения соединения (I), являются органические растворители, способные растворять соединение (I), особенно органические растворители, обладающие хорошей способностью к растворению соединения (I), и совместимостью с водой, например спирты, такие как этанол, ацетон, ацетонитрил, диоксан и т. п. Предпочтительно, если количество используемого растворителя в 3 10 раз превышает количество соединения (I). К раствору должно быть добавлено поверхностно-активное вещество (ПАВ), такое как неионогенное ПВ. Указанное ПАВ может быть добавлено к растворителю перед растворением в нем соединения (I). Другими словами, водный раствор ПАВ может быть получен заранее.

Затем к полученному раствору добавляют воду, после чего раствор энергично размещают в целях осаждения кристаллов. Смесь, содержащую кристаллы, выдерживают, концентрируют и при необходимости тонко измельчают (например, подвергают ультразвуковой обработке). И наконец, вышеуказанную смесь пропускают через фильтр с заранее определенными размерами отверстий сита (например, миллипористый фильтр, 0,45 мкм) для получения мелких частиц (которые, в основном, содержат мелкие кристаллики) с желаемым размером. Альтернативно, после измельчения указанную смесь лиофилизуют, в результате чего получают лиофилизованный продукт с мелкими частицами нужного размера. Указанный лиофилизованный продукт также включает в себя ПАВ.

Получение вышеупомянутого тонко измельченного или лиофилизованного продукта может быть осуществлено после добавления антикоагулянта, противовспенивающего агента, изотонического агента, буферного раствора, консервантов, загустителей и т.п. в соответствующем количестве.

Предпочтительными фармацевтически приемлемыми ПАВ, используемыми в целях настоящего изобретения, являются неионогенные ПАВ. В качестве примеров могут служит следующие ПАВ.

A. Типа простых эфиров.

Полиоксиэтиленалкиловые эфиры.

Блок-полимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена.

Алкиловые эфиры полиоксиэтилена и полиоксипропилена.

B. Типа эфиров оксикислоты.

Сложные полиоксиэтиленэфиры жирных глицериновых кислот.

Сложные полиоксиэтиленсорбитанэфиры жирных кислот, такие как полисольват 80 (моноолеиновый полиоксиэтиленсорбитан).

Сложные полиоксиэтиленсорбитэфиры жирных кислот.

C. Типа сложных эфиров.

Сложные полиэтиленгликолевые эфиры жирных кислот
Сложные полиглицериновые эфиры жирных кислот
Предпочтительным неионогенным ПАВ является HLB 9 или другие ПАВ, нетоксичное для человека. Более предпочтительным ПАВ является полиоксиэтиленсорбитанэфир жирных кислот.

Cooтношение ПАВ и соединения (I) в суспендируемой композиции согласно настоящему изобретению составляет предпочтительно от 0,1:1 до 5:1 по массе, а более предпочтительно от 0,1:1 до 1:1 по массе.

Концентрация трициклического соединения (I) в суспендируемой композиции настоящего изобретения не является критическим параметром, однако предпочтительно она составляет 0,001-2 мас. а более предпочтительно 0,01-1 мас. в суспензии, к которой добавлена водная среда. Концентрация ПАВ зависит от его типа, но, в основном, она составляет 0,001-1 мас. а более предпочтительно 0,005-0,2 мас. в суспензии, к которой добавлена водная среда.

По желанию, суспендируемая композиция настоящего изобретения может содержать соответствующие добавки, которые обычно используются в растворах или глазных каплях, такие как антикоагулянты (например, гидроксипропоксиметилцеллюлоза, D-маннит и т.п.); противовспенивающие агенты (например, силиконы, а именно симетикон); изотонические агенты (например, хлорид натрия и т.п.); буферные вещества (например, борная кислота, бифосфат натрия, мононатрийфосфат, и т.п.)); консерванты (например, хлорид бензалкония, бензэтонийхлорид, хлоробутанол, метилпарабен, пропилпарабен или т. п. ); загустители (например, сахариды, такие как лактоза, маннит, мальтоза и т.п. гиалуроновая кислота или ее соли, такие как гиалуронат натрия, гиалуронат калия и т.п. мукополисахариды, такие как хонтроитинсульфат и т.п. полиакрилат, карбоксивинилполимер, сшитый полиакрилат и т.п.), и другие добавки.

