Способ получения биологически активной композиции
Авторы патента:
Использование: в качестве фармацевтических или косметических средств, позволяющих ускорить процесс эпитализации участков тела, заживление бедренных язв, пролежней и т.д. Сущность изобретения: ассоциаты гиалуроновой кислоты с ионами Co или Zn в фармацевтически эффективном количестве смешивают с целевыми добавками. 3 ил., 3 табл.
Изобретение относится к способам получения композиций на основе новых ассоциатов (комплексов) депротонированной гиалуроновой кислоты с ионами 3d металлов четвертого периода периодической таблицы и соединения, а именно Со и Zn.
Композиции, содержащие ассоциаты, гиалуронаты цинка и кобальта, могут использоваться в качестве фармацевтических (терапевтических) или косметических средств. Область применения композиций, содержащих новые ассоциаты, в соответствии с изобретением распространяется, например на ускорение процесса эпитализации участков тела, заживление бедренных язв, пролежней, главным образом незаживающих ран, ожогов, последствий радиации и теплового воздействия, воспалений сальной железы, а также они применяются и в других областях. Гиалуроновая кислота представляет собой макромолекулу. Она была получена более пятидесяти лет назад. Гиалуроновая кислота представляет собой природный гликозаминогликан высокой вязкости, содержащий глюкороновую кислоту и В1-4 глюкозамин с изменяющимся соотношением компонентов: ее молекулярная масса находится в пределах от 5,0 тыс. до нескольких (от 8 до 13) млн. До последнего времени гиалуроновую кислоту использовали в виде натриевой соли, например, в терапии, главным образом в офтальмологии, хирурги и косметологии. Соли гиалуроновой кислоты, содержащие ионы щелочных и щелочно-земельных металлов, магния, алюминия, аммония или производных аммония, могут быть использованы в качестве носителей, промотирующих абсорбцию лекарств. Соли тяжелых металлов гиалуроновой кислоты (в которых к "тяжелым металлам" относят элементы 5,6 и 7-го периодов периодической таблицы, а также лантаниды и актиниды) и соли серебра вместе с ними используют в качестве фунгицидных веществ, тогда как соли золота применяют для лечения артрита [1]. В литературе нельзя найти никаких ссылок, относящихся к ассоциатам (комплексам) гиалуроновой кислоты, содержащей ионы 3 d металлов четвертого периода периодической таблицы, действительно, в соответствии с данными хроматографического анализа при фильтрации геля, гиалуроновая кислота не может связывать ионы цинка, в отличие от гепарина. Несмотря на тот факт, что в соответствии с литературными данными гиалуроновая кислота (или ее натриевая соль) не может связывать ионы цинка, авторы изобретения решали задачу исследовать химические процессы взаимодействия между гиалуроновой кислотой и ионами 3 d металлов четвертого периода периодической таблицы, включающей в себя главным образом ионы цинка и кобальта. Так как в промышленном производстве гиалуроновую кислоту выпускают практически только в виде ее натриевой соли, данная соль является основным веществом, содержащим гиалуронат. Поэтому исследования начали с изучением процесса взаимодействия ионов натрия и гиалуроната. С этой целью активность свободных ионов натрия из водных растворов гиалуроната натрия была определена с помощью стеклянного натрийселективного электрода. В соответствии с данными исследований было однозначно установлено, что не более, чем 60% ионов натрия, введенных в эквивалентном соотношении вместе с карбоксилатными группами гиалуроната, присутствуют в водных растворах в виде свободных ионов, тогда как оставшиеся 40% образуют связь с гиалуронатом. В соответствии с измерениями было определено, что путем увеличения концентрации ионов натрия, количество химически связанных ионов натрия может быть увеличено до 50-55% в расчете на все карбоксильные группы. Таким образом, было выявлено, что несмотря на общие характеристики всех солей, гиалуронат натрия не полностью диссоциирует в водном растворе. На следующей стадии исследований водный раствор гиалуроната натрия был