Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике дискинезии желчного пузыря у детей. Цель изобретения - повышение точности. Сыворотку крови экстрагируют изопропиловым спиртом и гептаном, после чего спектрофотометрически ( при длине волны 233 нм) определяют количество диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта и гептана, затем рассчитывают их соотношение и при его значении 6,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря. Точность способа составляет 100%. Способ особенно полезен при наличии противоказаний к дуоденальному зондированию. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСйИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1

„„Я0„„1478125 (51) 4 G 01 N 33/92

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АBTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

По ИЗОБРЕТЕНИЯ 4 И OTHPblTHRM

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4163465/28-14

1 (22) 16. 12.86 (46) 07,05.89. Бюл. ¹- 17 (71) Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства (72) 1О.-А.С.Жемайтайтите, Э.П.Пуоджюнене и Д.И.Станкуте (53) 616.07 (088 ° 8) (56) Авторское свидетельство СССР № 1313431, кл. А 61 В 10/00, 1985. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИСКИНЕЗИИ

ЖЕЛЧНОГО ПУЗЫРЯ У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лаИзобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике дискинезии желчного пузыря у детей.

Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики дискинезии желчного пузыря путем биохимического исследования желчи с установлением в ней концентрации конъюгированных диенов. При наличии значений конъюгированных диенов, превышающих 7,23 D/ìë, ставился диагноз дискинезии желчного пузыря Г1 ).

Однако у детей пузырную желчь не всегда можно получить, особенно в раннем возрасте и при нарушениях ритма сердца.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом. бораторной диагностике дискинезии желчного пузыря у детей. Цель изобретения — повышение точности. Сыворотку крови экстрагируют изопропиловым спиртом и гептаном, после чего спектрофотометрически (при длине волны

233 нм) определяют количество диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта и гептана, затем рассчитывают их соотношение и при его значении

6,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря. Точность способа составляет 100Х. Способ особенно полезен при наличии противопоказачий к дуоденальному зондированию. 1 табл.

0,2 мл отцентрифугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл бидистиллированной воды, перемешивают, затем приливают

4 мл изопропилового спирта, а сверху

4 мл гептана. Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гептановой). Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю — водно-спиртовую и верхнюю — гептановую. Добавляют 1,0 r сухого NaC1.

Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Переносят верхний гептановый слой в сухую чистую пробирку, закрывают ее стеклянной пробкой. В пробирку с изопропиловым спиртом и. водной фазой вносят еще 1 0 г сухого

NaC1. Покачивают 20 раз, переводя пробирку из вертикального положения в горизонтальное. Затем еще раз цент1478125 рифугируют при тех же условиях. Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой.

Измерения оптической плотности производят на спектрофотометре при длине световой волны 233 нм как в гептановой, так и в изопропиловой фазах.

После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по формуле

4П зъ Чэ

233/мл V

О.М где D II)) з разница оптической плот 15 ности исследуемого образца и образца, содержащего вместо биологического материала бидистиллированн ную воду, 20

V, — объем экстрагированной гептановой или изопропиловой фазы, мл, V — исходный объем биологиК,м ческого материала (сыворотки) .

Затем рассчитывают соотношение оптической плотности дисковых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковой в фазе гептана и при его . значении б,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря.

В таблице представлены средние показатели соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови у детей с дискинезией желчного пузыря и нарушением ритма сердца, где Х вЂ” среднее значение, ra — ошибка, P — достоверность, в 40 скобках — заверительный интервал, I - -изучаемая группа больных с дискинеэией желчного пузыря и нарушением ритма сердца1 Ia — часть больных

I группы, у которых гипомоторная дис-45 кинезия желчного пузыря. определена только при установлении соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гентана в сыворотке крови; II — больные со стойким нарушением ритма сердца при отсутствии дискинезии желчного пузыря; III — группа здоровых.

Иэ таблицы видно, что у 20 больных из 48 детей изучаемой группы (с дискинезией желчного пузыря и с нарушением ритма сердца) с помощью известных способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральной ! холецистографии и биохимического исследования пор1 ии желчи желчного пузыря с определением в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта) не диагностирована дискинезия желчного пузыря. У упомянутых

20 больных (42X из обследованных детей с дискинеэией желчного пузыря и с нарушением ритма сердца) диагноз дискинезии желчного пузыря поставлен только с помощью предлагаемого способа.