Суспендируемая композиция настоящего изобретения может быть получена путем добавления к тонко измельченному (со средним размером частиц 5 мкм и менее) трициклическому соединению (I) или его соли, или лиофилизованному продукту, полученному как было указано выше, поверхностно-активного вещества (ПАВ) или его водного раствора (последний используется лишь когда требуется, чтобы трициклическое соединение (I) было в виде лиофилизованного продукта), и необязательно соответствующие добавки, такие как антикоагулянты, противовспенивающие агенты, изотонические агенты, консерванты и/или загустители, в соответствующем количестве, а затем полученную смесь тщательно размешивают.

Из соображений стабильности трициклического соединения (I), предпочтительно, чтобы указанное соединение или его соль использовались в виде композиции, которая может быть изготовлена как водная суспензия путем добавления водной среды in situ.

Терапевтически эффективная доза трициклического соединения (I) или его соли варьируется в зависимости от возврата, состояния здоровья и тяжести заболевания пациента, но в основном, она составляет 30,01-1000 мг в день, предпочтительно 0,1-500 мг в день, а более предпочтительно 0,5-100 мг в день. Обычно трициклическое соединение (I) (или его соль) вводят в среднем количестве 0,5; 1; 5; 10; 50; 100; 250; и 500 мг в день.

Глазные капли, содержащие трициклическое соединение (I) или его соль, обычно закапывают в глаз по 2-3 капли один или несколько раз в день.

Суспендируемая композиция настоящего изобретения может быть также получена с использованием соединений, раскрытых в следующих публикациях: ЕР-А-353678, заявке на патент Японии N HEI 2 1990-74330, РСТ/GB90/01262, EP-A-413582, РСТ/Р91/00314 заявках на патент Великобритании N 9012963.6, 9014136.7, 9014681 9014880.0, 9014881.8, 9015098.8, 9016115.9, 9016693.5; EP-A-323865, EP-A-349061, EP-A-356508, EP-A-364031, EP-A-364032, EP-A-378317, EP-A-378320, EP-A-378321, EP-A-388153, EP-A-396399, EP-A-396400, EP-A-399579, EP-A-403242, EP-A-428365, EP-A-356399, GB 2225576-A, ЕР-А-402931 и ЕР-А-427680.

Приведенные ниже примеры более подробно иллюстрируют осуществление настоящего изобретения.

Пример 1. Получение тонко измельченного соединения FK 506.

Соединение FK 506 (3г) растворяли в этаноле (15мл) и к раствору, размешивая, по капле добавляли 10% водный раствор гидрогенизированного полиоксиэтиленкасторового масла (HCO-60 производство фирмы Никко Кемикал Ко. Лтд) или 10% водного раствора моноолеинового полиоксиэтиленсорбитан 20ЕО (полисорбат 80. Reodol TWO 120: производство Kao-Atras Co, Ltd.) (по 6 мл каждый). После чего, медленно размешивая при 25^oC, по капле в небольшом количестве добавляли дистиллированную воду. Затем дистиллированную воду (80 мл) добавляли при быстром размешивании и продолжали размешивать после добавления около 15 мин. И наконец, при быстром размешивании добавляли еще 60 мл дистиллированной воды, и полученные в результате осажденные кристаллы FK 506 оставляли для отстаивания на ночь при 25^oC. Полученную таким образом суспензию подвергали ультразвуковой обработке в течение 2 мин в целях распыления и фильтровали через фильтр (миллипористый фильтр (Millipore Co. Ltd)) с размерами пор 0,45 мкм при пониженном давлении, в результате чего получали сырые кристаллы (средний размер частиц 0,9 мкм) FR 506-соединения.

Частицы с различным размером получали аналогичным образом.

Ниже приведены примеры изготовления лекарственных препаратов настоящего изобретения.

Препарат 1.

Соединение FК 506 (средний размер частиц 0,8 мкм) 1,0%
Полиоксилстеарат 40 (диспергируемый агент)) 0,05%
Бензалконийхлорид (консервант) 0,02%
Хлорид натрия (изотонический агент) 0,288%
Фосфатный буфер (pH 4,5)(по необходимости) до 100
Изготавливают смесь компонентов в соответствии со стандартным способом получения водных суспендируемых глазных капель.