оттитрован раствором хлорида цинка при использовании натриевого ион-селективного электрода, упомянутого при описании определения изменения активности свободных ионов натрия в системе. Характеристическая кривая, описывающая процесс, представлена на фиг. 1. Понятно, что химически связанные с гиалуронатом ионы натрия освобождаются под действием ионов цинка. В соответствии с результатами измерений общая концентрация ионов натрия освобождается за счет эквивалентного количества цинка, факт, определенно доказывающий, что ионы цинка образуют с гиалуронатом более прочную связь, чем ионы натрия. Таким образом, более раннее утверждение о том, что гиалуроновая кислота не может связывать ионы цинка было экспериментально опровергнуто. В соответствии с данными проведенных исследований, становится ясно, что благодаря взаимодействию эквивалентных количеств гиалуроната натрия и ионов цинка (хлорида цинка) в водном растворе, образуется ассоциат гиалуроната цинка стехиометрического состава. После соответствующей изотонизации полученный раствор может непосредственно использоваться в терапевтических целях, и соединение цинка в твердом состоянии не нужно получать отдельным способом. Осуществление предварительных исследований с применением ионов кобальта и других ионов 3 d металлов приводит к аналогичным результатам. Был получен комплекс в твердом состоянии для изучения свойств соединения, и непосредственное окружение ионов цинка было исследовано методом получения тонких структур при поглощении рентгеновских лучей. Было установлено, что цинк окружен четырьмя атомами углерода во внутренней координационной сфере. Длина связи Zn-O равна 199 рm, тогда как два атома углерода находятся на расстоянии 241 рm от атома цинка. В соответствии с исследованиями гиалуронат цинка значительно отличается от аналогичного комплекса меди, который содержит четыре экваториальные и две осевые связи Cu-O длиной 194 и 234 pm соответственно. Расстояние между атомом меди и двумя углеводородными атомами равно 258 рm. Структура комплекса кобальта подобна структуре цинка, а не меди. Изобретение, таким образом, касается композиции способа получения биологически активной композиции путем смешения фармацевтически эффективного количества металлсодержащего производного гиалуроновой кислоты, в качестве которого используют ассоциаты гиалуроновой кислоты с ионами Со или Zn. При необходимости указанные ассоциаты могут быть использованы в составе с другими активными компонентами и/или добавками. Входящие в состав композиции ассоциаты (комплексы) получают следующим образом: а) добавление водного раствора, содержащего эквивалентное количество соли, предпочтительно хлорида Со или Zn в водный раствор гиалуроната натрия или другой соли (соли щелочного или щелочно-земельного металла, при желании соли серебра) гиалуроната: или в) растворение ассоциата, образованного из гиалуроната кислоты вместе с солью четвертичного аммония в водной суспензии, в смеси растворителей, содержащих водные растворы иона Сo или Zn ит растворитель, частично смешиваемый с водой, предпочтительно Н-бутанол, затем - осаждение ассоциата (комплекса) полученного из гиалуроновой кислоты с ионом СО или Zn известным способом с применением алканола или алканона, или выделение осадка из раствора и затем, при желании, высушивание в мягких условиях. В процессе получения ассоциатов металлов способом, указанным выше, рН остается равным 5. В случае 0,2 мас./об.% раствора гиалуроната, рН достигает величины 5,4, тогда как в случае 0,5 мас./об.