Способ посмертной диагностики висцерального кандидамикоза животных

 

Изобретение относится к ветеринарии. а именно к ветеринарной микологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике висцерального кандидамикоза сельскохозяйственных животных и птиц при поражении органов пищеварения. Целью изобретения является повышение точности способа диагностики. Способ включает культурально-микологические исследования смыва с поверхности желудочно-кишечного тракта, при этом дополнительно готовят гомогенизат из ткани желудочно-кишечного тракта, делают посевы и определяют произведение количества клеток в гомогенизате на интенсивность проникновения их с поверхности слизистой в глубьлежащие слои, а при числе 1,42Х 0Ь и более диагностируют висцеральный кандидамикоз. Способ позволяет сократить время диагностики до 24-48 ч и повысить ее точность (ошибка не превышает 5%) 2 та б л SS (Л

СО)ОЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1629037 А 1 ()9) (И) (51) 5 А 61 В 10 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К Д BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТЬУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4063826/15 (22) 30.04.86 (46) 23.02.9 . Бюл. № 7 (71) Донской сельскохозяйственный институт (72) Е. В. Себряков (53) 616.07 (088.8) (56) Курасова В. В., Констин В. В., Малиновская Л. С. Методы исследования в ветеринарной микологии. М.: Колос, 1971, с. 93.

Себряков Е. В., Воронянский В. П. Лaáoраторчая диагностика висцерального кандида микоза сельскохозяйственных животных и птиц.— Информационный листок, Ростовс ки и ЦНТ И И, 1985. (54) СПОСОБ ПОСМЕРТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИСЦЕРАЛЬНОГО КАНДИДАМИКОЗА ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к ветеринарии, Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарной микологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике висцерального кандидамикоза сельскохозяйственных животных и птиц при поражении органов пищеварения.

Цель изобретения — — повышение точности способа диагностики.

Пример 1. Исследовали трупы шести павших индюшат в 10 — 15-дневном возрасте.

Для исследования на кандидамикоз зоб каждого индюшонка освободили от содержимого, остаток которого осторожно смыли стерильной водой, профламбированными ножницами вырезали лоскут зоба величиной

1 см и произвели посев смыва и гомогенизата из этого участка зоба на агар Сабуро в чашки Петри. Ча|пки маркировали: чашка

¹ 1 — посев неразведенного смыва, чашка

2 а именно к ветеринарной микологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике висцерального кандидамикоза сельскохозяйственных животных и птиц при поражении органов пищеварения. Целью изобретения является повышение точности способа диагностики. Способ включает культурально-микологические исследования смыва с поверхности желудочно-кишечного тракта, при этом дополнительно готовят гомогенизат из ткани желудочно-кишечного тракта, делают посевы и определяют произведение количества клеток в гомогенизате на интенсивность проникновения их с поверхности слизистой в глубьлежащие слои, а при числе

1,42)(10 и более диагностируют висцеральный кандидамикоз. Способ позволяет сократить время диагностики до 24 — 48 ч и повысить ее точность (ошибка не превышает 5 ? „ ) .

2 табл. № 2 — посев смыва после разведения физраствора 1:10, чашка № 3 — посев неразведенного гомогенизата. чашка № 4 — посев гомогенизата после его разведения физраствором 1:10. Чашки с посевами инкубировали в термостате при 37 С. Через 24 ч произвели выборочную микроскопию выросших колоний гриба и их идентификацию. Из смыва и гомогенизата был выделен гриб Candida

albicans. Через 48 ч посчитали количество колоний во всех чашках и определи.пи количество клеток в смыве с 1 см и в гомогенизате из этого же участка зоба. Результаты приведены в табл. 1.

Подсчет производили следующим образом. При посеве неразведенного смыва или гомогенизата количество колоний умножили на 100, а при посеве их посче разведения

1629037

10 дифференциальное=индекс К количество клечисло инвазантности ток гриба в 1.àмогенизате из 1 см= исследуемого o-.>— гана

Формула изобретения

55 физиологическим раствором 1:10 умножили на 1000. Затем определили индекс инвазивности и микотическое число.

Интенсивность проникновения (индекс инвазивности) характеризует проникновение клеток гриба с поверхности слизистой в глубьлежашие ткани пораженного органа и определяется как отношение клеток гриба, ;.ебнаруженных в гомогенизате, к количеству клеток в смыве с: поверхности слизи этой оболочки.

Установлено, что при дифференциальном числе менее 0,61 10 результаты исследования на кандидамикоз надо оценивать как отрицательные, а обнаружение грибов рода

Candida расценивать как кандиданосительство, при дифференциальном числе от 0,61>(;>(10 до 1,41.10 результаты исследования оценивают как сомнительные, а при дифференциальном числе 1,42>(10 и более — как положительные, свидетельствуюшие, что основной причиной гибели животного является висцеральный кандидамикоз.

