Дозированная форма для рыбы

 

Изобретение относится к рыбной промышленности. Дозированная форма, предназначенная для обработки рыбы биологически активными агентами содержит наружный слой, по существу проницаемый для воды и активного агента, причем наружный слой содержит по крайней мере один материал, выбираемый из группы, включающей животный материал, растительный материал и водный экстракт из морских материалов, и по крайней мере одну камеру, частично заполненную по крайней мере одним активным агентом, которая окружена указанным наружным слоем. Животный материал , образующий наружный слой, представляет рыбную муку. Наружный слой дополнительно содержит связующее вещество , составляющее 5-20 мас.% дозированной1 формы. Связующее вещество составляет около 10 мас.% дозированной формы. Камера содержит носитель для активного агента, который совместно экструдируется с наружным слоем, Носитель представляет экструдируемую среду, которая отверждается при температуре ниже 0°С. Носитель представляет водный гелеббразующий материал. 6 з.п. ф-лы. 9 ил., 5 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 К 61/00

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

5 табл (21) 4894134/13 (86) РСТ/NO 89/00059 (14,06,89) . (22) 14.12.90 (46) 30.04,93. Бюл. йт 16 (31) 882653 (32) 15.06.88 (33) NO (71) Апотокернес Лабораториум А/с (NO) (72) Одд Финн Эллингсен, Киелль Эрик Нордби и Кнут Эйнар Расмуссен (NO). (56) Авторское свидетельство СССР

N 1113918, кл. А 01 К 61/00, 1983. (54) ДОЗИРОВАННАЯ ФОРМА ДЛЯ РЫБЫ (57) Изобретение относится к рыбной промышленности. Дозированная форма, предназначенная для обработки рыбы биологически активными агентами содержит наружный слой, по существу проницаемый для воды и активного агента, причем наружный слой содержит по крайней мере один .

Изобретение относится к рыбной промышленности, а именно к лечению рыб, Целью изобретения является обеспечение эффективноголечения рыб путем поглощения роыбой лекарственного препарата.

На фиг.1 изображен один вариант дозированной формы по изобретению в виде поперечного сечения; на фиг;2 — сравнивается высвобождение окситетрациклин — HCI, (далее "ОТС-H Cl) в морскую воду при температуре 40С из промышленно выпускаемых лекарственных гранул продукта А и продукта В соответственно и высвобождение OTCHCI из дозированной формы (названной

"Аквафармака"), полученной в соответствии

„„5LJ „„1812941 А3 материал, выбираемый из группы, включающей животный материал, растительный материал и водный экстракт из морских материалов, и по крайней мере одну камеру. частично заполненную по крайней мере одним активным агентом, которая окружена указанным наружным слоем. Животный материал, образующий наружный слой, представляет рыбную муку, Наружный слой дополнительно содержит связующее вещество, составляющее 5-20 мас.7; дозированной: формы. Связующее вещество составляет около 10 мас.$ дозированной формы. Камера содержит носитель для активного агента, который совместно экструдируется с наружным слоем, Носитель представляет экструдируемую среду, которая отверждается при температуре ниже

0 С, Носитель представляет водный гелеобраэующий материал. 6 з.п. ф-лы, 9 ил„

С0 ювей с изобретением; на фиг.3 — сравниваются скорости высвобождения тех же дозированных форм, но при температуре воды; равной

18 С; на фиг.4 — сравниваются концентра- + ции окситетрациклина в плазме у рыбы, получавшей два промышленно вы пускаемых вида лекарственных кормовых гранул и дозированную.форму "Аквафармака" по изо- { Ъ бретению; на фиг,5 — сравниваются концентрации окситетрациклина в мышечных тканях у рыбы, получавшей два промышленно выпускаемых вида лекарственных кормовых гранул и дозированную форму

"Аквафармака" по изобретению; на фиг.6-сравниваются скорости высвобождения

1812941 флюмхина из дозированной формы "Аквафармака" (0,4 флюмхина) и скорости высвобождения оксолиновой кислоты из продукта А (0,5 оксолиновой кислоты) при температуре 4 С; на фиг.7 — сравниваются скорости высвобождения тех же дозированных форм, которые были представлены на фиг.6, но при температуре воды, равной

18 С;.на фиг.8 — сравниваются концентрации активного агента в плазме у рыбы, получавшей дозированную форму "Аквафармака", содержащую 0,2, 0,5 (десятидневное кормление), 0,5 (пятидневное кормление), и продукт А, содержащий 0,5% оксолиновой кислоты; на фиг,9 — сравнива«отся концентрации активного агента в мышечных тканях у рыбы, получавшей те же дозированные формы, которые были представлены на фиг.8.

