Штамм микромицета aspergillus ruвеr konig, sрiескеrм, and вrемеr тном and снurсн, используемый для оценки микробиологической стойкости полимерных материалов и покрытий
Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма гриба, который может быть использован в качестве тест-организма для оценки грибостойкости полимерных материалов и покрытий. Целью изобретения является получение нового штамма гриба, обладающего более высокой деструктивной активностью и пигментацией для повышения достоверности испытаний полимерных материалов и покрытий на грибостойкость. Штамм выделен методом прямого отсева с пленки клееной многослойной марки ЗЛАРК. Штамм обладает способностью расти при широком интервале температур (+7-+40°С), отличается высокой деструктивной активностью и пигментацией. Хранится во Всесоюзной коллекции культур микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер BKMF - 2906D. 4 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (И) А1 списочник иэоБРКТКНиЯ
Н A ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPHTHRM
ПРИ ГКНТ СССР.1 (21 ) 4347234/31-13 (22) 21.) 2.87 (46) 07.01.90. Бюл. Ф 1 (71) Институт ботаники АН ЛитССР и Всесоюзный научно-исследовательский институт текстильных материалов (72) А.Ю. Лугаускас, Д.Й Пячвпите, .
Л.М.Григайтите,. О.И. Мотеюнайте и Г,А. Казакявичюте (53) 663.15{088.8)
{56 ) Авторское свидетельство СССР
Р 1033699, кл. С 12 Б 15/00, 1984.
Единая система защиты от коррозии и старения. Иэделия химические.
Методы испытания. ГОСТ 9.048-819.049-81. (54) ШТАММ МИКРОМИЦЕТА ASPERGILLUS
RUBER (KONIG, SPIECKFHM, AFD BRE14EP,)
THON AND CHURCH ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ PJN
ОЦЕНКИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ СТОЙКОСТИ
ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ И ПОКРЫТИЙ (57) Изобретение относится к биотех.Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма гриба, который может быть использован в качестве тест — организма для оценки грибостойкости полимерных материалов и покрытий.
Цель изобретения — получение нового штамма гриба, обладающего высокой деструктивной активностью и пигментацией, для повышения достоверности испытаний полимерных материалов и покрытий на .грибостойкость.
Штамм гриба Aspergillus ruber (Konig, Spieckerm, and. Bremer) Т1iснп апй Church BKM Р-2906D выделен ме(51) 5 С )2 If )/14, С 12 0 1/18//
//(С 12 If 1/14, С 12 В 1:66) нологии и касается нового штамма гриба, который может быть использован в качестве тест-организма для оценки грибо стойкости полимерных материалов и покрытий. Целью изобретения является получение нового штамма гриба, обладающего более высокой деструктивной активностью и пигментацией для повьппения достоверности испытаний полимерных материалов и покрытий на грибостойкость.
Штамм выделен методом прямого отсева с пленки клееной многослойной марки ЗЛАРЛ, Штамм ", Ë"nàäàåò способностью расти при широком интервале температур (7-40 С ), отличается высокой деструктивной активностью и пигментацией. Хранится во Всесоюзной коллекции культур микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер В)тМ F -2906 D. 4 табл тодом прямого отсева с пленки клееной многослойной марки ЗЛАРЛ, экспонйрованной на открытой климатомикалогической. площадке.
Штамм хранится во Всесоюзной коллекции культур микрооргBHI(SMOB при институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер ВКМ F-2906D и имеет сле-дующую характеристику.
Морфологические признаки.
Конидиальные головки радиальные зеленовато-серых тонов, 150-250 мкм в диаметре. Конндиеносцы образуются из Воздушного мицелия светлые Кор »
1534051 нево-оранжевые,. с гладкими стенками
500-700 l 4-15 мкм. Конидиеносец заканчивается почти шаровидным нэдутием диаметром 25-30 мкм, стеригмы однорядные 7-9 4-5 мкм. Конидии эллиптические или почти шаровидные диаметром 5-7,5 мкм. Клейстокарпии желтые, затем ржаво-коричневые диаметром 80-120 мкм. Аскоспоры чечевице-10 образные, гладкие.
Культуральные признаки.