Таким образом, из шести павших индюшат при исследовании патматериала из зоба микотическое число у пяти из них было значительно больше 1,42;(10, что свидетельствует о заболевании кандидамикозом. Эти данные подтверждены при проведении патолого-гистологического исследования материала из зоба от этих же индюшат с применением специальных методов окраски гистосрезов по методике Гочкис-Мак-Мануса в модификации Курасовой.

Пример 2. Исследовали материал от пяти павших поросят возраста от 6 до 15 дней на кандидамикоз. Отход поросят на неблагополучной ферме составлял 30 — 35О от числа родившихся, применение антибиотиков широкого спектра действия не оказывало положительного эффекта. Учитывая то, что наиболее выраженные патологические изменения были обнаружены на слизистой фундальной и пилорической частях желудка, для исследования желудки всех павших поросят освободили от содержимого, остатки которого осторожно смывали холодной прокипяченной водой. Из каждого желудка в местах обнаружения патологических изменений вырезали лоскут величиной в 1 см и делали посев смыва и гомогенизата с этого участка желудка на агар Сабуро по описанному способу. Через 24 ч проводили иден20

40 количество клеток гр> ба з гомогеии: а iå из 1 см-

Индекс инвазивности количество клеток гриба в смыве из 1 см

Затем определяют произведение количества клеток гоиба в го.,<>-езч"-.aò< <з . см

\ исследуемого органа и;;:;,.т;.:,с:. в...,, проникновения в глубьл: >1<.::..»ие ело!1;,,:;фференциальное число). что я = : ется об.-,ективнblм критерием ди1,фа ренин а ции ка и; и— дамикоза от кандиданоси;сл-с-ва. тификацию выделенной куль-:у >ы и:кзс1итывали количество колоний г;>ибз Сar!dida

tropica1is. Результаты приведены в .абл. 2.

Подсчет проводили 1и) ир!11<еру 1. Г ри кчльтурально- микологи:!iiêî и !соле.1ог;а ни и патматериала из желч a ;na«I;";.è пивших

ПОРОСЯТ В ЧЕТЫРЕХ СЛУИг».; или<к<И IÄC OЕ число было более 1,42 >(! 0". Полу -;енн 1е данные свидетельству!от о том. -!то основной причиной заболевания и и! бели поросят Iia ферме являлся висцерг, >1и..1й! 1<111!лилa .""ê<>:; с поражением желудочно-1<-гисчги>го тргкта, что было впоследствии подтверждено при окраске гистосрезов ио:::е годике ГочкисМак-Мануса в модификации Курасовой по методу Грам-Вейгерта в модификации Боголепова.

Предлагаемый способ озвол ет: .: ãтить время диагности I! до 24 — -48 ч:. повысить точность (ошибка не ир Bbltllaåi 5 ",,, Р= — 0,05) и дифференцировать висце:„=..T: кандида м и к о 3 ж е л ч д о ч 11 о - 1< и 1.11 е ч H o 1 о . p a 1< T B у молодняка птиц, телят, поросят от каидиданосительства

Способ посмертной диагHocTHIои ийся тем, что, с целью повышения точности способа и дифференциации кандидамикоза, доиолнитсльно готовят гомогенизат из желудочно- кишечного тракта и проводят посев на агар Сanvpo, после чего определяют произведение количества клеток в гомогеиизате на интенсивность проникновения их с поверхности слизистой в глубьлежа1цие слои и при числе

1,42;>(106 и более диагностиру1от висцеральный кандидамикоз.

1629087

Та блица 1

P езультаты пат ол or огис тол огич еског о нов

Диффер енциальное число

Количество клеток гриба с 1 сМ2

Обра— зец в смыве с в гомогеповерхнос- низате ти

П ол ожит ел ьный

Отрицательный

Положительный

Таблица 2

ДифференОбразец

Количество клеток гриба с 1 см желудка

Результат патологогистологического исциальное число с поверхности смыва в гомогенизате

Пол ожит ел ьный и

Отрицат ельный

Положительный

Составитель М. Белоусов

Редактор А. Козориз Техред А. Кравчук Корректор Л. Патай

Заказ 396 Тираж 433 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

2

4

1

3

17х10з

40 х10з

240 х10з

6х10з

26 х10з

42 х10з

12 бк10з

7, 7х10з

16, Ох 10

16,0х10

20,7Х10з

248 õ10

562 х10з

1 300 1с1 Оз

4S х10з

250 х10з

550 х10з

176,9х10з

108, 0x10

87 к 10

161х 10

216 х10з

Индекс инвазив— ности

14,0

14,0

5,4

8,3

9,6

13,0

Индекс инвазивности

14

14

5,4

10,0

10,4

3,47х10

7,86 х10

7, 02 х10

0,39 х10

2,40х10

7,37 х10

2,47х10

1, 51х 106

0,46х106

1,60 х10

2,24ê10 следования на кандидамикоз при специальных методах окраски гистосрезов следования на кандидамикоз при специальных методах окраски гистосрезов