% раствора, рН равно 5. При необходимости, рН последнего раствора можно довести от 5,5 до 5,6 путем добавления нескольких капель изотонического раствора ацетата натрия. Растворы двух видов, содержащие гиалуронат цинка в качестве активного компонента, могут быт получены способом, указанным выше. Изотонический раствор гиалуроната цинка получают путем добавления избытка хлорида цинка. С учетом того, что свободный хлорид цинка может быть использован в дерматологии, осмотическое давление раствора гиалуроната цинка было доведено до изотонического давления с помощью хлорида цинка. Раствор, полученный таким образом не содержит свободный (не связанный с цинком) гиалуронат вообще, но в системе вместе с гиалуронатом цинка присутствует избыток хлорида цинка. Изотонический раствор гиалуроната цинка получают путем добавления моносахарида или сахарного спирта. Для терапевтических целей, когда присутствие ионов цинка, не связанных с гиалуронатом не оговаривается, изотонический раствор, содержащий ионы цинка в количестве, эквивалентному гиалуронату, получают с применением многоатомного спирта (сахарного спирта, преимущественно сорбитола) или моно- или дисахарида (преимущественно глюкозы). Содержание свободного иона цинка и свободного диалуроната в данной системе не достигает 5% от общего содержания цинка или гиалуроната, соответственно. В процессе использования ассоциатов в соответствии с изобретением со временем могут понадобиться соединения, содержащие свободные ионы. То есть ассоциаты, полученные способом, указанным выше, обычно содержат хлорид натрия или другую соль, образованную из катиона исходного гиалуроната и аниона соли 3 d металла. Два различных варианта способа могут быть использованы для получения ассоциата гиалуроновой кислоты, не содержащего соль, образованного с помощью иона Со или Zn. Это осуществляется следующим образом. а) раствор соли четвертичного аммония порционно добавляют в известный раствор гиалуроната, предпочтительно гиалуроната натрия. После очистки новый осажденный ассоциат соли четвертичного аммония растворяют при интенсивном перемешивании в смеси двух растворителей, состоящих из водного раствора иона Со или Zn и растворителя, частично смешивающегося с водой, предпочтительно н-бутанола. Две фазы можно разделить, затем ассоциат гиалуроната осаждают путем добавления алканола или алканона в водную фазу. Осадок отделяют и промывают или в) после добавления 2,0-3,0 объемов С1-С3 алканола или С3-С4алканона при перемешивании к раствору гиалуроната цинка, соответствующему неизотонизированному раствору, содержащему хлорид цинка, в количестве эквивалентном гиалуронату, осажденный гиалуронат цинка отфильтровывают и промывают с помощью алканола или алканона, соответственно использованному для осаждения. При необходимости гиалуронат цинка растворяют в свободной воде и повторяют процесс осаждения. Когда необходимо получить твердый гиалуронат цинка, содержащий свободные ионы, осадок высушивают под давлением в мягких условиях. В случае, если требуется раствор гиалуроната цинка, содержащий свободные ионы, предпочтительно растворить гиалуронат цинка, полученный из растворителя. В соответствии с любым из обоих вариантов процесса твердое или растворенное вещество, содержащее свободные ионы, получают с произвольной чистотой, зависящей от качества исходного гиалуроната цинка. Изобретение более подробно иллюстрируется нижеследующими неограниченными примерами. Вязкость гиалуроната была измерена вискозиметром Оствальда в физиологическом соляном растворе при 25оС. Значение характеристической вязкости, экстраполированное до "о" концентрации, т.е. ( [![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076217.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076218.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076219.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076220.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076221.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076222.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/956.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076223.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076224.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/956.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076225.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076226.gif)
Гиалуронат цинка может быть получен указанным способом из ассоциатов, образованных из других солей четвертичного аммония. Четвертичные соли, необходимые для этой цели:
