Способ определения степени зараженности гусениц соснового шелкопряда тахиной drino inconspiqua meig

С", Г СC! 11СК11Х

r, )! 1, л " I ° I I . I е г K и х

Р 1-. и П У В Л И К

<51>с А 01 К 67/00! ОСУДЛРСТ 13Е1П!ã>IÈ КСМИ1ЕТ

Г1г) ИЗОБРЕ1ЕНИЯМ Yi 01КРН11ИЯМ

Г1РИ ГКНТ ССC"

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

СЮ (гд (С) (21) 4693926/13 (22) 10.07.89 (46) 15. 1 О. 91 В юл. (Ф 38 (71) Белорусский научно-исс; дова-ельгкий институт лесного хозяистea (72) И. М. Емельян,B и Г. Г. Гончаренко (53) 632.937,3(088.8! (56) Menl

s m a I I e г m i n e m т п в (Yponomentldae)

Ехрег1епт се 1982 vol. 38. р. 1461-1462. (54) C."ПОСОВ ОПPE ;:Г E, - :"1Я CIE ÃIЕН1Л

ЗАРАЖЕННОСТИ ГУСЕН 4Ц СОСНОВОГО

Ш E .и, К С Г1 P я ..(Д т =. Х11 }-1 О И D Р I N О

INC0NSPIQIJА OLEIC

Изобре-ение относится к лесному хозяйству, а именно к биологическим методам борьбы с вредителями леса.

Цгль1о изобретения является повышение точности определения степени зараженности.

Пример. Весной через 5 — 7 дней после выхода соснового шелкопряда из зимней диапаузы отлавливают гусениц 4-го возраста, вскрывают в лабораторных условиях и отбирают 34 гусеницы с находящимися в них личинками тахины От каждой из 34 зараженных гусениц отбирают по 1 личинке тахин с целью получения взрослых мух и последующего определения их таксономической принадлежности. причем внутри каждой из зараженных гусениц оставляются одна и более личинок паразита. После этого зараженн lх гусе>:Ièö обьедl Hÿют в од Ы 1683610 А1 (57) 4зобретенив относится к лесному хозяйс ву, а именно к биологический защите растен й. Цель — повышение точности определения степени зараженности гусениц вредителя паразитом Степень зараженноcTI:; определяют с помощью электрофореграмм видоспецифичных ферментов гусениц вред, :enÿ и паразита, причем перед приготовление и водного экстракта ферментов гусениц в течение суток выдерживают без карма в опт 4альных гидрофототермическ,x условиях. пособ позволяет повь сить т-оqHQCB определения B 4,3 ра 1 табл ну контрольную группу вместе с 366 гусеницами, не зараженными тахинами (отсутствие личинок проверяют вскрытием), Затем определяют степень зараженности данной контрольной группы тремя способами, известным. предлагаемым и контрольным. В качестве контроля используют данные, полученные после определения видовой принадлежности выведенных из 34 зараженных гусениц взрослых тахин.

Зти данные свидетельствуют о том, что все

34 гусеницы были заражены одним видом тахин — DIino Inconspigna. Для сравнения предлагаемого способа с известным из контрольной группы берут и анализируют две случайные равные выборки по 50 особей B каждой, В предлагаел ол, способе гусениц перед электрофорезом выдержива от в течение -..уток без корма II ри тем герат у;:е 25" C

1 Fj P 6 1 0

Значение и редла гае мы и способ ц сосновг

400 кенных усениц, гусениц от обованных,,4 бка* ичий между по и по критери трех попарны

4

2,77

i

Между 2 и 3

1,45

4.24

Я Г, 1,39! Между 1и2

1,18

Между 1 и 3

0,336 и постоянном освещении. При это-1форменТЫ КОPMОБОГО РаСТeHИЯ, НЭ КО>СРОМ ПИтались личинки вредителя, разрушаются под действием пищеварительного сока личинок, В результате эпектрофорезу подвергаются только ферменты насекомого-вредителя и паразита. Б сравниваемом известном способе гусениц подвергают электрофорезу сразу же после отбора, без выдерживания в течение суток без корма.

Электрофорез осуществляют следующим образом. Гусениц индивидуально гомогенизируют в водном буферном растворе, Полученную водную вытяжку ферментов центрифугируют при 8000 об/мин в течение 15 мин на холоду. Надосадочную жидкость абсорбируют на полоски фильтравальной бумаги, которые затем помещают внутрь вертикальных разрезов в гелевом блоке. К гелевому блоку подключают электрический ток с постоянным напряжением

120 В в течение 16 ч, После окончания электрофореза гел вый олОк разрезают На горизонтальные слои для их г оследующего гистохимического окрашивания и полу ения фореграмм.

Анализ полученной фореграммы показал, «То 45 из 50 гусениц, содержавшихся без корма, имели одну фракцию исследовавшегося фермента, а 5 гусениц кроме упомянутой выше фракции имели еще ОДну. 50 гусениц, питавшихся до электоофореза естественным кормом, имели свою ферментнукз фракцию. У 24 из 50 гусениц, содержавшихся на корме, фракции ферменТоВ кормового растения сливались с фракцией гусеницы и в то же вреl я перекрывагvi то мес1о на фореграмме, где Ожидалось найти фракции паразита. У остальных 26 гусениц фракции ферментов кормового растения были менее интенсивно окрашены

5 и сквозь них у двух гусениц была вид:- а фракция паразита.

В таблице представлены данные, иллюстрирующие точность опрецеления степени зараженности, Из данных видно, что про10 цент зараженных гусениц, определенный по;-звестному способу, в 4,3 раза бо ee достоверно отличается GT контрольных да;— ных. чем результат. полученнь и предлагаемым с "OООом Значение критерия

15 Стьюдента для данных. полученных извес-.-!!ым спосооом, близко пОДхОДит к 1epBOI ожгу дос1оверности ((Овв-1.96), т.с. Поч.:; = g! 7, анализов известный спо об может давать искаженную информацию.

СГ- о р ."=: у л а и з о б р е т е н и я

Способ определения степени зараженное.и гусениц соснового шелкопряда тахи—

25 ной Drino inconspiqua Meig, включающий приготовление водного экстракта ферме:-;— тов из тканей гусениц элсктрофоре:; эк".тракта ферментов в крахмал ь ;ом ге.-,с инк>оирование геля, получение злектроф-.—

ЗО реграммы видоспецифичных ферментов сопосTaeëå!:èå ее со с андартной фор"-. раммой гусениц, зараженных тахинсй, с —: л и а ю шийся тем, что, с целью повышения To !HocTN определения, перед приготов35 пением водного экстракта ферме; Toâ гусениц в течение суток выдерживаю", бе=" корма в Оптимальных Гидрофототерми e— ских условиях.

Г T — — — — — — Е известный

VGHTPOËÜ способ

1 ь ! !