Дозированная форма по изобретению включает наружный слой 1 и внутреннюю камеру 2, содержащую активный агент 3.

Лекарственное средство вариантно находится в материале носителя, Таким образом, в соответствии с одним вариантом осуществления изобретения дозированная форма представляет собой, "подушечку", Наружный слой содер>кит животный или растительный материал (предпочтительно рыбную муку) и/или водный экстракт из морских материалов, вариантные концентрированные вкусовые компоненты и вариантное связующее вещество, Компоненты наружного слоя могут выбираться с достижением вкуса и запаха продукта, стимулирующих питание.-Этот слой эффективно маскирует вкус активного агента, находящегося в камере. Например, наружный слой может включать 60 мас.о тонко измельченной. рыбной муки, полученной с помощью низкотемпературной технологии из рыбной муки, такой как мука из сельди, хека, мойвы и т,д., 35 мас. водного экстракта из морских материалов, таких как отходы сельди, хека, кальмара (т.е. части животного, не используемые в пищу человека), рыбные отходы, отходы креветок, криль и т,д„и около 5 мас, связующего вещества. Связующее вещество может представлять одно или несколько модифи. цированных производных крахмала, таких как модифицированный гидроксипропилдикрахмалфосфат, хотя и не ограничивается этими веществами.

Растительные материалы; которые мо гут составлять наружнь«й слой или его часть, включает, например, соевую муку, картофельный крахмал и производные крахмала, пшеничную муку, лактозу и подобные материалы, Водный экстракт морских материалов преимущественно содержит сухие вещества в количестве 30-40 мас., и его предпочтительно получают путем водной экстракции морских материалов. Водный экстракт может присутствовать в растворенной форме, а также в сухой форме.

В наружном слое дозированной формы связующее вещество может присутствовать в концентрациях в диапазоне от 5 до 20, предпочтительно в количестве 10, в пересчете на вес дозированной формы, Связующее вещество благоприятно взаимо- действует со связующими свойствами вод15 ного экстракта морских материалов, увеличивая физическую прочность наружного слоя.

Дозированная форма может быть изготовлена посредством совместной экструзии

20 наружного слоя с материалом в камере. Наружный слой хорошо зкструдируется при содержании воды, равном 15 — ЗО/, предпочтительно 20, а затем высушивается до дости>кения содержания. воды, равного 10—

20, предпочтительно 13%.

Объем камеры 2 может, например, в 10 раз превышать объем лекарственного средства 3. Специалисту в этой области понятно, что могут использоваться и другие соотно30 шения обьемов. Камера 2 может заполняться 10-20 мас, совместно экструдируемой массы, содержащей лекарственное средство; в пересчете на вес дозированной формы. В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления изобретения соотношение между наружным и внутренним диаметром дозированной формы равняется 2: t..

Как указывалось выше, дозированная

40 форма по изобретению предпочтительно изготавливается посредством совместной экструзии наружного слоя вокруг внутреннего материала, т.е. материала, содержащего активный агент. Дозированная форма имеет

45 одну или несколько камер для достижения плавучести. Благодаря такой конструкции дозированная форма характеризуется не только великолепной устойчивостью при хранении, но и стабильностью в воде, 50 Вследствие непроницаемости наружного слоя активный агент не высвобождается раньше времени в окружающую воду. Активнь«й компонент сохраняет свою химическую стойкость внутри дозированной формы, Животный или растительный материал, образующий основной компонент наружного слоя, легко переваривается в желудке рыбы, в результате чего активный агент, находившийся в камере, высвобождается в пищеварительный тракт рыбы.

1812941

Кроме активного агента, камера может быть заполнена текучей средой, предпочтительно газом или газовой смесью, такой как воздух; Для предотвращения окисления лекарственного средства во внутренней камере можно использовать такие инертные газы, как азот.