Водные суспензии для глазных капель в виде описанных ниже препаратов 2-6 получали способом, аналогичным получению препарата 1.

Препарат 2.

Соединение FК 506 (ср. размер частиц 3,0 мкм) 0,5%
Полисорбат 80 (диспергирующий агент) 0,05%
Поливиниловый спирт (диспергирующий агент) 0,28%
Хлорбутанол (консервант) 0,5%
Глицерин (изотонический агент) 2,47%
Фосфатный буфер (pH 4,5)(по необходимости) до 100
Препарат 3.

Соединение FК 506 (ср. размер частиц 2,0 мкм) 0,2%
Этиловый эфир полиоксиэтилена и полиоксипропилена (диспергирующий агент) 0,1%
Поливинилпирролидон (диспергирующий агент) 0,06%
Метилпарабен (консерванты) 0,04%
Пропилпарабен (консервант) 0,02%
Глицерин (изотонический агент) 2,47%
Фосфатный буфер (pH 5,0)(по необходимости) до 100
Препарат 4.

Соединение FК 506 (средний размер частиц 1,5 мкм) 0,1%
Полисорбат 80 0,05%
Поливиниловый спирт 0,28%
Бензалконийхлорид 0,28%
Хлорид натрия 0,28%
Фосфатный буфер (pH 4,5)(по необходимости) до 100
Препарат 5.

Соединение FК 506 (ср. размер частиц 0,9 мкм) 0,1%
Полисорбат 80 0,05%
Бензалконийхлорид 0,02%
Фосфатный буфер (pH 4,5)(по необходимости) до 100
Препарат 6.

Соединение FК 506 (ср. размер частиц 0,9 мкм) 0,1%
Полисорбат 80 0,05%
Бензалконийхлорид 0,02%
Хлорид натрия 0,288%
Фосфатный буфер (pH 4,5)(по необходимости) до 100
Препарат 7.

Соединение FK (ср. размер частиц 1,0 мкм) 1,0 мг
Полисорбат 80 1,0 мг
Поливиниловый спирт 2,8 мг
Метилпарабен 0,8 мг
Пропилпарабен 0,2 мг
Лимонная кислота 5,30 мг
Гидроксид натрия (количество, необходимое для доведения pH до 4,5)
Очищенная вода (по необходимости) до 1,0 мл
Все компоненты смешивали стандартным способом, обычно используемым для изготовления пероральных суспензий.

Препарат 8.

Суспендируемая композиция.

Соединения FK 506 (средний размер частиц 1,0 мкм) 50 мг
Полисорбат 80 25 мг
Гидроксипропилметилцеллюлоза ТС-5 150 мг
Симетикон (т.е. диметилполисилоксан, кремниевый противовспенивающий агент) 2мг
D-маннит 250 мг
Диспергирующая среда.

Метилпарабен 40 мг
Пропилпарабан 10 мг
Очищенная вода (по необходимости) до 50 мл
Раствор полисорбата 80 в очищенной воде добавляли к раствору соединения FK 506 в этаноле, а затем тщательно размешивали. К полученному раствору постепенно добавляли соответствующее количество воды в целях осаждения кристаллов FK 506. Полученную смесь выдерживали, концентрировали и подвергали ультразвуковой обработке. Затем смесь размешивали и суспендировали в растворе гидроксипропилметилцеллюлозы и D-маннита в очищенной воде. Полученный раствор выливали в сосуд, наполненный симетиконом, а затем лиофилизовали и получали в результате суспендируемую композицию.

Независимо метилпарабен и пропилпарабен растворяли в очищенной воде, в результате чего получали диспергирующую среду. Водная суспензия может быть получена путем добавления этой диспергирующей среды в вышеуказанную суспендируемую композицию по мере необходимости.

Осуществление настоящего изобретения наглядно иллюстрируется представленными ниже экспериментальными примерами.

1. Тест на абсорбцию при использовании глазных капель.

Испытуемые глазные капли. Глазные капли (I), полученные в соответствии с описанием в препарате 5.

