Способ подготовки препарата лимфатических сосудов к исследованию

 

Изобретение относится к области медицины , а именно к лимфологии. Целью является получение сохранной структуры лимфатических сосудов. При этом лимфатические сосуды инкубируют в среде для выявления холинэстеразы, а среда для заключения дополнительно содержит глицерин в соотношении с желатиной 1:1. Заключение проводят при температуре 60-80°С, а инкубацию в среде проводят при установлении рН 6,0-6.3. Способ позволяет получить качественные препараты лимфатических сосудов.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 6 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОП И САН И Е ИЗО БР ЕТЕ Н ИЯ .

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (2 1) 4665073/14 (22) 23.03.89 (46) 30.04.92. Бюл. N 16 (71) Институт физиологии АН КазССР (72) Н.Ахметбаева и Л.Э.Булекбаева (53) 616-088.8 (088.8) (56) Karhovsky М.l. et al., I. Hlstochem

Cytochem., 1964, 12, 219. (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПРЕПАРАТА

ЛИМФАТИЧЕСКИХ СОСУДОВ К ИССЛЕДОВАНИЮ

Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к гистохимии, и может быть использовано в лабораториях для определения содержания ацетилхолина в тканях.

Целью изобретения является получение препарата с сохранной стенкой лимфатических сосудов.

Способ осуществля ют следующим образом.

Изолированный отрезок лимфатического сосуда помещают в соответствующую рН инкубационную среду и буфер с рН 6,0-6,3, что обеспечивает более активную реакцию на холинэстеразу с субстратом. Далее проводят дегидратацию препарата в спиртах возрастающей концентрации, при этом используют спирты 50, 75, 80, 960, далее ксилол и абсолютный спирт. Эти условия необходимы для сохранения структуры стенки сосуда, близкой к прижизненному.

Абсолютный ацетон исключают из процесса проведения гистохимической реакции, поскольку достаточно использование абсолютного спирта. Из средств заключения

„,5U „„1730553 А1 (57) Изобретение относится к. области медицины, а именно к лимфологии. Целью является получение сохранной структуры лимфатических сосудов. При этом лимфатические сосуды инкубируют в среде для выявления холинэстеразы, а среда для заключения дополнительно содержит глицерин в соотношении с желатиной 1:1. 3аключение проводят при температуре

60-80 С, а инкубацию в среде проводят при установлении рН 6,0-6,3. Способ позволяет получить качественные препараты лимфатических сосудов, препарата выбирают смесь глицерина и желатины в соотношении 1:1 с соблюдением температурного режима в пределах 6080 С. При такой обработке лимфатические сосуды четко дифференцируются от окружающей ткани, Пример 1. Фосфатный буфер с рН

6,0-7,0, проводка через спирты 50, 75, 80, 96 по 10 мин. Абсолютный спирт, абсолютный ацетон, ксилол, как обезвоживающие вещества используют по 1 мин. Анализ препаратов с помощью микроскопа МБИ-2 показал потерю активности холинэстеразы, разрушение структуры стенки лимфатического сосуда, обнаружены отдельные мелкие кусочки сосудистой ткани и определение холинергических нервных структур не представляется возможным.

Пример 2. Использовали фосфатный буфер с рН 6,0-6,3 провода препаратов через спирты 50, 75, 80, 96 в течение 5 мин в абсолютном спирте 2 с, в ксилоле 3 с. Абсолютный ацетон исключен из процесса дегидратации. Заключение препарата производят в смеси глицерина с желатиной

1730553

Составитель Л.Стебаева

Техред М.Моргентал Корректор О.Кравцова

Редактор Н.Горват

Заказ 1509 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 в соотношении 1;1 с учетом температурного режима 60-80 С. Результаты анализа и репаратов под микроскопом МБИ-2 показали наличие холинергических нервных структур в стенке лимфатических сосудов и в целом сохранены структурные элементы стенки сосуда.

Таким образом, предлагаемый способ получить качественные препараты лимфатических сосудов выявляет холинергическую иннервацию в стенке лимфатических сосудов, метод нашел применение в клинической лимфологии.

Формула изобретения

Способ подготовки препарата лимфатических сосудов к исследованию путем фиксации, заключения в среды, содержа5 щие желатин, приготовления срезов с по-. следующей обработкой в инкубационной среде, отличающийсятем,что,сцелью лучшей сохранности структуры сосудов, среда для заключения дополнительно со10 держит глицерин в соотношении с желатиной 1:1, при этом заключение проводят при

60-80 С, а обработку в инкубационной среде проводят при рН 6,0-6,3.