хлорид карботетрадециклоксиметил-триметиламмоний (см. описание изобретения к патенту Венгрии N 188,537). хлорид гексадецилпиридина,
хлорид цетилпиридина,
хлорид триметиламмония и подобные соединения. П р и м е р 7. Получение гиалуроната кобальта соответствует способу, указанному в примере 6, за исключением того, что ассоциат гиалуроновой кислоты четвертичного аммония растворяют в смеси растворителей состоящей из 2 мас./об.% хлорида кобальта (II) 6 Н2О водного раствора и н-бутанола. П р и м е р 8. Получение водного раствора, содержащего 0,50 мас./об.% гиалуроната цинка и изотонического раствора с помощью хлорида цинка. Около 50 мл раствора хлорида цинка концентрацией 0,110 моль/л добавляют к 0,50 г гиалуроната натрия в 100 мл мерную колбу и оставляют на всю ночь для набухания. Затем, гиалуронат натрия растворяют при встряхивании и колбу заполняют до отметки раствором хлорида цинка концентрацией 0,110 моль/л. Осмотическое давление полученного раствора составляет 0,1491 моль/л, величина рН равна 5,0. При необходимости величину рН доводят до 5,5-5,6 путем добавления 2,00 мл раствора ацетата натрия концентрацией 0,150 моль/л. После достижения данного значения рН, осмотическое давление раствора становится равным 0,1489. Раствор гиалуроната цинка получают из особенно чистого гиалуроната натрия, описанного в примере 3, вместе с дважды дистиллированной водой в стерильных условиях. Затем раствор отфильтровывают через мембранный фильтр (0,45
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/956.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/956.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/956.gif)
П р и м е р ы 14-26. В следующих примерах компоненты различных веществ (для фармакологии и косметологии) приведены в соответствии с выбранной рецептурой. Получение изотонических растворов гиалуроната цинка описано в приведенных на основании измерения спектральной поглощательной способности при 160 нм с применением 1 см кюветы примерах. Здесь термин дистиллированная вода для инъекций" соответствует дважды дистиллированной воде, полученной в стерильных условиях. Инъекционные растворы
Вещества, приведенные в примерах 14-17, используют для внутрикожных инъекций, а в примере 18 - для внутриглазных инъекций. Активный компонент, описание которого приведено в примере 3, используют в данных примерах. П р и м е р 14. Активный компонент гиалуроната цинка 2,0 мг Сорбитол 48,3 мг Конечный объем водного раствора, полученный с помо- щью дистиллирован- ной воды, для инъекций 1,0 мл
П р и м е р 15. Активный компонент гиалуроната цинка 5,0 мг Сорбитол 42,8 мг Конечный объем водного раствора, полученный с помо- щью дистиллиро- ванной воды, для инъекций 1,0 мл
П р и м е р 16. Активный компонент гиалуроната цинка 2,0 мг Пропил-пара-гидро- ксибензоат 0,05 мг Метал-пара-гидро- ксибензоат 0,5 мг Глюкоза 48,6 мг Конечный объем водного раствора, полученного с по- мощью дистиллиро- ванной воды, для инъекций 1,0 мл
П р и м е р 17. Активный компонент гиалуроната цинка 5,0 мг Пропил-пара-гидро- ксибензоат 0,05 мг Метил-пара-гидро- ксибензоат 0,5 мг Глюкоза 44,1 мг Конечный объем водного раствора, полученного с по- мощью дистиллиро- ванной воды, для инъекций 1,0 мл
П р и м е р 18. Активный компонент гиалуроната цинка 10,0 мг Сорбат калия 1,0 мг Сорбитол 41,0 мг
Конечный объем
водного раствора,
полученного с по-
мощью дистиллиро-
ванной воды, для инъекций 1,0 мл
Вещества, приведенные в примерах 20-28, используются, в основном в дерматологии и косметологии. Активный компонент, приведенный в примере 2, используют в данных примерах. Растворы для местного применения
П р и м е р 19. Активный компонент гиалуроната цинка 5,0 мг Сорбат калия 1,0 мг Ацетат натрия 24,6 мг Конечный объем водного раствора, полученный с по- мощью дистиллиро- ванной воды 1,0 мл
П р и м е р 20. Активный компонент гиалуроната цинка 2,0 мг Сорбат калия 1,0 мг Сорбитол 48,3 мг Конечный объем водного раствора, полученный с по- мощью дистиллиро- ванной воды 1,0 мл
Гели для местного применения
