Способ подготовки биологической ткани к электронно- микроскопическому исследованию
Изобретение относится к медицине , а именно к методам морфологического исследования Целью является усиление контраста клеток и неклеточных структур ткани, особенно мембран. Цель достигается тем, что ткань после фиксации и обезвоживания перед заливкой и полимеризацией в эпоксидной смоле дополнительно выдерживают в прогретой смоле при 40-50°С в течение 5-10 мин. Далее температура смолы понижается до 20-25°С. В этой смоле ткань выдерживают до 30-60 мин., Затем проводят полимеризацию смолы при 60°С. Способ позволяет получить высокий контраст клеток.
союз совктсних
ЩСПжЛИН
А1
„.Я0„„1642301
Р1) G Ol N 1/28 госудюствкнн1 1й номиткт пО изОБРетениям и О 1нРытиям
os Гннт сссР
Г
СПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМ У СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4453366/14 (22) 01 ° 07»88 (46) 15,04,91, Бюл. ¹ 14 (71) 1 и Ленинградский медицинский институт им» акад :И,П»Павлова (72).Н,Д,Бармина, Л,N Григорьев и А И,Неворотин (53) 616 0.89 » 9(088 8) (56) Бирюзова В»И» и др» Электронномикроскопические методы исследова. ния биологических объектов 1963, АН. ° .1» (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ
ТКАНИ К ЭЛЕКТРОННО МИКРОСКОПИЧЕСКОМУ
ИССЛЕДОВАНИЮ
Изобретение относится к медицине, а именно к методам морфологических исследований.
Целью является усиление контраста мембран при определении клеточного состава, Способ осуществляют следующим образом
Биоптат ткани фиксируют в 1-2%ном растворе осмиевой кислоты, далее выдерживают в. насыщенном растворе ура» нил»ацетата» Затем ткань обез воживают в спиртах возрастающей концентрации до абсолютного спирта, После ткань заключают в эпоксидную смолу, прогре тую до 40»50! C и выдерживают в ней
5»10 мин» Далее ткань либо переносят в смоЛу, температура которой равна
20 25 С или понижают температуру той же порции смолы, При этой температуре ткань выдерживают в течение 30-. г (57) Изобретение относится к медицине, а имен но к метод ам морфоло гиче ского исследования Целью является усиление контраста клеток и неклеточных структур ткани, особенно мембран, Цель достигается тем, что ткань после фиксации и обезвоживания перед заливкой и полимеризацией в эпоксид» ной смоле дополнительно выдерживают в прогретой смоле при 40-50 С в течение 5-10 мин, Далее температура смолы понижается до 20-250С В этой смоле ткань выдерживают до 30 60 мин, Затем проводят полимеризацию смолы при 60 С, Способ позволяет получить высокий контраст клеток, !
60 мин После ткань полимеризуют при о
60 С. Готовят срезы, которые исследуют под микроскопом. При выявлении кпеток они четко видны, значительно усилен контраст мембраны, Пример 1 ° Биоптат гипофиза фиксируют в 1%-ном растворе осмиевой кислоты» Далее контрастируют уранил» ацетатом и заливают в эпоксидную смолу того же состава, нагретую в течение 60 с до 40 С, выдерживают в ней
10 мин, затем переносят в смолу того же состава с температурой 25 С на
30.мин, после чего переносят в тер мостат с температурой 60 С, в котором полимеризуют B результате вы сокий контраст изображения плазмати» ческой, гранулярной и остальных внут-„ риклеточных мембран при минимальном фоне Поэтому все структуры выглядят более четкими
1б42301 в э по ксидные смолы и поли мериз ации э отличающийся тем, что, с целью усиления контраста мембран
5 при определении клеточного состава, ткань перед полимеризацией выдержи вают в эпоксидной смоле при 40-50 С в течение 5 IO мин, далее температуру смолы понижают до 20-25 С и вы держивают в ней дополнительно 30
60 мин, I
Способ позволяет получить качественные электронно-микроскопические снимки с высоким контрастом клеток и неклеточных структур»
Формула и з о б р е т е н и н
Способ подготовки биологической ткани к электронномикроснопическому исследованию путем фиксации, обработки солями тяжелых металлов, заливки
Составитель:Л, Стебаева
Техред М, дидык Корректор Л.Патай
Редактор:М,Самерханова
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101,Заказ 1432 Тираж 39 7 Подпи сно е
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5
