Способ определения реактивности клеток крови к биогенным моноаминам
Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим методам исследования крови. Цель изобретения - упрощение способа и снижение травматичное™. Способ включает забор проб крови и анализ в присутствии моноаминов. Из забранной однократно крови готовят опытную и контрольную пробы клеток крови путем суспензирования их в буферном растворе, вводят в опытную пробу биогенный моноамин, инкубируют обе пробы, добавляют флуоресцентный зонд, регистрируют свечение зонда на микроскопе ЛЮМАМ, а о реактивности клеток крови к биогенным моноаминам судят по разности величины флюоресценции зонда в опытной и контрольной пробах. В качестве флюоресцирующего зонда используют 1-анйлино-нафталино-8-сульфонат.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)ю G 01 N 33/52
",РО Ор .3
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЪСТВУ
1 (21) 4483438/14 (22) 16.09.88 (46) 15.04.92.Бюл. М 14 (71) Институт медицинских проблем Севера
СО AMH СССР(72) В.П.Кондратьева и В,П.Терещенко (53) 614.475 (088.8) (56) Бобров Н.И., Ломов О.П., Тихомиров.
В.П. Физиологогигиенические аспекты акклиматизации человека íà Ceeepe. — Л.: Медицина, 1979, с. 58. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕАКТИВНОСТИ КЛЕТОК К БИОГЕННЫМ МОНОАМИНАМ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим методам исследоИзобретение относится к медицине, в частности к биофизическим методам исследования крови.
Цель изобретения — снижение травматичности при проведении исследования, а также упрощение способа, В гепаринизированный капйлляр дли-: ной 15 см из пальца обследуемого производят забор крови, затем микрокапилляр отстаивают под углом в 45 в течение 30 мин, в результате чего происходит разделение клеток. Взвесь лейкоцитов или зритроцитов суспензируют в калий-фосфатном буфере (0,14 М рН 7,4). К 50 мкл суспензии добавляют 5 мкл адреналина (1 10 6 М) или серотонина (1,25 мкг, 0,0001 мл) и инкубируют в течение 1 ч при 25 С. Это опытная проба.
„„. ЫÄÄ 1727071 А1 вания крови. Цель изобретения — упрощение способа и снижение травматичности.
Способ включает забор проб крови и анализ в присутствии моноаминов. Из забранной однократно крови готовят. опытную и контрольную пробы клеток крови путем суспензирования их в буферном растворе, вводят в опытную пробу биогенный моноамин, инкубируют обе пробы, добавляют флуоресцентный зонд, регистрируют свечение зонда на микроскопе ЛЮМАМ, а о.реактивности клеток крови к биогенным моноаминам судят по разности величины флюоресценции зонда в опытной и контрольной пробах. В качестве флюоресцирующего зонда используют 1-анилино-нафталина-8-сул ьфонат.
B контрольную пробу вместо раствора моноамина добавляют5 мкл растворителя и также.инкубируют. Через 1 ч к пробам добавляют 8,33 мМ флюоресцирующего зонда АН С (1-анилино-нафталино-8-сульфат)
10 мкл и находя изменение флюоресценции зонда в 50 клетках под влиянием моноаминов, которое выражается либо в тушении флюоресценции зонда, либо в стимуляции этого параметра. Для возбуждения флюоресценции пробы подается свет с длиной волны 365 нм, свечение регистрируется при 470 нм на микроскопе
ЛЮМАМ с помощью ФЭУ:, о реактивности клеток к биогенным мойоаминам судят по разности флюоресценции в опытной и контрольной пробах.. Разницей в величине флюоресценции выражается реактивность клетки к моноаминам.
1727071 требуется минимальное количество крови иэ пальца обследуемого, Формула изобретения
Составитель Р. Гуменюк
Редактор Л. Пчолинская Техред ММоргентал Корректор Э. Лончакова
Заказ 1276 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Пример 1. Флюоресценция опытной пробы с адреналином 0,650 мВ, флюоресценция контрольной пробы 0,430 мВ. Разница 0,220 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к адреналину.
Пример 2. Флюоресценция опытной пробы с серотонином 0,880 мВ, флюоресценция контрольной пробы 0,560 мВ. Разница 0,320 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к серотонину, Использование предлагаемого способа оценки реактивности клеток крови к биогенным моноаминам по сравнению с существующими обеспечивает следующие преимущества: исключается введение в организм обследуемого моноаминов, что, важно для исключения побочных нежелательных реакций; для определения реактив.ности клеток к биогенным моноаминам
Способ определения реактивности клеток крови к биогенным моноаминам, включающий забор крови, выделение клеток крови и их анализ в присутствии биогенно10 гомоноамина,отличающийся тем,что, с целью устранения побочных реакций у пациентов и снижения травматичности, забор крови проводят однократно, затем выделенную взвесь лейкоцитов или эритроцитов .15 суспензируют в буферном растворе, вносят биогенный амин в опытную пробу, инкубируют в течение 1 ч при 25ОС, далее добавляют 1-анилино-нафталино-8-сульфонат, а реактивность клеток определяют флуори20 метрически по разнице величины флуоресценции опытной и контрольной проб.