П р и м е р 21. Активный компонент гиалуроната цинка 20,0 мг Полимеризат акри- ловой кислоты 200 мг Гидроксид натрия 30% концентрации 50 мг Сорбат калия 10 мг Дистиллиро- ванная вода До 10,0 мг
П р и м е р 22. Активный компонент гиалуроната цинка 20,0 мг Полимеризат акри- ловой кислоты 50 мг Гидроксид натрия 30% концентрации 40 мг Пропиленгликоль 1500 мг Сорбат калия 10 мг Дистиллиро- ванная вода До 10,0 мг
Пасты и мази для местного применения
П р и м е р 23. Активный компонент гиалуроната цинка 50 мг Сорбат калия 10 мг Мягкий белый воск 125 мг Сорбитанолеат 150 мг Цетиловый сте- ариловый спирт 840 мг Глицеринмоно- стеарат 1100 мг Пропиленгликоль 4750 мг Дистиллиро- ванная вода До 10 г П р и м е р 24. Активный компонент гиалуроната кобальта 50 мг Сорбат калия 10 мг Мягкий белый воск 125 мг Сорбитанолеат 150 мг Цетиловый сте- ариловый спирт 840 мг Глицеринмоно- стеарат 1100 мгПропиленгликоль 4750 мг Дистиллиро- ванная вода До 10 г
П р и м е р 25. Активный компонент гиалуроната цинка 50 мг 2-Феноксиэтинол 100 мг Лаурилсульфат натрия 100 мг Цетилпальмитат 400 мг Стеарин 400 мг Стеариновый спирт 450 мг Цетиловый спирт 450 мг Белый вазелин 500 мг Пропиленгликоль 550 мг Глицерин 600 мг Дистиллиро- ванная вода До 10,0 г
П р и м е р 26. Активный компонент гиалуроната кобальта 50 мг 2-Феноксиэтанол 100 мг Лаурилсульфат натрия 100 мг Цетилпальмитат 400 мг Стеарин 400 мг Стеариновый спирт 450 мг Цетиловый спирт 450 мг Белый вазелин 500 мг Пропиленгликоль 550 мг Глицерин 600 мг Дистиллиро- ванная воа До 10 г
П р и м е р 27. Активный компонент гиалуроната цинка 50,0 мг Микрокристалли- ческий парафин 250 мг Пропиленгликоль 500 мг Сорбитол 400 мг Животный воск (ацетилированный) 500 мг Белый вазелин До 10 г
Вещества для дезинфекции и рубцевания гнойных ран и ожогов
П р и м е р 28. Активный компонент гиалуроната цинка 10 мг Сорбат калия 1,0 мг 6-Гидрофильный коллоидный ди- оксид кремния 50 мг Сорбитол До 1 г
Результаты клинико-фармакологических исследований соединения (пример 13), содержащего в качестве активного компонента гиалуронат цинка в соответствии с изобретением, поясняются на примере лечения бедренной язвы при использовании соединения для эпитализации поверхностей тела, лишенных эпителия. Соединение, содержащее гиалуронат натрия, было использовано в качестве контрольного образца. Настоящее исследование было проведено на 12 или 14 образцах соответственно с помощью 8-12 пациентов, страдающих бедренной язвой. Распределение пациентов обоих групп в соответствии с полом и возрастом, а также природой болезни было следующее. Данные приведены в табл. 1. Лечение было предусмотрено таким образом, что предварительно проводилась терапевтическая обработка в соответствии с клиническим состоянием язвы. Лечение с помощью гиалуроната цинка или натрия, соответственно, было начато на обработанных язвах или язвах со значительно сокращенными рубцами. Лечение проводилось ежедневно таким образом, что один раз в день на поверхность, пораженную язвой, наносился тонкий слой смачивающего рану лекарства. Соединение использовалось в течение четырех недель. В начале лечения и затем раз в неделю заполнялся листок записи результатов лечения и делались фотоснимки участков кожи пациента, пораженные язвой. Проводился бактериологический анализ образца. Характеристики и степень поражения эпителия приведены ниже. Характеристики Степень поражения
Участок(а)
0 0
Менее 10 см2 1
Между 10 и 25 см2 2
Более 25 см2 3
Инфициро-
ванность (в)
Клинически
чистый 0
Покрытый на 50% 1
Покрытый на 100% 2
Некроз (с)
(только в случае
артериальной язвы)
отрицательный 0
Ниже 10% 1
Между 10% и 15% 2
100% 3
Отсутствие некроза 4
Оценка
Для оценки были определены значения отдельных характеристик и общая степень поражения была рассчитана с помощью следующей формулы:
S =
![](https://img.poleznayamodel.ru/img_pat/307/3076227.gif)
Формула изобретения
РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5
Похожие патенты:
Изобретение относится к стабильному готовому к использованию раствору, который может вводиться внутривенной инъекцией и содержит противоопухолевый антрациклиновый гликозид, например, доксорубицин, а также к получению этого раствора в герметизированном контейнере и к способу лечения опухолей с использованием указанного готового к употреблению раствора