Активный агент может представлять любой биологически активный агент, используемый для лечения или профилактики здоровья рыбы. Такие агенты включают, например, антибактериальные или противопа.раэитические соединения, такие как тетрациклин, предпочтительно окситетрациклин "(ОТС")" или его соль, флюмхин и оксолиновая кислота, Указанные соединения упомянуты в качестве иллюстрации, но они не ограничивают объем этого изобретения. В камеру дозированной формы могут вводиться не только лекарственные средства, но и другие вещества, Такие вещества, включают, например, витамины, минеральные вещества и подобные вещества.

В соответствии с изобретением могут предусматриваться различные варианты со. держащей активный материал 3 части дозированной формы. Например, активный агент может присутствовать в чистой или концентрированной форме, либо может разбавляться одной или несколькими добавками, или носителями с целью улучшения биологической доступности и стабильности агента. В соответствии с . предпочтительным вариантом осуществления изобретения биологически активнывный агент, находящийся в камере, получают .. путем суспендирования или растворения, активного агента в эмульсии или суспензии, такой. как эмульсия жирового материала.

Жировой материал, пригодный для получейия таких эмульсий, включает жиры и липи.: ды, которые являются жидкими при . температуре около 0 С. Активный агент мо: жет суспендироваться, эмульгироваться, диспергироваться или растворяться в этой . эмульсии. Активные агенты, которые в противном случае легко гидролизовались бы, таким образом стабилйзируются. Вместе с активным агентом могут вводиться другие добавки иди носители при условии, что они являются экструдируемыми, Например, зкструдируемый носитель может представлять .. антиокислитель, препятствующий окислению активного агента во время хранения дозированной формы.

Активный агент может находиться в носителе, представляющем структурный каркас геля, образованный из водного гелеобразующего материала. Такие материалы включают, например, натриевую соль

10

30

55 карбоксиметилцеллюлозы, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, карбоксиполиметилен, например, Карбопол 940 и подобные вещества, Такой носитель является особенно полезным для получения дозированных форм, содержащих флюмхин, по настоящему изобретению, обладающих более высоким поглощением флюмхина.

Пример 1. По шесть единиц каждого продукта А, продукта В и дозированной формы по изобретению, названной "Аквафармака", содержащих окситетрациклин—

HCI, помещали в стеклянный химический

5 стакан, в котором находилась 800 мл свежей морской воды. Концентрация окситетрациклина в каждом из испытуемых продуктов составляла 17;, а вес окситетрациклина в дозированной единице равнялся 0,8 r. Высвобождение окситетрациклина из гранул в окружающую морскую воду определяли при двух различных температурах воды, 4 С (фиг.2) и 18 С (фиг,З). Пробы воды, равные

5 мл, отбирали из химического стакана че5 рез каждые 30 мин в течение 5 ч (или до тех пор, пока гранулы не разрушались), После разбавления концентрацию окситетрациклина в пробах воды определяли посредст вом высокоэффективной жидкостной хроматографии ("НР1С"), Показания высокоэффективной жидкостной хроматографии были получены в результате добавления 2 мл проб к 4 мл метанола, Смесь морской воды и метанола помещали в пороэильную

5 камеру на 10 мин, а затем центрифугировали еще в течение 10 мин, Полученный рас- твор вводили непосредственно в устройство для выполнения высокоэффективной жидкостной хроматографии, включающее ко0 лонку из Сэ-Броунли, Сфери-5, МР С/10 см х 4,6 мм, 3 см х 4,б мм), форколонку из

Сы-Корсаила 37-50 мк, подвижную фазу из

0,02 Мраствора оксалиновой кислоты,,рН 2), ацетонитрил 800/120/ в объемном отноше5 нии/ + 5% диметилформамид. Окситетрациклин был обнаружен при длине волны 280 нм с использованием объемной скорости жидкого продукта, равной 1 мл/мин, при введении 10 мк (автоматическое введение при температуре 20 С). Количество окситетрациклина, растворенного в воде в зависимости от времени, определяли из среднего значения, полученного у шести испытанных единиц, На фиг,2 и 3 показано, что окситетрациклин высвобождался иэ прототипных продуктов А и В, Не наблюдалось какого-ли- бо значительного высвобождения окси;етрациклина из дозированной формы по изобретению при ех же условиях. Повыше1812941 ние температуры не оказало влияния на вы- фармака" по изобретению происходит знасвобождение активного агента из дозиро- чительно медленнее, чем утечка оксолинованной формы по изобретению, вой кислоты из продукта А. При 4 С не