На среде Чапека с сахарозой при
26+2 С диаметр колонии пушистой достигает 6-7 см за 14 дн. Вначале белая, затем желтовато-оранжевая, цент-ральная часть слегка приподнята, Обратная сторона и arap окрашены в красный цвет. Запах слабый, плесневый, Конидиальные головки образуются 20 на 4-е сут,, спороношение умеренное или обильное.
На среде Чапека без сахарозы при
260+2одиаметр колонии компактной с кольцом чистого белого мицелия во- 25 круг достигает 1-2 см за 14 дн. Колония желтого цвета. Обратная сторона и агар окрашены в ярко-красный цвет.
Запах слабый, плесневый. Конидиальные головки образуются на 3-и сут.
Спороношение слабое до умеренного.
На сусло-arape колония растет очень быстро и при 26+2 С диаметр ее достигает 7-8 см за 7 дн. Колония вначале желтая, затем эеленонатожелтая с переходом н зеленый цвет в центре колонии. Обратная сторона и агар окрашены в яркий оранжево-красный цнет. Запах плесненый. Кбнидиальные головки образуются уже на 1-е сут. 40
Рост колонии на картофельно-сахарной среде совпадает с ростом ее на cycno-arape.
На мясо-пептонном агаре колония умеренно пушистая, ее диаметр дости-гает 4-5 см за,14 дн, Колония вначале белая, затем .голубовато-зеленая, потом желто-зеленая. Обратная сторона окрашена в темно-оранжевый цвет.
Конидиальные головки образуются на
4-е сут.
На агаризованном кукурузном экстракте колония быстро растет„ диаметр ее достигает 5-6 см через 7 дн. Колония пушистая, буровато-желтого цвета.. Обратная сторона и агар окрашены в интенсивный желтый, цвет.
Физиолого-биохимические свойства.
Оптимальная температура развития
26т2 С. Слабое развитие наблюдается при +7 и +40 С.
Отношение к углеводам: хорошо усваивает сахароэу, глюкозу, фруктозу.
Устойчив к материалам, защищенным фунгицидами. Интенсивно развивается на пластмассах, на поливинилхлориде, искусственной коже, капроне, фольгированном стеклотекстолите, компаунде.
Антагонистические свойства.
Антибиологическая активность на средах с сахарами не обнаружена. Штамм проявляет высокую антибиотическую актинность к Trichodemna harzianum no1 давляет Beltrania sp., Pqnicillium, Aspergillus fumigatus, F. verzicolor, c1adosporium herbarum. Нейтральные взаимоотношения с видами Анрегдд11ин .
niger, Penicillium йеснлЪепн, Р.paxilli, P. terlikowskii. Культура гриба хранится в пробирках со скошенной поверхностью минеральной среды, в которую равномерно распределяют порошок различных пластиков или измельченного материала в зависимости от дальнейшего назначения штамма. Пробирки с чистыми культурами гриба хранят в холодильнике при температуре 7+3 С. В состав минеральной среды входят следующие реактивы, r:
Калий фосфорнокислый однозамещенный 0„7
Калий фосфорнокислый днухзамещенный 0,7
Магний сернокислый 0„7
ИН ИО 1,0
Натрий хлористый 0,005
Железо сернокислое закисное 0,002
Еп$04 7Н О 0,002 мп$О4 7н,о 0,001
Агар 15
Вода дистиллированная До
1000,0 мл
Чистую культуру гриба для проведения испытаний выращивают в пробирках со скошенной поверхностью питательной среды Чапека-Докса, в состав которой входят следующие ингредиенты, г".
Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,7
Калий фосфорнокислый двухзамещенньй 0,3
Магний сернокислый 0,5
Натрий азотнокислый 2,0
Калий хлористый 0,5
Железо сернокислое
0,01
30., 0
20,0 закисное
Сахароза
Агар
Вода дистиллированная До 1000,0 мл
Культуру гриба выращивают 2 недели при 29+1 С.
Суспензию спор с концентрацией
1-2 млн/мл готовят в дистиллированной воде.