Метод испытаний. Испытуемые глазные капли закапывали 5 раз в оба глаза SD-крысам (возраст 8-10 недель, вес 275-405 г) в количестве 10 мкл с интервалами в 5 мин. Через 1 ч крыс умерщвляли, оба глаза извлтекали. Затем определяли концентрацию соединения FK 506 в роговице, сетчатке и в сосудистой оболочке глаза в соответствии со стандартным способом иммуноферментного анализа (например, непрямой метод иммуноферментного анализа описан в публикации выложенной японской патентной заявки N EKI 1-92659).

Результаты анализа представлены в табл. 1 и 2. В таблицах приводятся средние величины стандартное отклонение.

2. Тест на абсорбцию при пероральном введении. Испытуемое пероральное средство. В качестве водной суспензии использовали препарат 7.

Метод испытания. Вышеуказанное пероральное средство разводили очищенной водой до получения концентрации FK 506 0,064 мг/мл. Полученное пероральное средство вводили шести собакоподобным обезьянам (0,32 мг/кг).

Затем с помощью иммуноферментного анализа определяли концентрацию соединения FK 506 в цельной крови через 0,5; 1; 2; 4 и 6 ч после введения.

Результаты представлены в табл. 3. Полученные величины приводятся как средние значения стандартное отклонение.

Как видно из приведенных выше результатов, суспендируемая композиция настоящего изобретения представляет собой препарат, обладающий хорошей способностью к проникновению во внутренние ткани, в частности указанная суспендируемая композиция позволяет получить препарат для перорального введения или препарат для наружного применения в виде глазных капель, обладающие прекрасной способностью проникновения во внутренние и глазные ткани.

В соответствии с настоящим изобретениям может быть получен аппарат, содержащий трициклическое соединение (I), который позволяет корректировать вводимое количество активного ингредиента, обладает хорошей стабильностью, диспергируемостью и проникновением в глазные ткани, а также удобен для закапывания в глаза и для введения детям.

Учитывая фармакологическую активность трициклического соединения (I), такую как иммуносупрессивную активность, противомикробную активность и т.п. препараты настоящего изобретения могут быть использованы для лечения и предупреждения иммунноопосредованных заболеваний, таких как отторжение при трансплантации органов или тканей, например сердца, почки, печени, костного мозга, кожи, роговицы, легкого, поджелудочной железы, тонкой кишки, конечностей, мускулов, нервов и т.п. реакции "трансплантат против хозяина" при трансплантации костного мозга; аутоимунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, системная красная волчанка, зоб Хасимото, рассеянный склероз, псевдопаралитическая миастения, диабеты I типа, и т.п. и инфекционные заболевания, вызванные патогенными микроорганизмами.

