Способ получения сухих вирусных препаратов

 

Использование: медицинская и микробиологическая промышленность. Сущность изобретения: жидкий вирусный материал фасуют в емкости с последующей его лиофияизацией в камере в присутствии сорбента до получения препарата в виде таблеток. На таблетки сухого материала наносят слой обезвоженного сорбента с последующей герметизацией емкостей. В качестве сорбента используют зерна ионита КБ-4П2 в Ma-форме с сорбционной емкостью, превышающей количество остаточной влаги в препарате .1 з.п. ф-лы, 2 табл.

союз советских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

"(4633ЯЩ

Bfh8 Д;,.; ь ...,., 4 щф

Б Я -1 J pl (g - - г А (21) 4862808/13 (22) 29.08.90 (46) 30.05.93. Бюл. М 20 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт молекулярной биологии Научнопроизводственного объединения "Вектор" (72) B.Н.Зеленков и B.Â,Ñîëîäêèé (56) Долинова К,Е. Основы технологии сухихбиопрепаратов, M. Медицина, 1969, с, 202.

Тутова З.Г., Куц П.С, Сушка продуктов микробиологического производства. М,. Агропромиздат, 1987, с. 192, 261, Изобретение относится к технологии получения и хранения сухих вирусных препаратов и может быть использовано в медицинской и микробиологической п ромы шл енности, Целью изобретения является упрощение технологии получения препарата с сохранением его биоактивности при длительном хранении при положительных температурах.

Это достигается следующей совокупностью существенных признаков. Способ включает расфасовку в емкости жидкого вирусного материала с компонентами защитной среды, лиофилизацию материала в стерильных условиях до получения препарата в виде таблеток. Кроме того, в емкости вводят порции обезвоженного сорбейта в виде слоев, нанесенных на открытые поверхности таблеток сухого вирусного материала с последующей герметизацией этих емкостей для хранения при положительных Ы«, 1818344 А1

2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУХИХ ВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ (57) Использование; медицинская и микробиологическая промышленность, Сущность изобретения: жидкий вирусный материал фасуют в емкости с последующей его лиофи.лизацией в камере в присутствии сорбента до получения препарата в виде таблеток. На таблетки сухого материала наносят слой обезвоженного сорбента с последующей герметизацией емкостей. В качестве сорбента используют зерна ионита КБ-4П2 в

Na-форме с сорбционной емкостью, превышающей количество остаточной влаги в препарате. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

Ф температурах. B качестве сорбента исполь- 2 зуют зерна ионита КБ-4П2 в Na-форме с сорбционной емкостью, превышающей количество остаточной влаги в препарате.

Способ реализован следующим образом, В суспензии, например вируса Венесуэльского энцефаломиелита лошадей (штамм

ТС-83), растворяют при перемешивании ф стабилизирующйе добавки (глюкозу, саха- ф розу, аминоуксусную кислоту, сыворотку крупного рогатого скота). Жидкий материал фасуют по 0,5 мл в пенициллиновые флаконы, которые устанавливают на полках сублиматора LGA-0,5 (ГДР) и проводят лиофилизацию по стандартному режиму.

Остаточная влажность лиофилизированн ых таблеток вирусного материала, определенная стандартным методом выдерживания образцов пои 105 С до постоянного веса, составляет 4,0+ 1,53 Определение биоактивности (биотитра) образцов проводят по

1818344 стандартной методике на монослое культуры фибропластов куриных эмбрионов (ФЭ К). Биотитр образцов выражают в бляшкообразующих единицах (БОЕ) на 1 мл вируссодержащей суспензии. Все операции по получению лиофилизированного материала и определению его характеристик широко используются в вирусологической практике, Флаконы с лиофилизированным материалом делят на две части — контрольную и экспериментальную партии, Во флаконы экспериментальной партии (перед

10 герметизацией) в стерильных условиях вводят порции обезвоженного сорбента в виде слоев, нанесенных на открытые поверхности таблеток сухого вирусного материала.

Сорбционная емкость сорбента превышает количество остаточной влаги в препарате. В качестве сорбентов могут быть использованы цеолиты или ионнообменные смолы, на- 20 пример Na форма катионита КБ-4П2, имеющего влагоемкость 110 r воды на 100 г сорбента и насыпную плотность 1,0 г/см .

Катионит КБ-4П2 удобен для реализации способа, поскольку состоит из частиц сфе- 25 рической формы размером менее 0,1 см, имеющих значительную механическую прочность и большую сорбционную емкость, Для покрытия одной таблетки препарата в пенициллиновом флаконе катионитом КБ- 30

4П2 в Na форме достаточно 0,5 r этого сор- бента. Далее емкости с контрольными и экспериментальными образцами герметично закупоривают и испытывают на сохранение биоактивности вируса ВЭЛ при 35 температурах 20 С и 37 С в одинаковых условиях в течение длительного времени, 8 процессе хранения проводят анализ экспериментальных и контрольных образцов материала на биоактивность методом бляш- 40 кообразующих единиц (БОЕ}, Причем перед растворением таблеток во флаконах экспериментальных партий (при определении биотитра) сорбент из флаконов удаляется.

В табл.1 и 2 приведены эксперимен- 45 таяьные данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ в контрольных и экспериментальных партиях лиофилиэированного материала при температурах хранения 37 С и 20 С. 50

Как видно из табл.1, биоактивность образцов экспериментальной партии после

1,5 месяцев хранения при 37 С составляет

5,7 Ig БОЕ/мл при отсутствии даже остаточной биоактивности в контроле (опыт 6). Хранение экспериментальных образцов при

20 С ведет к снижению биоактивности на

0,6 Ig БОЕ/мл (т.е. в 3 раза) при снижении ее в контроле к 85 суткам на 3 Ig БОЕ/мл (т.е, в 1000 раз) (и ример 10).

Технико-экономическая эффективность предлагаемого способа состоит в упрощении технологии получения новых вирусных препаратов при оптимизации их компонентных составов и подборе режимов сушки. В результате реализации данного способа отпадает необходимость в дорогостоящем оборудовании в постоянном контроле за остаточной влажностью экспериментальных биопрепаратов, а также введения инертного газа в емкости или их вакуумирования перед герметизацией для увеличения срока хранения препарата, вследствие чего обеспечивается возможность получения и хранения новых препаратов в любых экспериментальных лабораториях, Формула изобретения

1, Способ получения сухих вирусных препаратов, включающий расфасовку в емкости жидкого вирусного материала с компонентами защитной среды, лиофилизацию материала в камере до получения препарата в виде таблеток и герметизацию емкостей для последующего хранения препарата; о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения технологии получения препарата с сохранением его биоактивности при длительном хра-. нении при положительных температурах, в емкости перед их герметизацией вводят сорбент воды в виде слоя, покрывающего поверхности таблеток лиофилизированного вирусного препарата, с сорбционной емкостью этого слоя, превышающей количество остаточной влаги в препарате, 2, Способ по п1, отл и ч а ю щи и с я тем, что в качестве сорбента воды используют зерна ионита КБ-4П2 в Na-форме, а соотношение исходного материала и ионита составляет не менее 1 мл:1 г при насыпной плотности ионита 1 г/см .

1818344

Таблица 1

Данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ при температуре хранения 37 С

Таблица 2

Данные по сохранению биоактивности вируса ВЭЛ при температуре хранения 20 С

Составитель В. Зеленков

Техред М.Моргентал Корректор П. Гереши

Редактор О. Павлова

Заказ 1926 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101