Способ получения s-сульфоната проинсулина
Авторы патента:
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению генно-инженерных инсулинсодержащих белков с использованием хроматографических методов очистки. Сущность изобретения: разработка способа получения продукта- S-сульфоната проинсулина с более высоким выходом по более простой технологии, что достигается проведением хроматографии на сополимере диметакрилата этиленгликоля с 2-гидрокси-3-диэтиламинопропилметакрилатом, а элюцию - раствором, содержащим уксусную кислоту. 1 з.п. ф-лы, 1 ил, 2 табл.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению генно-инженерных инсулинсодержащих белков с использованием хроматографических методов очистки.
Известны методы выделения инсулинсодержащих белков и их аналогов с помощью методов хроматографии [1-2]. Технология представляет собой многостадийный процесс, включающий продуцирование рекомбинантного белка, содержащего последовательность проинсулина человека, его переработку и постадийную очистку. Недостатками известных методов являются сложная технология получения и очистки, многостадийность. низкие выходы промежуточных продуктов и соответственно конечного продукта. Прототипом [3] изобретения является регламент на способ получения S-сульфоната проинсулина, включающий в себя расщепление бромцианом рекомбинантного белка, сульфотолиз, то есть обработку полученного белка тетратионатом натрия с образованием S-сульфоната проинсулина (ПСС) и выделение последнего в три стадии - 1) гельфильтрацией на сефадексе G-50 в бикарбонатном буферном растворе, 2) ионообменной хроматографией на ДЕАЕ-сефарозе FF в трис-буфере с линейным градиентом хлористого натрия и 3) обессоливанием на сефадексе G-25. Недостатками прототипа являются многостадийность, низкий выход ПСС (около 30% ), плохая гидродинамика, связанная с применением мягкого геля, что затрудняет реализацию процесса в промышленных условиях. Целью изобретения является разработка способа получения ПСС по более простой технологии и с более высоким выходом. Это достигается тем, что выделение ПСС из смеси, полученной после обработки белка тетратионатом натрия, проводят на сополимере (30-50 мол.%) диметакрилата этиленгликоля (ДМАЭГ) с (70-50 мол.%) 2-гидрокси-3-диэтиламинопропилметакри- латом (ДЭАПМ), получившим название ДЕАП-сферанит-ОН в 0,005-0,015 М уксусной кислоте, а элюцию проводят раствором, содержащим уксусную кислоту с ионной силой




Формула изобретения
1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ S-СУЛЬФОНАТА ПРОИНСУЛИНА, включающий расщепление бромцианом рекомбинантного белка, сульфитолиз, хроматографическое выделение целевого продукта с элюцией S-сульфоната проинсулина солевым раствором с последующим обессоливанием на сефадексе G-25, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта и упрощения технологии, хроматографию проводят на сополимере диметакрилата этиленгликоля (30-50 мол.%) с 2-гидрокси-3-диэтиламинопропилметакрилатом (70-50 мол.%), а элюцию - раствором, содержащим уксусную кислоту, с ионной силой

РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2
Похожие патенты:
Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к способу подготовки гидролизатов для выращивания кормовых дрожжей
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для разработки иммунодиагностикумов и экспериментальных исследований
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для разработки иммунодиагностикумов и экспериментальных исследований
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в иммунологических методах исследования для определения формиатдегидрогеназы
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для структурных и функциональных исследований иммуноглобулинов G IgG человека, разработки иммунодиагностических препаратов в биологии и медицине
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения иммунодиагностических и иммунотерапевтических препаратов в биологии и медицине
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения лекарственного препарата - активатора плазминогена ткани (АПТ)
Изобретение относится к вирусологии и иммунологии, а точнее к способам определения антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) с помощью твердофазного иммуноферментного метода анализа с использованием синтетического пептида в качестве антигена и синтеза реагентов для этого
Способ получения -норлейцин13-мотилина // 562193
Изобретение относится к новому аутоантигену и являющимся его производным пептидам, их использованию в лечении хронического разрушения суставного хряща при аутоиммунных заболеваниях, фармацевтическим композициям, содержащим указанные пептиды, диагностическому методу детекции аутореактивных Т-клеток в анализируемом образце и аналитическому набору, используемому в указанном методе
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при создании эффективных вакцинных препаратов против СПИДа
Пептид-имитатор эпитопа белка gp120 вич-1 // 2184780
Изобретение относится к биотехнологии, генной и белковой инженерии
Меченые аналоги глутамина и лизина // 2205186
Изобретение относится к соединениям формулы Y-(CR2)n-X-NHJ, где Х представляет собой С=O или CR2; n является целым числом, имеющим значение от 1 до 6; Y представляет собой L(A)m- или R1R2CR-, где L - металлокомплексообразующий агент, А представляет собой -CR2-, -NRCO-, -CONR- или полиалкиленгликоль; m является целым числом, имеющим значение от 0 до 10; где один из R1 и R2 является -NH(B)p Z1 и другой является -CO(B)qZ2, где р и q являются целыми числами, имеющими значение от 0 до 20, и каждый В независимо выбирают из Q или остатка аминокислоты, где Q является циклическим пептидом; Z1 и Z2 - защитные группы, которые являются биосовместимыми группами, которые ингибируют или подавляют метаболизм пептида in vivo; J и каждую R-группу независимо выбирают из Н, C1-4 алкила или С1-4 алкоксиалкила; при условии, что (i) общее число остатков аминокислот в R1 и R2 группах не превышает 20; (ii) если Х является CR2, то Y является -CRR1R2, и Z2 является металлокомплексообразующим агентом; (ii) если Y является -CRR1R2, то по крайней мере один из R1 и R2 несет, по крайней мере, одну детектируемую частицу
Пептидный антагонист зонулина // 2214267
Изобретение относится к области медицины и биотехнологии и касается пептидных антагонистов зонулина
Изобретение относится к области вирусологии