Питательная среда для микроклонального размножения косточковых культур

 

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, к ускоренному размножению посадочного материала косточковых культур, в частности межвидовых и межродовых гибридов черешни и вишни на основе культуры ткани. Целью изобретения является ускорение процесса размножения и увеличение коэффициентаразмножения. Цель достигается тем, что в питательную среду вводят дополнительно индолилмасляную кислоту, а в качестве хеллата железа - смесь железа сернокислого закисного семиводного и трилона Б при следующем соотношении компонентов, мг/л: аммоний азотнокислый 820-830; калий азотнокислый 940-960; кальций хлористый

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 А 01 Н 3/00

ГОСУДАР СТ В Е ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

©1 . НЛ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4684893/13 (22) 27,04,89 (46) 30.09.91. Бюл. N. 36 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт растениеводства им. Н.И,Вавилова (72) M.C.×åáoòàðåâà (53) 581.143.6 (088,8) (56) Свитайло А.М. Размножение (и vitro сортов вишни Метеор и Норд Стар. — "Садоводство", 1986, вып. 34. с. 57 — 58. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ КОСТ04КОВЫХ КУЛЬТУР (57) Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, к ускоренному размножению посадочного материала косточковых культур, в частности межвидовых и межродовых гибридов черешни и вишни на основе культуры ткани, Целью изобретения является ускорение процесса размножения и увеличение коэффициента. размножения. Цель достигается тем, что в питательную среду вводят дополнительно индолилмасляную кислоту, а в качестве хеллата железа — смесь железа сернокислого

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, к ускоренному размножению посадочного материала косточковых культур, в частности межвидовых и межродовых гибридов черешни и вишни на основе культуры ткани.

Целью изобретения является ускорение процесса размножения и увеличение коэффициента размножения.

Пример. Растворяют в бидистиллированной воде последовательно все компоненты питательной среды, после чего, 5U, 168GG21 А1 закисного семиводного и трилона Б при следующем соотношении компонентов, мг/л: аммоний азотнокислый 820-830; калий азотнокислый 940-960; кальций хлористый (2-водный) 210-230; магний сернокислый (7водный) 180-190; калий фосфорнокислый однозамещенный 83-87.; борная кислота

3,0-3,2; марганец сернокислый (4-водный)

11,0-11,3; цинк сернокислый (7-водный) 4,1-4,4: калий йодистый 0,41 — 0,42; натрий молибденовокислый (2-водный) 0.12-0.13: медь сернокислая (5-водная) 0,012-0,013; кооальт хлористый (6-водный) 0,012-0,013; железо сернокислое закисное (7-водное)

13,7-14,0:трилон Б 18,0 — 19,0; 6-бензиламинопурин 0,5-0,6; индолилмасляная кислота

0,001 †„002; мезоинозит 50-.60; никотиновая кислота 0,5 — 0,6; глицин 2,0-2,1; тиамин

0„5-0,6; пиридоксин 0,5-0,6; сахароза

25000-30000; агар 6000-7000; вода бидистиллированная до 1 л, Микроразмножение на питательной среде позволяет сократить сроки получения посадочного материала эа счет ускорения процесса и увеличения коэффициента размножения в 3 раза и повысить эффективность дифференциации апексов независимо от генотипа, 2 табл, проводят автоклавирование ее при 0,8 — 1,0 атм в течение 20-30 мин. Различные концентрации компонентов питательной среды представлены в табл.1, На указанные варианты питательной среды высаживают апексы косточковых культур: гибриды вишни и черешни Cerasus

avlum i Cerasus заспаПпепз!з "Dr. Edwin

Muller", Cerasus sarrklata "Hally Tolfvetta" x

Cerasus avlum, Сегарабиз Еэ х Cerasus

vulgarls, сорта вишни Апухтинская и вида

1680021 вишни Cerasus lanneslana М 2, Cerapadus

Гз x Cerapadus Fz, Культуральные сосуды помещают в камеру для культивирования. Условия культивирования: температура 26 — 27 С, 5 длительность светового периода 16 ч, освещенность 6000 лк, влажность 70 . Сравнение скорости и коэффициента микроразмножения проводят t . известной средой следующего состава, мгlл, 10

Аммоний азотнокислый 825

Калий азотнокислый 950

Кальций хлористый двухводный 220

Магний сернокислый семиводный 185

Калий фосфорнокислый 15 однозамещенный 85

Барная кислота 6,2

Марганец сернокислый четырехводный 22,3

Цинк сернокислый семиводный 8,6 20

Калий йодистый 0,83

Натрий молибденовокислый двухводный 0.25

Медь сернокислая пятиводная 0,025

Кобальт хлористый шестиводный 0,025 25

Хеллат железа 5,6

Никотиновая кислота О;5

Тиамин 0,4

Пиридоксин 0,1

Мезоинозит 100,0 30

Глицин 2,0

Гибберелловая кислота 0,1

Флорогл юцин 16,2

6-БАП 1,0

Сахароза 30000 35

Агар 5000

Вода бидистиллированная Остальное до 1 л

Через 2 нед, каждый зксплантат дифференцирует несколько нормальных побегов, 40 наиболее крупные из которых длиной более

10 мм высаживают для укоренения, а длиной 3 — 10 мм пассируют на среду укаэанного состава для дальнейшего размножения.

Сравнительные результаты испытания из- 45 вестной и предложенной сред представлены в табл.2, Из табл.2 следует, что питательная среда предлагаемого состава обеспечивает значительное по сравнению с известной 50 средой сокращение сроков размножения до

12-14 дней вместо 90 дней и увеличение коэффициента размножения до 1:29-32, а также повышение эффективности выхода стандартных черенков до 20-22 шт. для эта- 55 па укоренения, Предусматривается также возможность дальнейшего размножения нестандартных побегов (19-23 шт.) и 10070 дифференциации апексов независимо от генотипа.