Также определяли время разрушения наблюдалось признаков флюмхина в моргранул посредством измерения периода 5 ской воде, окружающейдозированнуюфорвремени по истечении которого пропитан- му "Аквафармака", даже через 5 ч, При 18 С ные морской водой гранулы проходили че- утечка флюмхина из гранул "Аквафармака" рез сито с диаметром основания, равным 2 начиналась через 3,5 ч, Через 4,5 ч 90% мм, или периода времени, необходимого флюмхина растворялось в морской воде. и для полного измельчения гранул. Время 10 гранулы разрушались. разрушения высчитывали в виде среднего С другой стороны, растворение оксолизначения шестии измерений, Полученные новой кислоты из гранул продукта А начинаданные представлены в табл. 1 для случаев лось сразу же при 4 С и 18 С. Через 4 ч погружения вморскую воду соответственно 100 оксолиновой кислоты иэ продукта А при температуре 4 и 18ОС; 15 растворялось в окружающей морской воде, Из табл.1 видно, что дозированная фор- и гранулй полностью разрушались, ма по изобретению сохраняла устойчивость Эти результаты показывают, что гранув течение более, чем 5 ч„и не разрушалась. ла "Аквафармака" по изобретению эффекПример 2, Повторяли процедуру, тивно предотвращает утечку антибиотиков описанную в примере 1, с целью сравнения 20 в окружающую среду с достижением горазвысвобождения флюмхина иэ дозирован- до лучших результатов по сравнению с проной формы "Аквафармака" поиэобретению мышленно выпускаемым продуктом А. и оксолиновой кислоты иэ продукта А. Хотя Структура дозированной формы по изобредве испытанные дозированные формы со- тению остается неповрежденной в течение держали различные лекарственные средст- 25 по крайней мере 3,5 ч в морской воде при ва, оба активных агента растворяются в температуре в интервале от 4 C до 18ОС. воде и присутствие одного или обоих этих Зто показывает, что избыток лекарстагентов в окружающей морской воде указы- венного средства удаляется из дозированвало бы на утечку препарата из дозирован- ной формы только через несколько часов ной формы. Гранулы "Аквафармака" 30 после кормления. Таким образом, сводится содержали 0,4 флюмхина. Их размер при- до минимума загрязнение окружающей сремерно равнялся 6 мм, а вес каждой гранулы ды фермы по разведению рыб. составлял, примерно, 0,25 г; Гранулы про-: Необходимоотметить;что,хотягранулы дуктаAcoäåpæàëè0,5 оксолиновой кисло- "Аквафармака" по изобретению и гранулы ты, Их размер равнялся 6 мм, а вес каждой 35 продукта А содержали различные активные гранулы составлял примерно 0,37 г. Исполь- ингредиенты в описанном испытании (соотзовали TG же устройство и процедуру, опи- ветственно, флюмхин и оксолиновую кислосанную в примере 1, и высвобождение ту) оба эти агента являются сходными . активного агента из гранул в окружающую антибиотиками в том смысле, что они предморскую воду определяли при температу- 40 ставляют аналогичные минимальные дозы о о рах 4 С и 18 С, Пробы морской воды обье- . антибиотика, угнетающего рост различных . мом 5 мл отбирали через каждые 30 мин в штаммов бактерий, как это показано в течение 5 ч или до тех пор, пока гранулы не табл,2, разрушались. Пробы воды, отобранные из Пример 3, Поглощение активных химического стакана, содержащего про- 45 материалов иэ дозированной формы по дукт А (оксолиновая кислота), разбавляли изобретению сравнивали с поглощением

