Вакцина против классической чумы свиней для пероральной иммунизации

 

Использование: ветеринарная вирусология. Сущность изобретения: вакцина против классической чумы свиней для пероральной иммунизации содержит (в вес. %) вирусную суспензию штамма ЛК ВНИИВВиМ с активностью 10 4,0-4,5 БОЕ 50 мл^-1 8-10, раствор пептона и раствор сахарозы 8-10, смолу КБ-4П-2 70-75, аэросил АМ 1-300 - остальное. 3 табл.

Изобретение относится области ветеринарной вирусологии, а именно к вакцине против классической чумы, предназначенной для пероральной иммунизации диких и домашних свиней.

Для получения сухих гранулированных фармакологических препаратов используется простой и производительный метод контактного обезвоживания, заключающийся в смешивании фармацевтических суспензий или растворов с дегидратантом, в частности со смолой КБ-ЧП-2 (пат. США N 4221778, 1980).

Однако этот метод непригоден для получения сухих пероральных вакцин, так как не обеспечивает необходимых физико-химических свойств готового продукта.

Известна вакцина против классической чумы свиней из штамма "К", предназначенная для пероральной иммунизации, которую получают лиофилизацией вирус-крови зайца, а перед иммунизацией заделывают ее в корнеплоды или хлеб (авт. св. НРБ N 36374, 1984). Недостаток этой вакцины заключается в необходимости ее лиофилизации, последующей дозировке и приготовлении специальных приманок. Кроме того, в корнеплодах и хлебе срок хранения вакцины без существенных потерь активности не превышает 3 суток.

Известна также вакцина против классической чумы свиней, штамм "Гудзон", получаемая лиофилизацией вируссодержащей суспензии клеток почки эмбриона свиньи. После двукратного (в дозе 1,6х10⁵ НМД 50) с интервалом в 7 суток применения вакцина эффективна при пероральной иммунизации диких свиней (Тезисы докладов международного симпозиума "Проблемы патологии и охраны здоровья диких животных, экологическое взаимодействие болезней диких и сельскохозяйственных животных". Астрахань, 5-9 октября 1992 г. с. 19-21). Недостаток этой вакцины заключается в том, что для достижения положительного эффекта необходима двукратная вакцинация свиней, а для приготовления вакцины требуется сложное сушильное оборудование.

Целью изобретения является создание вакцины против классической чумы свиней для пероральной иммунизации, эффективной при однократном применении и получаемой контактным обезвоживанием.

Указанная цель достигается тем, что вакцина против классической чумы свиней для перорального применения содержит смолу КБ-ЧП-2 и азросил АМ 1-300. Положительный эффект достигается при следующем соотношении компонентов, вирусная суспензия со стабилизирующими добавками 19-20 смола КБ-ЧП-2 70-75 аэросил АМ 1-300 6-10 Пример. К суспензии клеток костного мозга свиньи, индицированной аттенуированным вирусом классической чумы свиней (штамм ЛК-ВНИИВВиМ) объемом 15 см³ добавляют 15 см³ 19%-ного раствора пептона (ГОСТ 13805-76) с 27% сахарозы (ГОСТ 55833-75). Полученную техническую жидкость добавляют к смеси 10,5 г аэросила АМ 1-300 (ТУ 6-18-186-74) и 70 г смолы КБ-ЧП-2 (ТУ 07-233-82) и перемешивают в течение 4 мин в барабане шаровой мельницы, заполненном на 1/3 объема металлическими шарами диаметром 10-12 мм. Скорость вращения барабана 40 об/мин. Температура смеси в процессе дегидратации не должна превышать 36^oС. Полученную сухую массу отделяют от шаров и хранят при температуре 42^oС.

В табл. 1 приведена биологическая активность сухой вакцины в зависимости от процентного соотношения компонентов. Титр вируса в исходной суспензии составляет 5,0 lg БОЕ 50 мин^-1. Из табл. 1 видно, что биологическая активность вакцины зависит от количественного соотношения компонентов. При содержании в вакцине вирусной суспензии в количестве 10, 15 и 30% биологическая активность вакцины составляет 1,5-1,75 lg БОЕ 50 х г^-1. Увеличение активности вакцины отмечают при содержании вирусной суспензии 19-20% Наиболее приемлемым является следующий процентный состав вакцины, вирусная суспензия 19-20 аэросил АМ 1-300 6-10 смола КБ-ЧП-2 70-75 В табл. 2 представлены данные, полученные после однократной иммунизации свиней сухой вакциной с активностью 2,8 lg БОЕ 50 х г^-1. Поросят массой 22-25 кг вакцинируют перорально, смешивая сухую вакцину с комбикормом (300-500 г). Уровень антител в крови привитых поросят определяют в реакции нейтрализации.

Данные табл. 2 показывают, что у всех однократно иммунизированных животных на 29 сутки после иммунизации отмечают высокий (1:8 1:128) уровень вируснейтрализующих антител. После контрольного заражения свиней (на 29 сутки после иммунизации) вирулентным вирусом КЧС, штамм "Ши-Мынь" в дозе 10⁴ ЛД 50 все вакцинированные поросята остаются клинически здоровыми в течение 21 суток (срок наблюдения). Контрольный поросенок пал на 7 сутки после заражения с клиническими признаками КЧС.

В табл. 3 приведены результаты серологических исследований поросят, иммунизированных перорально дважды с интервалом в 3 суток. Из данных табл. 3 видно, что на 24 сутки после вакцинации титр антител у всех вакцинированных животных составлял 1:8 1:16. Через 50 суток после вакцинации поросят заражали вирулентным вирусом КЧС, штамм "Ши-Мынь" в дозе 10⁴ ЛД 50. В течение 21 суток (срок наблюдения) все поросята оставались клинически здоровыми.

Таким образом, вакцина против классической чумы свиней, состоящая на 19-20% из сухой вирусной суспензии, на 70-75% из смолы КБ-ЧП-2 и на 6-10% азросила АМ 1-300, создает у 100% животных иммунитет против классической чумы свиней при однократной (в дозе 1,3 х 10⁴ БОЕ 50) и двукратной (в дозе 4х10⁴ БОЕ 50) пероральной иммунизации.

Предлагаемая вакцина против классической чумы свиней для пероральной иммунизации эффективна при однократном применении, для ее приготовления не требуется специальное сушильное оборудование, а технология ее промышленной наработки не вызывает затруднений, т.к. существуют технологические линии для приготовления вакцин контактным обезвоживанием.

Формула изобретения

Вакцина против классической чумы свиней для пероральной иммунизации, включающая сухую вирусную суспензию со стабилизирующими добавками, отличающаяся тем, что вакцина дополнительно содержит смолу КБ-4П-2 и аэросил АМ 1-300, из вирусной суспензии содержит суспензию штамма ЛК ВНИИВВиМ, а из стабилизирующих добавок раствор пептона и сахарозы при следующих соотношениях, об.

Вирусная суспензия штамма ЛК ВНИИВВиМ с активностью 10^4,0-4,5БОЕ 50 мл^-1 8 10
Cтабилизирующие добавки 8 10
Cмола КБ-4П-2 70 75
Аэросил АМ 1-300 Остальное

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2