Кроме того, композиции настоящего изобретения могут быть использованы для лечения и профилактики воспалительных и гиперпролиферативных заболеваний кожи и кожного проявления симптомов иммунологических заболеваний, таких как псориаз, атопический дерматит, контактный дерматит, экзема, себорейная экзема, плоский лишай, пемфигус, пузырьчатка, буллезный эпидермолиз, крапивница, гигантская крапивница, васкулиты, эритемы, кожная эосинофилия, красная волчанка, угри и гнездная алопеция; различных заболеваний глаз, связанных с аутоиммунными заболеваниями такими, как кератоконъюктивиты, весенний конъюктивит, увеит, связанный с болезьнью Бехчета, кератиты, герпетический кератит, конусообразная роговица, дистрофия, эпителия роговицы, бельмо, пемфигус глаза, язва роговицы Мюрена, склерит, офтальмопатия, синдром Фогта-Коянаги-Харада, саркоидоз, и т.д. обратимой обтурации дыхательных путей, такой как астма (например, бронхиальная астма, аллергическая астма, эндогенная астма, приобретенная экзогенная астма и астма, вызываемая пылью), в частности, хронической или трудноизлечимой астмы (например, застарелая астма и повышенная чувствительность дыхательных путей, бронхиты и т.п.): воспаление слизистых оболочек и кровеносных сосудов, таких как язвы желудка, сосудистые нарушения, вызванные ишемическими заболеваниями и тромбозом, ишемическая болезнь кишечника, воспалительное заболевание кишечника, некротический энтероколит, поражения кишечника, вызванные тепловыми ожогами, лейкотриен B₄-опосредованные заболевания; кишечных воспалительных/аллергических заболеваний, таких как кишечные колики, проктиты, эозинофильные гастроэнтериты, мастоцитоз, болезнь Крона и язвенные колиты; пищевых аллергических заболеваний, симптоматические проявления которых не связаны с желудочно-кишечным трактом, например, такие как мигрень, риниты и экзема; почечных заболеваний, таких как интерстициальный нефрит, синдром Гудпастера (Goodpasture), гемолитико-уремический синдром, и диабетическая нефропатия; нервозных болезней, таких как дерматомиозит, синдром Гийена-Барре, болезнь Меньера и радикулопатия; эндокринных заболеваний, таких как гипертиреоз и базедова болезнь; болезней крови, таких как истинная эритроцитарная аплазия, гипопластическая анемия, аутоиммунная гемолитическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, анеритроплазия; костных заболеваний, таких как остеопороз; заболеваний дыхательных путей, таких как каркоидоз, пневмосклероз, идиопатическая интерстициальная пневмония; кожных заболеваний, таких как дерматомиозиты, лейкодермия, ихтиоз, аллергическая светочувствительность, лимфома кожи: сосудистых заболеваний, таких как аотериосклероз, атеросклероз, синдром дуги аорты, узелковый полиартерит м миокардоз: коллагенозов, таких как склеродермия, гранулематоз Вегенера, и синдром Шегрена (ксеродерматоз); ожирения; эозинофилических фасцитов; периодонтитов, таких как воспаление десны, периодонтит, альвеолит, воспаление надкостницы; нефротического синдрома, например гломерулонефрит; аллопеции у мужчин или сенильной аллопеции; мышечной дистрофии; пиодермии и синдрома Сазари; заболеваний, вызванных активными кислородзависимыми процессами, например повреждений органов вследствие ишемического реперфузии органов (таких, как сердце, печень, желудок), которые имеют место при трансплантации или ишемической болезни (при тромбозах или инфарктах); например кишечных заболеваний, таких как эндотоксиновый шок, псевдомембранный колит, медикаментозный колит, почечных заболеваний, таких как острая почечная недостаточность, хроническая почечная недостаточность; легочных заболеваний, таких как токсиноз, вызванный кислородом или лекарственными средствами (например, паракортом, блеомицином), эмфизема легких, рак легких; глазных болезней, таких как катаракта, сидероз, ретинит, пигментоз, синильная дегенерация желтого пятна, ожог роговицы щелочью, образование рубцов стекловидного тела; дерматитов, таких как различного рода эритемы, линейный JgQ буллезный дерматит, цементный дерматит; и других заболеваний, таких как генгвит; перидонтит; сепсис, панкреатит; заболевания, вызванные загрязнением окружающей среды (например, воздуха); старение, онкогенез, метастазы при раковых заболеваниях, гипобаропатия; а также заболеваний, вызванных высвобождением гистамина или лейкотриена C₄ и т.п.

Кроме того, активный ингредиент композиции настоящего изобретения обладает печень-регенерирующей активностью и/или активностью, стимулирующей гипертрофию и гиперплазию гепатоцитов. Поэтому композиция настоящего изобретения может быть использована для лечения и предупреждения заболеваний печени, таких как иммуногенные болезни печени (например, хронические аутоиммунные болезни печени, такие как аутоиммунные гепатиты, первичный билиарный цирроз печени и склерозирующий холангит), частичная резекция печени, острый некрозпечени (например, некрозы, вызванные токсинами, вирусные гепатиты, шок или гипоксия), вирусные гепатиты В, гепатиты, не принадлежащие к группе А или к группе В, циррозы и печоночная недостаточность, например недостаточность, вызванная хроническими заболеваниями печени, и поздняя стадия печеночной недостаточности.

Кроме того, композиция настоящего изобретения обладает ценной фармацевтической активностью, например активностью, усиливающей хемиотерапевтическое действие других препаратов, активностью против цитомегаловирусной инфекции, противовоспалительной активностью и т.п.