Пример 1. Сравнивают активность предлагаемого штамма и двух наборов грибов: набор тест-культур по ГОСТ 9.048-81 и набор тест-культур по ГОСТ 9.049-81 с добавлением штамма Aspergillus rubår (Konig, Spieckenn, and Bremer) Thorn and
Church ВКМ F-2906D. Испытания нро ведены на 12 неметаллических материалах в течение 56 сут при 26+
+2аС, относительной влажности 90Х.
Образцы всех материалов поделены на две партии. Каждая партия заражена одним иэ указанных наборов гри, бов. В каждой партии испьггывают по
5 образцов каждой марки материалов, т.е. с каждым набором грибов испьггано по 60 образцов всех марок материалов. Кусочки материалов стерилизуко.в термостате при 60-80 С в течение 4 ч, затем протирают их марлевым тампоном, смоченным этиловым спиртом. Дпя этой цели применяют также облучение ультрафиолетом в течение l ч и более. Образцы материалов (5 5 см) устанавливают.на нектором расстоянии друг от друга (35 см) и опыпяют суспензией спор грибов из пульверизатора с диаметром выходного отверстия 1 мм. Суспензию распределяют равномерно по всему эксикатору из расчета 50 смЗ - на
1 м в независимости от количества
Т а б л и ц а 1
Наличие
Aspergillus
ruber на материалах
Степень поражения материалов при заражении, балл
Материал
1 2 3»»»
Пленка фтороплас-та-4 МБ
Пленка фторопласта-10
Пленка фторопласта-4НА
34051 6 испытуемьгх образцов. Суспензия спор с концентрацией 1-2 млн/мл готовится как в монокультуре, так и в ассоциации грибов.
Степень поражения материалов грибами (в баллах по ГОСТ 9.048-81) представлена в табл.1.
Испытания показали, что представ10 ленный штамм поражал на 1 -2 балла сильнее некоторые материалы (поливинилхлоридной, кремнеэемной основы) по сравнению с пораженным набором грибов по ГОСТ 9.048-81 .
Пример 2. Сравнивают активность нового штамма с набором грибов по ХОСТ 9.049-81. Условия испьгтания такие же, как в примере 1 . Результаты представлены в табл.2. Полученные данные показывают, что штамм Asgergillus ruber BKN F-2906D обладает высокой деструктивной актив" костью.
В процессе эксперимента на актив25 ность штамма регистрировали время окрашивания субстратов пигментом после
7, 14, 28 и 56 сут (табл.3 и 4). Полученные результаты показывают, что штамм Aspergillus ruber ВКИ F-2906D
30 один и в наборах с грибами стандартов ГОСТ 9.048-81 и ГОСТ 9.049-81 обладает интенсивной пигментацией.
Это позволяет сократить время оценки грибостойкости полимерных материалов
35 по кры
Формула изобретения
Штамм микромицета Aspergillus ru4О ber (Konig, Hpieckerm, апд. Bremer }
Thorn апй Church BKM F- 2906D, используемый для оценки микробиологической стойкости полимерных материа.лов и покрытий.
1534051
Продолжение табл.!
Наличие
Aspergillus
ruber на материалах
Степень поражения материало:в при заражении, балл
Материал
1 1
Кожа искусственная декоративная отделочная,"Старт"
Пленка Ф-26 марки А
Трубка из поливинилхлоридного плас" тиката неокрашенная черная
Пл енк а ПЭТФ эл ек тр оизоляционная
Пленка поливинилхлоридная пластифицированная марки В
Пленка из фторопласта-4К конденсаторная
Пенополивинилформаль марки ТПВФ-1
Пленка клееная многослойная марки ЗЛАРХ!
3
2
5 5
+Aspergillus ruber ВКМ F — 2906 D
« Азрег 11пз ruber ВКМ F - 2906 D и тест-культуры по ГОСТ 9 048-81.
" Тест-культуры по ГОСТ 9.048-81.
Таблица 2
Степень поражения материалов прн заражении, балл
Наличие
Aspergillus ruber на матеМатериал
1 !