1:1, 0,01 н.раствором Na0H. Разбавленные активного материала из продуктов А и В. пробы центрифугировали соскоростью вра- Степень поглощения определяли посредщения 4000 оборотов в 1 мин в течение 5 ством измерения концентрации окситетрамин. Пробы воды из обоих химических ста- 50 циклина в плазме и в мышечной ткани у канов затем центрифугировали при скоро- рыбы, получавшей дозированную форму сти вращения 4000 оборотов в 1 мин в "Аквафармака", содержащую 1,2 мас.%, октечение 5 мин, Концентрацию флюмхина и ситетрациклина, продукт А, содержащий оксолиновой кислоты измеряли посредст- 1 мас, окситетрациклина, и продукт 8, вом высокоэффективной жидкостной хро- 55 содержащий 1,2 мас. окситетрациклина, матографии так же, как в примере 1, Рыбу кормили четыре раза в день дозироПолученные результаты приведены на фиг,6 ванной формой "Аквафармака", продуктом (4 С) и на фиг,7(18 С). А и продуктом В при температуре морской

Фиг,6 и 7 показывают, что утечка актив- воды, равной 5 — 7 С. Пробы крови и образцы ного агента из дозированной формы "Аква- ткани брали в 1, 2, 3, 4, 7, 14, 21 и 50 день.

1812941

1О

Пробы получали и анализировали на содержание окситетрациклина в соответствии со следующими протоколами, Определение концентрации окситетрациклина в мышечной ткани, Измельченную мышечную ткань рыбы (10 мг мышечной ткани или 5 мг печени) трижды гамогенизировали в 0,01 M растворе фосфатного буфера, содержащего 0,1 M раствор двунатриевой соли этилендинитрилтетрауксусной кислоты, рН 4,2. Жир экстрагировали путем добавления смеси гексана и дихлорметана, Белковые остатки осаждали путем добавления твердого хлорида натрия, затем нагревали до 48 С и . быстро охлаждали в морозильной камере.

После центрифугирования экстракт очищали на твердофазной экстракционной колонке С 8 сепоалит (международная аналитическая колонка), Окситетрациклин элюиравали из колонки смесью 5% воды в ацетоне, а затем смесью 10% воды в ацетоне, Ацетон выпаривали с помощью азота.

Остаток разбавляли в подвижной фазе и анализировали посредствам высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием демеклоциклина в качестве внутреннего стандарта для количественно10

20 го определения окситетрациклина.

Определение концентрации окситетра- 30 циклина в плазме.

Образцы плазмы (100-1000 мкл) обрабатывали трифторуксусной кислоты с целью осаждения белков плазмы, После нагрева до 37 С оставшийся раствор концентрировали и анализировали посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии, Результаты определения концентрации окситетрациклина в плазме крови и в мышечной ткани представлены соответствен- 40 но на фиг.4 и 5. Максимальные значения каждого измерения дополнительно приведены в таЦл.3.

Испытания по всасыванию окситетрациклина плазмой и мышечной тканью пока- 45 зывает более высокую степень усвоения и поглощения активного агента из дозированной формы по изобретению no сравнению с испытанными прототипными продуктами.

Пример 4. Проводили исследования 50 по определению концентрации активнога агента в результате скармливания рыбе дозированной формы "Аквафармака" (содержащей флюмхин") и продукта А (содержащего оксолинавую кислоту", Гранулы 55

"Аквафармака", содержащие 0,2% и 0,5% флюмхина, сравнивали с гранулами продукта А, содержащего 0,5% оксалиновой кислоты. 0,2% гранулы "Аквафармака" ежедневно скармливали одной rpynne рыбы в течение

10 дней при норме скармливания, равной

0,86%, в пересчете на вес рыбы. 0 5% гранулы "Аквафармака" давали аналогичным образом при норме скармливания, равной

0,86%, одной группе рыбы в течение 5 дней, а другой группе рыбы в течение 10 дней.

Гранулы прордукта А, содержащие 0,5% оксолиновой кислоты, ежедневно давали еще одной группе рыбы при норме скармливания, равной 0,43%, в течение 8 дней (изготовитель гранул продукта А рекомендует норму скармливания, равную 0,2 — 0,5% в течение 10 дней в соответствии с рекомендациями по использованию). Все гранулы скармливали с помощью автоматического кормораздатчика. Пропускная способность кармораздатчика равнялась 20 — 50 гранулам каждые 1 или 2 мин в течение 8 — 12 ч в день.