Изобретение относится к фотоотверждаемым производным гликозаминогликана, каждое из которых получают химическим связыванием фотореактивного соединения с гликозаминогликаном /здесь и далее иногда именуемым для краткости как "GAG"/, и к сшитым гликозаминогликанам, имеющим трехмерную сетчатую структуру, которую получают, подвергая указанные производные фотореакции для димеризации фотореактивного соединения, к способам их получения, и, далее, к удовлетворительным биосовместимым материалам для медицинского использования, которые их содержат
Изобретение относится к соединениям, используемым в качестве лекарственных средств, обладающих антиэндотоксинной активностью, в частности к аналогам липида A
Изобретение относится к способам получения катионита на основе карбоксилцеллюлозы путем окисления целлюлозы
Способ получения биосорбента "вокацит" // 2038084
Изобретение относится к медицине и химии, в частности к фармакологии, конкретно к способу получения медицинского препарата для лечения больных, пораженных лучевой болезнью, а также для лечения и профилактики отравлений солями тяжелых металлов
Изобретение относится к фотоотверждаемым производным гликозаминогликана, каждое из которых получают химическим связыванием фотореактивного соединения с гликозаминогликаном /здесь и далее иногда именуемым для краткости как "GAG"/, и к сшитым гликозаминогликанам, имеющим трехмерную сетчатую структуру, которую получают, подвергая указанные производные фотореакции для димеризации фотореактивного соединения, к способам их получения, и, далее, к удовлетворительным биосовместимым материалам для медицинского использования, которые их содержат
Изобретение относится к технологии получения абсорбирующих композиций для изготовления продуктов одноразового действия, абсорбирующих физиологические жидкости
Изобретение относится к химической технологии, конкретно к способу получения геля или суспензии из хитозана, и может быть использовано в пищевой, косметической, фармацевтической и других отраслях промышленности
Изобретение относится к макропористым хитозановым гранулам, имеющим относительно большие и одинаковые поры размером 30-150 мкм снаружи и внутри, которые распределены от поверхности до области ядра, и способу их получения, включающему в себя следующие стадии: добавление по каплям хитозанового раствора, водного хитозанового раствора или их смеси в низкотемпературный органический растворитель или жидкий азот; регуляцию размера пор с помощью метода разделения фаз за счет разницы температур
Нанокомпозит и способ его получения // 2256601
Изобретение относится к новому нанокомпозиту, который может найти применение как компонент, способствующий изменению потребительских свойств создаваемых на его основе материалов
Композиция на основе хитозана, снижающая содержание нитратов в растениеводческой продукции // 2257711
Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к улучшению качества растениеводческой продукции с помощью экологически безопасных биологически активных веществ, путем снижения содержания нитратов в овощах, кормовых и других сельскохозяйственных культурах
Изобретение относится к получению биологически активных хитозановых продуктов и их производных и может найти применение в производстве косметических, лечебно-косметических, фармакологических препаратов, биологически активных добавок к пище и пищевых продуктов
Изобретение относится к химии хитозана и полиэдрических клозо-гидроборатов, которые могут применяться как активные компоненты в энергоемких составах, способу их получения и применения
Состав для получения модифицированной бумаги // 2355841
Изобретение относится к технологии получения синтетической бумаги, в частности к составу для получения модифицированной бумаги с повышенными огне- и теплозащитными свойствами, и может быть использовано в строительстве, самолето-, судо- и автомобилестроении