Использование предлагаемой питательной среды позволяет сократить сроки размножения побегов, повысить эффективность выхода стандартных черенков и процента дифференциации апексов независимо от генотипа, а также увеличить общую производительность процесса ет высадки апексов и побегов на питательную среду до укоренения и высадки в грунт растений.

Формула изобретения

Питательная среда для микроклонального размножения косточковых культур, содержащая азотнокислый аммоний, азотнокислый калий, хлористый двухводный кальций, сернокислый семиводный магний, фосфорнокислый однозамещенный калий, барную кислоту, сернокислый четырехводный марганец, сернокислый семиводный цинк, йодистый калий, молибденовокислый двухводный натрий, сернокислую пятиводную медь, хлористый шестиводный кобальт, хеллат железа, 6бензиламинопурин, мезоинозит, никотиновую кислоту, глицин, тиамин, пиридоксин. сахарозу, агар и воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения процесса размножения и увеличения коэффициента размножения, питательная среда дополнительно содержит индолилмасляную кислоту, а в качестве хеллата железа — смесь сернокислого закисного семиводного железа и трилона Б при следующем соотношении компонентов, мг/n: азотнокислый аммоний 820 — 830; азотнокислый калий 940—

960; хлористый двухводный кальций 210—

230; сернокислый семиводный магний

180-190; фосфорнокислый однозамещенный калий 83 — 87, борная кислота 3,0 — 3,2; сернокислый четырехводный марганец

11,0-11,3; сернокислый семиводный цинк

4,1 — 4,4; йодистый калий 0,41 — 0,42; молибденовокислый двухводный натрий 0,12-0,13; сернокислая пятиводная медь 0,012-0,013; хлористый шестиводный кобальт 0,0120,013; сернокислое закисное семиводное железо 13,7 — 14,0; трилон Б 18 — 19; 6-бензиламинопурин 0,5-0,6; индолилмасляная кислота 0,001-0,002; мезионозит 50-60; никотиновая кислота 0,5-0,6; глицин 2,0-2,1; тиамин 0,5-0,6; пиридоксин 0,5-0.6; сахароза 25000-30000; агар 6000 — 7000; бидистиллированная вода до 1 л.

1680021

Таблица 1

Варианты питательной среды по концентрации компонентов

Содержание компонентов в среде, мг/л среды, вариант

Компоненты

Аммоннй азотнокислый

815

820

825

830

835

Калий азотнокислый

930

940

960

950

970

Кальций клористый двухводный

205

210

230

235

220

Магний сернокислый, семиводный

17О

180

185

190

195

Калий фосфорнокислый однозамеценный

87

85

3,5

2,8

Борная кнслбта

3,0

3,1

3 2

Марганец сернокисльй четырехводный

10,8

11,15 11,3

12,0

11,0

Цинк сер нокнслый семиводньй

3,9

4,1

4,3 4,4

0,415 0,42

4,9

0,43

Калий йодистый

0,4

0,41

Натрий молибденовокислый двухводный

0,115

0,125 О, 130

О, 120

Медь сернокислая пятиводная.

О ° 0115 Оэ0120 Оэ0125 010130

0,0115 0,0120 0,0125 0,0130

Кобальт хлористый шестиводный

Железо сернокислое закисное семиводное

Трилон Б

6-БАП

7500

6500 7000

6000

5000

Вода.бидистиллированная > до1л

Мезоинозит

Никотиновая кислота

Глицин

Тиамин

Пиридоксин

Сахароза

13,5

17,9

0,4

0,0005

40,0

0,4

1,5

0,4

0,4

20000

13,7

18,0

0,5

0,001

50 О

0,5

2,0

0,5

0 5

25000

13,9

18,6

0,55

0,0015

55,0

0,55

2,05

0,55

0,55

:27000

14,0

19,0

0,6

0,002

60,0

0,6

2,1

0,6

0,6

30000

0,135

О, 0135

О, 0135

14,0

19,9

097

0,0025

70,0

0,7

2,5

017

0,7

35000

1680021

Таблица 2

Влияние состава среды на коэффициент размнокения и время получения побегов

Предлагаемая среда (варианты по табл. t) Известная среда

Показатель

1 32

Коэффициент раэинокения

1:27

1 ° 27

1:32

1!29

82+0,4

17,9+0,5

94,7+0,3

98э4+Ов5

98,2+0,6 83+9,7

21+0, 8

14, 1+0,8

Длина побегов> мм

15,3+0,4

25+0,4

31, 1+0,6

8,4+0,3

8) 2+0) 4 9+О, 3 10, 1+0,3

3,2+0,3

9,1+0,3

10 1+0 5 на. укорене ние

19э 7+0ý 4 221 9+0 э 6

19, 8+0,5

5э2+ОэЗ на размнокение

1,9+„б2.

23 ° 4+0,2

10 ° 3+014 19э7+0å3

10 2+0 ° 8

19,6 0 ° 2

Редактор Н. Швыдкая

Заказ 3249 Тираж 351 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Процент апексов дакицих дополнительные побеги,Х

Срок дифференциации побегов, дней 90 5+0 8

Высадка побегов щт,: на доращнвание

11, 1+0,8 12, г+О, 7 21,2+0,7

33,3+0,3 31,2+О ° 3 1+0 ° 3

Составитель С. Куваева

Техред М.Моргентал Корректор Э. Лончакова