Способ выявления миелинизированных нервных волокон на гистологическом препарате
Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Целью является полное выявление миелиновых волокон. Это достигается тем, что фиксацию проводят в течение 0,5-16 ч в 0,2%-ном растворе четырехокиси осмия. Далее срезы контрастируют в 0,1%-ном растворе гематоксилина. Миелиновые волокна имеют четкую структуру, окрашены в черный цвет, хорошо дифференцируются на светлом серо-коричневом фоне.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУЬЛИН
Р1)5 Г 01 N 1/28
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО HBGBPETEHHRM И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4423594/30-14 (22) 11.05.88 (46) 23.06.90, Бюл. Ф 23 (1) Киевский медицинский институт им. акад. А.А.Богомольца (72) А.Н.Грабовой (53) 616-0.89.9(088.8) (56) Ромейс Б. Микроскопическая техника. 1953, с,438-439.
Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии.
Цель изобретения — полное выявление миелиновых волокон.
Способ осуществляют следующим образом.
Из нефиксироваыных кусочков тканей изготавливают гистологические срезы толщиной 10-50 мкм с помощью криостата или замораживающего микротома. Срезы помещают в 0,2%.-ный раствор четырехоксиси осмия, приготовленный на О, 1%-ном растворе натрия хлорида, на 0,5-16 ч. Извлеченные из фиксирующего раствора срезы споласкивают в трех порциях дистиллированной воды и помещают в 0,1%-ный раствор гематоксилина (свежеприготовленного) на 0 5-6 ч ° При потемнении раствора гематоксилина его заменяют свежим.
После извлечения срезов из раствора
2 (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ИИЕЛИНИЗИРОВАННЫХ НЕРВНЫХ, ВОЛОКОН НА ГИСТОЛОГИЧЕCK0N ПРЕПАРАТЕ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Целью является полное выявление миелиновых волокон. Это достигается тем, что фикфиксацию проводят в течение 0,5
16 ч в 0,2%-ном растворе четырехокиси осмия. Далее срезы контрастируют в О, 1%-ном растворе гематоксилина.
Миелиновые волокна имеют четкую структуру, окрашены в черный цвет, хорошо дифференцируются на светлом серокоричневом фоне. красителя их споласкивают в 2-3 порциях дистиллированной воды и проводят дифференцировку окраски. по Палю.
Степень дифференцировки контролируют под микроскопом, а в случае ее недостаточности процедуру повторяют.
Срезы обезвоживают в спиртах восходящей концентрации, проводят через ксилол и заключают в бальз »1 ° Результат — миелинизированные нервные волокна окрашивают в интенсивно-черный цвет, фон светло-серо-коричневый.
Окраска обусловлена образованием лака, о чем свидетельствует то, что красящие вещества не удаляются из срезов этанолом, ацетоном, ксилолом.
Возможно докрашивание препаратов кармином или сафранином, что облегчает изучение взаимоотношения миелиновых нервных проводников и других тканевых структур.
1573386
П р и и е р 1. Биоптат кожи (регенерат) фиксируют в течение 8 ч.
Далее приготавливают гистологические срезы кожи, которые контрастировали в 0,1%-ном растворе гематоксилина в течение 4 ч. имеют четкий черный цвет на серо-коричневом фоне.
Способ позволяет более четко окрасить структуру миелиновых нервных волокон. Позволяет их выявить более полно в исследуемой ткани.
Формула и э о б р е т е н и я
Составитель Л.Стебаева
Редактор С.Патрушева Техред Л.Сердюкова Корректор М.Максимишинец
Заказ 1639 Тираж 495 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðoä, ул. Гагарина,101
При микроскопии видны черные миI елинизированные нервные волокна на 10 фоне слабо-серо-коричневого фона. В миелиновых оболочках хорошо различимы узловые перехваты и насечки миелина, которые на поперечных срезах имеют вид колец или овалов, окружающих неокрашенные осевые цилиндры.
П и м е р 2. Биоптат продолговатого мозга фиксируют в течение 14 ч.
Далее приготавливают гистологические срезы, которые контрастируют в О, 1%" р0 ном растворе гематоксилина в течение
6 ч. При микроскопии выявлены все миелиновые нервные волокна, которые
Способ выявления миелинизированных нервных волокон на гистологическом препарате путем фиксации в растворе четырехокиси осмия с последующим контрастированием и просмотром под микроскопом, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью полного выявления миелиновых волокон, фиксацию проводят в течение 0,5-16,0 ч, при этом в качестве фиксатора используют 0,2%-ный раствор четырехокиси осмия, а контрастирование проводят в О, 1 -ном растворе гематоксилина.