На протяжении всего периода скармливания лекарственных гранул аппетит у рыбы был хорошим во всех группах, После окончания лечения рыбу переносили в пустой садок и давали обычный корм, способствующий росту рыбы, Информация о дозиравании суммирована в табл,4, Двенадцать рыб из каждой группы, получавшей гранулы по определенному режиму, вылавливали в конце первого дня скармливания продукта и на 2, 4, 7, 9, 12, 19, 26 и 41 день после начала скармливания продукта, Для каждой группы получали образцы плазмы и ммышечной ткани. Пробы крови (2-10 мл) брали из хвостовой вены, Плазму отделяли центрифугированием крови при скорости вращения 4000 оборотов в

1 мин в течение 10 мин, Образцы плазмы и мышечной ткани (вся печень, вырезка из боковой части рыбы и почка) сразу же замораживали и хранили при температуре—

70 С да выполнения анализа. Для каждой группы рыбы брали все образцы плазмы и четыре образца мышечной ткани са;начениями, близкими к среднему.

Определение концентрации активного агента в плазме, Количество флюмхина или оксолиновой кислоты в плазме рыбы определяли следующим образом. ОБразцы плазмы очищали посредством твердофазнай экстракции.

Колонки Элют TM С2.Бонд обрабатывали метанолом и фосфорной кислотой (1M раствор) до введения 250 мкл плазмы и внутреннего стандарта, Оксолиновая кислота использовалась в качестэе внутреннего стандарта в том случае, когда анализируемым веществом был флюмхин, и наоборот.

После промывки колонок водой и фо".ôîðнай кислотой (1 M раствор) анализируемое вещество и внутре ний стандарт элюирова1812941

40

50 ли 250 мкл смеси ацетонитрила, метанола и

1 М раствора фосфорной кислатй (80;10,10).

Элюаты анализировали посредством высокоэффективной жидкостной хроматографией с использованием колонки, заполненной сополимером полистирола и дивинилбензола (PL PR — S, 5 мкм), и посредствам флюоресцентного обнаружения (излучение 380 нм, возбуждение 262 нм). Подвижная фаза представляла смесь ацетонитрила, тетрагидрофурана и 0,002 М раствора фосфорной кислоты (20;15;65) при объемной скорости потока, равной 0,7 мл/мин, Определение концентрации активного агента в мышечной ткани, Образцы мышечной ткани (10-20 r) измельчали и смешивали со смесью 3 мл МаОН (1 М раствор) и 20 мл ацетона, Добавляли внутренний стандарт так же, как при анализе образцов плазмы. После центрифугирования дважды повтрряли гомогенизацию, Подкисленные собранные надасадочные жидкости экстрагировали хлороформом.

Хлороформ выпаривали да значительного уменьшения объема. Последующая очистка производилась посредством жидкостножидкостной экстракции между хлороформом и кислыми (основными) водными растворами. Раствор хлороформа выпаривали до сухого состояния и сухой остаток растворяли в подвижной фазе. Выполняли высокоэффективную жидкостную хроматографию так же, как в случае анализа образцов плазмы,.

Таким образом, было проанализировано в общей сложности 342 образца плазмы и 134 образца мышечной ткани, Кривые средней концентрации флюмхина или оксо- линовой кислоты в плазме представлены на фиг,8, Кривые средней концентрации флюмхина или оксолиновой кислоты в мышечной . ткани представлены на фиг,9. Кривые, обозначенные "Аквафармака 0,5%", были получены в результате десятидневного курса лечения. Кривые, обозначенные "Аквафармака 0,5%" были получены в результате пятидневного курса лечения.

Данные, приведенные в табл.3 и 4 и на фиг.4, 5, 8 и 9, отражающие широкосмасштабный эксперимент, в ходе которого лекарственные. гранулы получала большая популяция лосося, подтверждают хорошие свойства поглощения активного агента иэ дозированных форм по изобретению. В частности, можно достичь высокой концентрации флюмхина у рыбы при использовании дозированной формы по изобретению уже в первый день медикаментознога лечения.