2» 3»" риалах
Ткань проре.з|нненная
918-9
Пленка Ф-2б марки А
Ткань СТВО-98
Ткань полифеновая отбеленная
Ткань петельная
П-56-П
Ткань ВНСОКА объемная с антистатической пропиткой
Yàòåðèàë АЗТ-С
Искусственная кома-TP
"Талка-1"
2-3
1534051
Продолжение табл.2
Степень поражения материалов при заражении, балл
Наличие
Азрег 1lus ruber, Мат ер иал на материалах
Пленка из фторопласта 4МБ марки А
Лента техническая из
2 2 нитей аримид-Т
Ткань стеклянная оп2 1
1 0
2 1
3
+A s p erg ill u s ru be r 8 KM F — 2906 D
« Азрегд 11цз ruber BKM F - 2906 D и набор тесткультур по ГОСТ 9.049т81 ++чТест-культуры по ГОСТ 9.049-81.
Таблица3
Окрашивание субстрата пигментом за время, сут
Материал
Тест культур по ГОСТ
9.048-81
Штамм Aspergillus
ruber BKM
F - -2906
Тест культур по ГОСТ
9.048-81 и
As ergillus
Гц
F р
ber BKM — 2906
I 11
7 14 28 56
Пленка фторопласта4МБ
Пленка фторопласта-10
Пленка фторопласта4НА
«Ь + тического значения
Шнур технический полифеновый
Резина ИРМ-2073
Материал облицовочная ткань с антистати- ческой пропиткой
Ткань капроновая петельная М-56-П
Полимерно-тканевый материал
Лента эластичная термостатная СТЭЛА
20-200
Лента СТЭЛФ-20
Триацетат с антимикробной обработкой
7 14 28 56 7 14 28 56
12
Продолжение табл.3
1534051
Материал
Тест культур по ГОСТ
9.,048-81
Штамм Aspergillus
ruber BKM
F — - 2906
Тест культур по ГОСТ
9.048-81 и
Aspergillus грег ВКИ
У вЂ” 2906
7 14 28 56
7 56
7 14 28 56
+ +
Таблица4
Материал
Штамм Aspergillus ruber
BEN F — 2906
Тест культур по ГОСТ
9.049-81
Тест культур по ГОСТ
9.049-81 и штамм Aspergi1lus ruber ВКИ
F-2906
Кожа искусственная декоративная отделочная "Старт"
Йленка Ф-26 марки А
Трубки из поливинил- хлоридного пластиката не окр ашенные черные
Пленка ПЭТФ электроизоляционная
Пленка поливинилхлоридная пластифицированная марки В
Пленка иэ фторопласта-.4К конденсаторная
Пенополивинилформаль марки ТПВФ-l
Пленка клеевая много.-. слойная марки ЗЛАРЛ
Ткань прорезиненная
918-9
Пленка Ф-26 марки А
Ткань СТВО-98
Ткань полифеновая отделочная
Ткань петельная
П-.56-П
Ткань ВНСОКА объемная с антистатической пропиткой .
Окрашивание субстрата пигментом за время„ сут
+ + + + + - +
+ + «В + + + + +
+ + - + + + — + + +
Окрашивание субстрата пигментом за время, сут
7 14 28 56 7 14 28 56 7 14 . 28 56
+ + + + + + +
1534051
Продолжение табл.4
Материал
Штамм Aspergillus ruber
BKM F — 2906
Тест культур по ГОСТ
9.049-81 и штамм Aspergillus reer BKM
F-2906
Тест культур по ГОСТ
9.049-81
Материал А3Т-С
Искусственная кожа и
Пленка из фторопласта-ЯМБ марки А
Лента техническая из нитей Аримид-Т
Ткань стеклянная
+ +
+ + + + +
+ + + + +
+ + + + + +
+ +
+ + +, Редактор Н. Яцола
Заказ 22 Тираж 486 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент"., r.Óæãîðoä, ул. Гагарина, 101 оптического значе ния
Шнур технический полифеновый
Резина ИРМ-2073Материал облицовочная ткань с антистатической пропиткой
Ткань капроновая петельная М-56-П
Полимерно-тканевый материал
Лента эластичная термостатная СТЭЛА
20-200
Лента СТЛФ-20
Триацетат с антимикробной обработкой
Окрашивание субстрата пигментом за время, сут
7 14 28 56 7 14 28 56 7 14 28 56
+ + + + + + + + +
+ + + + + + + +
+ + + + +
Составитель 3. Фалунина
Техред Л. Олийнык Корректор О. Ципле
