Способ подготовки препарата изолированных синаптонемных комплексов для электронно-микроскопических исследований

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к области медицины, а именно к цитогенетике. Целью является получение чистых фракций синаптонимных комплексов ДНП. Цель достигается тем, что до нанесения комплекса на сеточки проводят электрофоретическое разделение суспензии комплексов в агарозном геле. А нанесение комплекса на электронно-микроскопические сеточки проводят путем помещения на пути продвижения комплекса сеточек. Комплекс наползает на сеточки. После их окраски ФВК они имеют вид чистых нитей ДНП.

СОКИ СОВЕТСКИХ

РЕСПУБЛИН (1) 5 С . 01 Н 1! 28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ CHHT СССР

ОПИСАНИЕ 8306PETEHNH»> :" .""

К A ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4352337/28-14 (22) 28.12.87 (46) 30.04.90. Бюл, Р 16 (71) Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова АН .СССР (72) О.И. Карпова и Ю.Ф. Богданов (53) 616-0.89.9 (088.8). (56) Dietrich А.I.I. А sequential

analysis of the development of the

synaptoneCaI complex in spermatocytes of the mouse by electron miегоscopy . using hydroxy urea and agar

filtration. вЂ” Genetica, 1983, V. 61, р. 119. (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПРЕПАРАТА ИЗО-:

ЛИРОВАННЫХ СИНАПТОНЕМНЫХ КОМПЛЕКСОВ

Изобретение относится к медицине, а именно к цитогенетике.

Цель изобретения .---получение комплексов, свободных от хроматина.

Способ осуществляют следующим образом.

Для исследования берут препараты комплексов, изолированные под действием ДНКазы из ядер сперматоцитов, находящихся на стадии зиготены-пахитены.

Образец комплекса подвергали электрофоретическому разделению в 0,4Х гори..зонтальном агарозном геле, приготовленном на 0,04М трис-ацетатного буфера, рН 8,3, и 0,001М ЭДТА-Иа,.

Гель заливают на стеклянную пластинку с прижатой к ней рамкой . После полимеризации рамку снимают. В лунку размером 5"2,5 "5 мм вносят 50 мкл образца в растворе 1,5 M сахарозы, 0,01 М трис-HCl, 0,001М ЭДТА-Na<

„.Я0„„1561019 А 1

ДЛЯ ЭЛЕКТРОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к цитогенетике.

Целью является получение чистых фракций синаптонемных комплексов ДНП.

Цель достигается тем, что до нанесе" ния комплекса на сеточки проводят электрофоретическое разделение суспензии комплексов в агарозном геле. А нанесение комплекса на электронномикроскопические сеточки проводят путем помещения на пути продвижения. комплекса сеточек. Комплекс наползает на сеточки. После их окраски ФВК они имеют вид чистых нитей ДНП.

Гель помещают в стандартную камеру для а проведения горизонтального электрофореза. Буфер заливают таким образом, Эаив чтобы он бып вровень с гелем. Этим достигается более полное вхождение комплекса, имеющего значительный мо- >ад лекулярньй вес. ДНП-электрофорез проводят в буфере такого же состава, как и агарозный гель, при постоянном напряжении 1403, при котором ток ра вен 1 05-i20 мА. Препарат комплексa как и свободная ДНК, двигается к аноду. Электрофоретическое разделение проводят 30-40 мин. Далее прибор отключают от источника питания постоянного тока. Берут необходимое количество медных сето- ек, покрытых пленкой, сеточки помещают в гель под углом 85-90 к движению комплеко са любой стороной на расстоянии

3 мм друг к другу начиняя с 2 до

15Ы 019

Составитель Л. Стебаева

Техред Л. Олийнык Корректор С„ Шевкун

Редактор Л. Пчолинская

Тираж 493

Подписное

Заказ 975

ВНИ1ПП1 Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, .осква, Ж-35„ Раушская наб., д 4/5

Производственно--издательс кий комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

15 мм от старта. Снова подают на гель напряжение 140 В в течение 5 мин.

Сеточки вынимают пинцетом, фиксируют в капле 47. вЂ но формалина в

0,5 И сахарозы,, промывают водой, окрашивают IX-ным спиртовым раствором фосфорновольфрамовой кислоты в течение 1 мин, промывают спиртом, сушат. Препараты комплекса готовы дпя 10 изучения цоц электронным микроскопом.

П р и и е р. Каплю суспензии клеток, содержащей синапгонемные комплексы, наносят на агаровый фильтр.

Затем проводят электрофоретическое разделение и полимеризацию геля::

В лунку вносят образец, а гель помещают в камеру для злектрофореза.

Комплекс входит в гель и движется к аноду. На его пути под углом 90 gp вводят сеточки на 5 мин. На сеточку наползают синаптонемные комплексы. ,Проводят их окрашивание. При просмотре под электронным микроскопом видны чистые нити ДИП.

Способ позволяет получить чистую фракцию синаптонемных комплексов ДНП, свободных от хроматина.

Формула из обретения

Способ подготовки препарата изолированных синаптонемных комплексов для электронно-микроскопических исследований путем приготовления суспензии комплексов в трис-НС1 буфере рН 8,3, нанесения суспензии на агарозный гель с последующим переносом на медные сеточки и окрашиванием фосфорновольфрамовой кислотой, о т л ичающий с я тем, что, с целью получения комплексов, свободных от хроматина, до нанесения комплекса на сеточки проводят электрофоретическое разделение суспензии синаптонемных комплексов в агарозном геле, а нанесение проводят путем помещения сеточки в гель на пути прохождения комплекса под углом 85-90, при этом сеточку экспонируют в геле в течение 45 мин.

Изобретение относится к медицине

Способ определения хронических поражений печени алкогольной, аутоиммунной и вирусной этиологии // 1559294

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии

Способ диагностики атеросклероза // 1559262

Изобретение относится к медицине

Устройство для обработки внутриклеточных стеклянных микроэлектродов // 1558388

Изобретение относится к медицинской технике и позволяет повысить точность заточки микроэлектродов

Способ диагностики гипопротеинемии у детей, перенесших сепсис // 1558386

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии

Способ диагностики профессионального флюороза // 1557525

Изобретение относится к медицине, в частности к профпатологии

Способ прогнозирования течения гнойной язвы роговицы, обусловленной условно-патогенной микрофлорой // 1557524

Изобретение относится к медицине, точнее к офтальмологии, и может быть использовано для прогноза течения гнойной язвы роговицы, обусловленной условно-патогенной микрофлорой

Способ определения нарушения маточно-плацентарного кровотока в третьем триместре // 1555670

Изобретение относится к акушерству

Анализатор гемокоагуляции // 1555669

Изобретение относится к области медицинской лабораторной техники, а именно к устройствам для исследования свертывающейся крови

Способ прогнозирования неблагоприятного течения флегмоны // 1553900

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для прогноза течения флегмоны

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750