Степень биологической доступности флюмхина и оксолиновой кислоты из дозированных форм, подвергнутых испытанию, определяется путем рассмотрения участка под кривыми ("АЧС") на фиг, 8 и 9, При сравнении участка под кривой с величинами до5 зы, суммированными в табл.5, становится очевидным, что биологическая доступность активного агента, исходя из результатов, полученных для плазмы, в 3, 5 раза выше для флюмхина в гранулах "Аквафармака" 0,2% l0 по сравнению с аналогичным показателем для оксолиновой кислоты в продукте А, В случае данных, полученных для мышечной ткани, оказывается, что биологическая доступность в 1,4 раза лучше для флюмхина в

15 дозированной форме по настоящему изобретению, чем для оксолиновой кислоты в гранулах продукта А, Пример 5, Дозированную форму

"Лквафармака" по изобретению, содер20 жащую флюмхин в качестве активного лекарственного средства, или продукт А, содержащий оксолиновую кислоту, давали лососю (Salmo Salor) весом 120-500 r. Рыба находилась в баках из стеклоткани (0,5—

25 8 5 мз) с циркулирующей морской водой.

Эту рыбу экспериментально заражали бактерийной взвесью путем интраперитонеального введения 0,1 мл провокационного инокулята, Плотность инокулята заранее определяли с помощью пробных экспериментов с целью достижения числа смертельных случаев в пределах высчитанного критерия.

До контрольного заражения рыбу инестизировали в 30% хлорбутаноле, разбавленном в соотношении 1: l000, После этого рыбе давали лекарственное средство три-раза в день с равными промежутками времени.

Температуру воды измеряли каждый день, На протяжении всего испытания регистрировали аппетит у рыбы и количество мертвой рыбы. Испытуемые группы получали или гранулы "Аквафармака" по изобретению, содержащие флюмхин, или гранулы продукта А, содержащие оксолиновую кислоту. Все смертельные случаи в группах, получавших лекарственное средство, проверяли в отношении характерного заболевания. Причину гибели регистрировали как специфическую или неспецифическую. Результаты экспериментов суммируются ниже.

При выполнении этого эксперимента 1 лосося заражали бактериями Jersinla

ruckerl. Через один день после контрольного заражения бактерийным инокулятом испытуемые группы начинали получать гранулы "Аквафармака" 0,4% или лекарственный корм с продуктами А 0,5% в течение десяти дней. Доза составляла 20 мг лекарст- венного средства (кг веса рыбы в день), Оба лекарственные средства оказывали эффек1812941 тивное действие по подавлению псевдоту- двумя отдельнымидозами. равными 20кг/кг. беркула в случае контрольных доз, равных Таким образом. 50 мг флюмхина (кг веса

10 клетками на 1 мл, Через двадцать дней рыбы представляет приемлемую дозу дпя после начала лечения смертностьсостэвила лечения инфекций, вызванных бактериями

22 в группе, получавшей "Аквафармака" 5 Jersinia гыс1ег1, в частности псевдотуберку0,4% и 30о в группе, получавшей лекарст- ла, венный корм с продуктом А 0,5%. В конт- Представленные результаты показывэрольной группе (не получавшей лечения) ют, что дозированная форма по изобретесмертность составила 48о . Не наблюдалось нию позволяет достичь лучших результатов какого-либо различия в смертности в зависи- 10 по сравнению с промышленно выпускаемости от лекарственных средств до десятого мыми лекарственными кормами для рыб дня проведения медикаментозного лечения, при терапевтическом и профилактическом

В период между десятым и двадцатым днем лечении заболеваний у рыбы, Эти резульпосле начала медикаментозного лечения таты свидетельствуют о более высоком посмертность в группе, получавшей "Аквафэр- 15 т р е б л е н и и д о з и р о в а н н о и ф о р м ы и о мака", была íà 8% ниже. Этот результат по- изобретению в процессе кормления рыбы казывает, что дозированная форма и о более высоком поглощении активного

"Аквафармака" по изобретению способна соединения из дозированной формы по остановить развитие псевдотуберкула на сравнению с промышленно выпускаемыми более ранней стадии болезни, чем лекарст- 20 гранулами. венный корм с продуктом А. Рыбу можно эффективно лечить, давая

При выполнении этого эксперимента 2 ей для заглатывания фармацевтическую домедикэментозное лечение начинали за три зированную форму по изобретению. Эта доднядоконтрольногозаражениябактериями зировэнная форма является особенно

