Среда для проращивания пыльцы клевера красного

 

Использование: сельское хозяйство, селекция растений, способы отдаленной гибридизации . Сущность изобретения питательная среда для проращивания пыльцы клевера красного содержит агар-агар, сахарозу парааминобензойную кислоту и бидистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, мас.%: 1,0-2,0; 30,0-35,0, 0,005-0,006, вода остальное. 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л А 01 Н 1/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ

,Ол !

ЬЭ

I Q) ,О

00 (21) 4883880/13 (22) 15.10.90 (46) 23.09.92. Бюл. ¹ 35 (71) Научно-производственное объединение

"Северное Зауралье" (72) Т.П.Липовцына, Н.А. Боме и Т, Н. Бардникова (56) Паушева 3.П. Практикум по цитологии растений, М., Агропромиздат, 1988, с. 213.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции растений и может быть использовано в практической работе при отдаленной гибридизации, Известна питательная среда для определения фертильности пыльцы, представляющая собой 40%-ный раствор сахарозы в смеси с 1%-ным агар-агаром и добавлением в качестве стимулятора 0,008% р-ра борной кислоты.

Однако на известной среде прорастание пыльцевых зерен происходит медленно, т.е. процесс определения жизнеспособности связан с большими затратами времени. Кроме того, низок процент проросших пыльцевых зерен.

Цель изобретения — ускорение прорастания и увеличение количества проросшей пыльцы, Поставленная цель достигается тем. что среда для проращивания пыльцы клевера красного. содержащая сахарозу. агар-агар. стимулятор роста и бидистиллированную воду, согласно изобретению, в качестве стимулятора роста содержит парааминобен„„. Ы„„1762808 А1 (54) СРЕДА ДЛЯ ПРОРАЩИВАНИЯ ПЫЛЬЦЫ КЛЕВЕРА КРАСНОГО (57) Использование: сельское хозяйство, селекция растений, способы отдаленной гибридизации. Сущность изобретения: питательная среда для проращивания пыльцы клевера красного содержит агар-агар, сэхарозу парааминобензойную кислоту и бидистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, мас.%: 1,0-2,0;

30,0-35,0, 0,005-0,006, вода остальное. 4 табл, зойную кислоту, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Агар-агар 1,0 — 2,0

Сахароза 30,0-35.0

Парааминобензойная к-та 0,005 — 0.006

Бидистиллированная вода Остальное

Пример 1. Среду для проращивания клевера красного готовят следующим образом: в 50 мл бидистиллированной воды растворяют 30 г сахарозы, 1 г агар-агара, 50 мг парааминобензойной кислоты и затем доводят объем раствора до 100-мл. Получается среда со следующим соотношением ингредиентов, мас.%: сахароза 30,0 агар-агар 1,0

ПАБК 0.005 бидистиллировнная вода Остальное

В каплю полученной питательной среды наносят пыльцу клевера красного. Покровное стекло переворачивают и накрывают им кольцо камеры Ван-Тигема. Пыльца оказывается внутри влажной камеры. Камеры пе1762808 реносят в термостат, Через каждый час пыльцу просматривают под микроскопом, чтобы установить начало ее прорастания.

Опыт проводился в 3-кратной повторности, 1-й вариант — 253 пыльцевых зерна; 2-й вариант — 364 пыльцевых зерна, 3-й вариант—

213 пыльцевых зерен.

Для получения сравнительных данных по действию опытной и известных сред на прорастание пыльцы были приготовлены еще три смеси А, В, С ингредиентов, мас,,4:

А: сахароза 30,0 агар-агар 1,0 бидистиллированная вода остальное

B:ñàxàðoçà 30,0 агар-агар 1,0 барная кислота 0,008 бидистиллированная вода

С: сахароза агар-агар гиббериллин бидистиллированная вода остальное

Данные по действию опытной среды и известных (А, В, С) сред приведены в табл.

1. остальное

30,0

1,0

0,001

Пример 2, Проращивание пыльцы клевера красного осуществляли на среде, имеющей следующее соотношение компонентов, мас.%: сахароза 33,0 агар-агар 1,5

ПАБК 0,001 бидистиллированная вода остальное в 1-м варианте проращивали 331 пыльцевое зерно; во 2-м варианте проращивали 218 пыльцевых зерен; в 3-м варианте проращивали 291 пыльцевое зерно.

Результаты опыта приведены в табл. 2, П .р: и м е р 3, Проращивание пыльцы клевера красного осуществили на среде, имеющей следующее соотношение ингредиентов, мас. : сахароза 35,0 агар-агар 2,0

ПАБК 0,006 бидистиллированная вода остальное в 1-м варианте проращивали 331 пыльцевое зерно; во 2-м варианте проращивали 264 пыльцевых зерна; в 3-м варианте проращивали 275 пыльцевых зерен, Результаты опыта приведены в табл. 3.

Пример 4. Проращивание пыльцы клевера красного осуществляли на среде, имеющей следующее соотношение ингредиентов, мас. : сахароза 35,0 агар-агар 2,0

5 ПАБК 0,008 бидистиллированная вода остальное

Количество проращиваемых пыльцевых зерен по вариантам: в 1-м варианте проращивали 280 пыльцевых

10 зерен; в 2-м варианте проращивали 269 пыльцевых зерен; в 3-м варианте проращивали 270 пыльцевых зерен.

15 Результаты опыта приведены в таблице

4.