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностями, включающая трициклическое соединение формулы 1

где каждая из смежных пар R¹ и R², R³ и R⁴ или R⁵ и R⁶ являются независимо двумя смежными атомами водорода или образуют новую связь с атомами углерода, к которым они присоединены, и, кроме того, R² алкильная группа; R⁷ водород, гидроксильная группа, защищенная гидроксильной группой или алкоксиальной группой, или вместе с R¹ образует оксигруппу;
R⁸ и R⁹ независимо водорода или гидроксильная группа;
R¹⁰ водород, алкильная группа или алкильная группа, замещенная одной или несколькими гидроксильными группами или оксогруппой, алкенильной группой или алкенильной группой, замещенной одной или несколькими гидроксильными группами;
X¹ водород или гидроксильная группа;
X² водород или
X¹ и X² могут вместе образовывать оксогруппу или -CH₂O-;
Y¹ водород или гидроксильная группа;
Y² водород или
Y¹ и Y² могут вместе представлять оксогруппу, N - NR¹¹R¹² или N OR¹³;
R¹¹ и R¹² независимо водород, алкильная, арильная или тозильная группа;
каждый из R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²² и R²³ независимо
водород или алкильная группа;
R²⁰ и R²¹ каждый оксогруппа или независимо / R²_a⁰ и водород/ или / R²_a¹ и водород/, где R²_a⁰ и R²_a¹ каждый независимо - гидроксильная группа, алкоксильная группа или группа формулы -OCH₂OCH₂CH₂- OCH₃, или R²_a¹ защищенная гидроксильная группа, или R²_a⁰ и R²_a¹ могут вместе представлять атом кислорода в эпоксидном кольце;
n целое число 1, 2 или 3,
и в дополнение к указанным значениям Y¹, Y², R¹₀, R¹³ вместе с атомами углерода, с которыми они связаны, насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо с 5 или 6 членами, содержащее азот, серу и/или кислород, или указанное кольцо, замещенное одной или несколькими группами, выбранными из алкила, гидрокси, алкила, замещенного одной или несколькими гидроксильными группами, алкокси, бензила и группы формулы -CH₂Se(C₆H₅),
в виде свободного основания или фармацевтически приемлемой соли и целевую добавку, отличающаяся тем, что в качестве целевой добавки она содержит фармацевтически приемлемое поверхностно-активное вещество при массовом соотношении соединение I: поверхностно-активное вещество 1: 0,01 5, причем размер частиц соединения I не превышает 5 мкм.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемым поверхностно-активным веществом является неионогенное поверхностно-активное вещество.

3. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что неоногенным поверхностно-активным веществом является полиоксиэтиленсорбитанэфир жирной кислоты.

4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит воду и представляет собой водную дисперсию для глазных капель.

5. Композиция по пп. 1 4, отличающаяся тем, что в указанном трициклическом соединении I каждая из смежных пар R³ и R⁴ или R⁵ и R⁶ независимо образует новую связь между атомами углерода, к которым они присоединены; R⁸ и R²³ водород; R⁹ гидроксильная группа; R¹⁰ метил, этил, пропил или аллил; X¹ водород; X² водород или пары X¹ и X², Y¹ и Y² вместе оксогруппа; R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹ и R²² метилы; R²⁰ и R²¹ независимо / R²_a⁰ и водород/ или / R²_a¹ и водород/, где R²_a⁰ и R²_a¹ каждый гидроксильная группа или алкоксильная группа, или R²_a¹ защищенная гидроксильная группа, n целое число 1 или 2.

6. Композиция по пп.1 5, отличающаяся тем, что в трициклическом соединении I R⁷ водород, гидроксильная группа или защищенная гидроксильная группа; X¹ и X² вместе оксогруппа; R²_a⁰ метокси и R²_a¹ гидроксильная или защищенная гидроксильная группа.

7. Композиция по пп.1 6, отличающаяся тем, что трициклическим соединением I является 17-аллил-1,14-дигидрокси-12-[2-(4-гидрокси-3-метоксициклогексил)-1- метилвинил]-23,25-диметокси-13,19,21,27-тетраметил-11,28- диокса-4-азатрицикло [22.3.1.0^4,9] октакос-18-ен-2,3,10,16-тетраон или 17-этил-1,14-дигидрокси-12[2-(4- гидрокси-3-метоксициклогексил)-1-метилвинил] - 23,25-диметокси-13,19,21,27-тетраметил-11,28-диокса-4-азатрицикло [22.3.1.0^4,9] октакос-18-ен-2,3,10,16-тетраон.

РИСУНКИ

Рисунок 1