Jersinia ruckeri. Медикаментозное лечение 25 предпочтительной для введения лекарстпродолжалось в общей сложности десять венного средства представителям семейстдней, т.е, в течение трех дней до контроль- ва лососевых. ного заражения инокулятом и в течение се- . Изобретение может осуществляться s ми дней после контрольного заражения. других характерных формах без выхода за

Доза флюйхина ("Аквафармака") 0,4% (и ок- 30 пределы обьема изобретения или его основсопиновой кислоты) лекарственный корм с ных отличительных и ризнаков, продуктом А 0,5 (составляла 20 мг/кг веса рыбы в день. В случае начала медикаментоз- Формула изобретения ного лечения до заражения усвоения гранул было оптимальным. В группе, получавшей 35 1, Дозированная форма для рыбы, содозированную форму по изобретению, стоящая из кормовых компонентов и био- смертность не наблюдалась, à в группе, пол- логически активного вещества, о т л и ч аучавшей продукт А, она составила 15%, ю щ а я с я тем, что кормовые компоненты

Смертность в контрольной группе равня- составляют водонепроницаемый наружный лась 1 "0" 40 слой. образующий по меньшей мере одну

При выполнении этого эксперимента 3 камеру для по меньшей мере частичного запрофилактическое действие дозированных полнения биологическим веществом, приформ "Аквафармакэ" 0,4% и "аквафармака" чем в качестве кормовых компонентов

0,5 сравнивали с аналогичным показате- используют по крайней мере один из ингрелем у Лекарственного корма с продуктом А, 45 диентов животного или растительного просодержащим активный агент в количестве исхождения и/или водный экстракт I

0,5 . Все лекарственные средства начина- . полученный из продукта морского происли давать до контрольного заражения бак- хождения, териями Jerslnia ruckerl. В группе, 2. Форма по п.1, о т и и ч а ю щ а я с я начавшей получать 50 мг флюмхина (кг веса 50 тем, что в качестве ингредиента животнорыбы в виде "Аквафармака" 0,5% за один го происхождения используют рыбную день до контрольного заражения бактерий- муку, ным инокулятом, смертность не наблюда- 3. Форма по п.2, отличающаяся лась. Смертность в контрольной группе тем, что наружный слой дополнительно соравнялась 96%, При соответствующей дозе 55 держит связующее вещество в количестве оксолиновой кислоты (60 мг/кг), получае- 5 — 20 мас, массы слоя, мой рыбой в виде продукта А, смертность 4. Форма по и 3, отличающаяся составила 6%, Оптимальный эффект был тем, что наружный слой содержит связуюдостигнут при введении одной дозы флюм- щее вещество в количестве 10 мэс. массы хина, равной 50 мг/кг, по сравнению с слоя.

1812941

Таблица 1 Гранулы почти полностью подвергались эрозионному разрушению и были очень хрупкими.

Таблица 2

Таблица 3

5, Форма по п1, отличающаяся тем, что камера содержит носитель для биологически активного вещества.

6. Форма по п.5, отличающаяся тем, что носитель представляет собой экс- 5 трудируемую среду, отверждающую при температуре ниже 0 С.

7. Форма по п,5, отличающаяся тем, что носитель представляет собой водную гелеобразующую среду, 181294!

Таблица 4

Таблица 5

1812941

0 5 10 t5 Ю 25 30 36 00 Ж 50 55д

Дас

1812941

Я м

«б

Я

Я

5 т

У

С:3

Q

Дни

5 10 Ю 20 25 30

9й5

И

Е

E а

«,О

Ври

Ыарариакц

Лр дукт

Ы 1,5 2,0 2.5 )0 ),5 ЦО ó Зрения

Оиг.7

1812941

0 Я%

0.5%

ИФ

О,ЯЬ

ОД%

05%

ОЩ

0Щ

Редактор Л. Павлова .

Заказ.1582 Тираж .. Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям-и открытиям при ГКНТ ССС

113035, Москва, Ж-35, Раушская. наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина. 101

5 4 16 си )if щв.а

+Dg fg

Составитель T. Шульгина

Техред М.Моргентал " Корректор g, К)ско