Данные, приведенные в табл, 1 — 4, свидетельствуют о том, что низкая концентрация ПАБК (0,001 мас. ) незначительно

20 стимулирует прорастание пыльцы или находится по показателям на уровне контроля.

Повышение концентрации ПАБК в среде более 0,006 мас. также нецелесообразно, так как это не ведет к дальнейшему улучше25 нию показателей прорастания, Как видно из табл. 1, 3, содержание парааминобензойной кислоты (ПАБК) в среде в количестве 0,005-0,006 мас. позволяет сократить время проращивания пыльцы

30 клевера красного по сравнению с известными средами в 2 — 7 раз, что дает возможность ускорить процесс определения жизнеспособности пыльцы.

Кроме того, увеличивается процесс про35 растания пыльцы с 13,3 $ — в среде В, 55,6 — в среде А до 88,4 B предлагаемой среде, Это дает воэможность максимально сохранить менее жизнеспособные рекомбинантные пыльцевые зерна и расширить спектр

40 доступной генетической изменчивости при отдаленной гибридизации.

Введение в среду нового стимулятора (ПАБК) повышает ее качества, что создает лучшие условия для проращивания и поэво45 ляет получить более достоверные результаты по определению жизнеспособности пыльцы.

Формула изобретения

50 Среда для проращивания пыльцы клевера красного, содержащая сахарозу, агар-агар, стимулятор роста и бидистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения проростания и уве55 личения количества проросшей пыльцы, в качестве стимулятора роста среда содержит парааминобензойную кислоту, при следующем соотношении компонентов, мас. : агар-агар 1,0 — 2,0 сахароза 30,0 — 35,0

1762808 бидистиллированная вода парааминобезнойная кислота остальное

0,005 — 0,006;

Таблица!

Культура II вари- I опытная среда !

1 1.

) )* 111

t а Ь с а

Клевер красный

1 1,5 253 222 87,7

2 1 ° 4 364 328 90,1 среднее 1,5 276 244 88,4

121 43,3 10,7 302 28

159 54,2 10,3 215 86

163 55 6 10 ° 5 209 28

9 ° 2 50 317 263 82 ° 9

12 5,1 318 272 85,5

13,3 5 ° 0 279 242 86,7

2 ° 5 279

3 ° О 293

3 ° О 293

Условные знаки: а — всего пыльцевых зерен;

Ь вЂ” проросвих пыльцевмх зерен; с — процент проросвих пыльцевых зерен;

t " время прорастания пыльцевых зерен.

Т а б л и ц а 2

I ) *):Г -опмтная среда

j (я ) Ь с

Клевер красньй

279 121 43,3 10,7 302 28

293 159 54,2 10 ° 3 215 86

307 210 68 4 !0 5 11О 31

293 163 55,6 10 5 209 28

9,2 5,0 317 263 82,9

12 5,1 318 272 85,5

28,1 4,9 202 191 94,5

13,3 5,0 279 242 86,7

2 8 331 275 832 2 ° 5

2,9 218 181 83,1 3, О

2,7 291 234 80,3 3,5 г,8 28о г3о 82,g 3,о среднее

Условные знаки; а - всего пыльцевых зерен;

Ь вЂ” проросиих пмльцевых зерен; с - процент проросвик пыльцевмх зерен

t — время прорастания пыльцевых зерен

Таблица 3

А (контроль)

) ) ) Культура К варианта ()) с )а (ь (с

Ь с

t a

Клевер

KD0CHVH

317 263 82,9

318 272 85,5

202 1 91 94,5

279 242 86,7

9,2 5,0

12 5,1

28,1 4,9

13,3 5 ° 0

2,5 279

3,0 293

3,5 307

3 ° О 293

Условные знаки всего проросмих зерен

Ь вЂ” проросших пыльцевых зерен; с - процент проросвих пыльцевмх зерен;

t — - время прорастания пыльцевых зерен.

I 1 ) Таблица4

4 вари- IV опытная среда

1 1

) I ) Культура

) -1 с )а )Ь с с а Ь с с а

Клевер красный

1,8 280 235 83,9

2,0 269 221 82,4

1,9 270 224 83,0

1 9 273 227 83 1

5,0 317

S,1 318

4,9 202

5,0 279

2,5 279

3,0 293

3,5 307

3,0 293

Условные знаки:

a - всего пыльцевых зерен;

Ь вЂ” проросших пыльцевых зерен; с — процент проросвих пыльцевых зерен;

t — время прорастания пыльцевмх зерен, Составитель Т.Липовцына

Техред М.Моргентал Корректор И.Шулла

Редактор Н.Козлова

Заказ 3397 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКН С и ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

П о з одственно-издательский комбинат "Патент", г. ужгород, ул.Гагарина, 101 ри в

2

3 среднее

2

3 среднее

1,4 331

1,4 264

1,7 275

1,5 290

2ВВ 87,1

238 90,1

234 85,1

253 87,5

121 43,3

159 54,2

21 0 68,4 !

63 55,6

А (контроль)

121 43,3

159 54,2

210 68,4

163 55,6

В с,)а ) ь

10,7 303 28

10,3 2!5 86 !

0 5 110 31

10,5 209 28

10,7 302 28

10 3 215 86

10,5 110 31

10,5 209 28

9,2

12

28,1

13,3

263 82,9

272 85,5

191 94,5

242 86,7