Таким образом, с помощью прототипа представлена возможность ставить диагноз дискинезии желчного пузыря только у 58Х детей с нарушением ритма сердца. Предлагаемый способ диагностики позволяет у всех детей с нарушением ритма сердца своевременно поставить диагноз дискинезии желчного пузыря с помощью определения в сыворотке крови соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана.

Способ помогает вовремя поставить диагноз дискинезии желчного пузыря у детей с нарушением ритма сердца и в тех случаях, когда применяемое в прототипе дуоденальное зондирование (с целью получения порции желчи желчного пузыря для биохимического исследования) представляет опасность ухудшения аритмии сердца (спровоцирование приступов пароксизмальной тахикардии). Кроме того, дуоденальное зондирование с целью получения порции желчи желчного пузыря и определения в ней диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта для постановки диагноза дискинеэии желчного пузыря не представляется возможным у детей раннего возраста.

Пример 1. Больной П., 9 лет с диагнозом стойкой суправентрикулярной экстрасистолии. Ребенок был обследован по поводу дискинезии желчного пузыря. На пероральной холецистограмме и при эхоскопическом исследовании не обнаружено изменений желчного пузыря, общепринятое йсследование биохимических показателей в порции желчи желчного пузыря (включая установление диеновых коньюгатов) также было в пределах нормы.

Наряду с указанным биохимическим изучением порции желчи желчного пузыря (полученной с помощью дуоденального зондирования) устанавливают

1478125 где др — разница оптической плот- 40 ности исследуемого образца и образца, содержащего вместо биологического материала бидистиллированную воду;. 45 объем экстрагированной гептановой или изопропиловой фазы, мл, V — исходный объем биологической жидкости — сыво- 50

Vз ротки.

Концентрация первичных продуктов перекисного окисления липидов — диеновых конъюгатов в фазе изопропилоВОГО спирта сОставляет согласнО фОр- 55 муле в сыворотке крови — 0,266 . 4,2 = 5 6 D/

1 33/М" 0,2 в сыворотке крови концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов — диеновых конъюгатов

1 следующим образом: 0,2 мл отцентрифугированной сыворотки переносят в сухую пробирку, добавляют 0,8 мл бидистиллированной воды, перемешивают.

Затем приливают 4 мл изопропилового спирта, а сверху также 4 мл гептана.

Плотно закрывают пробирку притертой стеклянной пробкой и сильно встряхивают до полного перемешивания трех фаз (водной, спиртовой и гаптановой).

Затем ждут расслоения на две фазы: нижнюю — водно-спиртовую и верхнюю—

15 гептановую. Добавляют 1,0 г сухого

NaC1. Центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Переносят .верхний гептановый слой в сухую чистую про20 бирку, закрывают стеклянной пробкой.

В пробирку с изопропиловым спиртом и водной фазой вносят еще i 0 г сухого NaC1. Покачивают 20 раз, переводят пробирку из вертикального

25 положения в горизонтальное. Затем еще раз центрифугируют при тех же условиях. Прозрачную изопропиловую фазу переносят в чистую пробирку, закрывают пробкой. Измерения оптической плотности производят на спектрофотометре при длине световой волны

233 нм как в гептановой, так и в изопропиловой фазах. После этого производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки по 35 формуле Р эз э гз /мл V p и в фазе гептана

0,083 4,2

1 1 показатель соотношения диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворот5,60 ке крови 5 = 3,20, что не отличается от показателей группы здоровых детей (6,06).

Предлагаемым способом диагностики, как и общепринятым способом диагностики, исключена гипомоторная дискинезия желчного пузыря.

Пример 2 ° Больной Б., 12 лет. Поступил в клинику с диагнозом стойкой желудочковой экстрасистолии и с подозреваемой дискинезией желчного пузыря. С помощью общепринятых способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, биохимического исследования желчи) установлена гипомоторная дискинезия желчного пузыря.

Определяют концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов — диеновых конъюгатов в фазах изопропилового спирта и гептана и производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мп сыворотки крови по формуле. Концентрацию диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта определяют согласно формуле в сыворотке крови

0,5904 1 4,2

Э и в фазе гептана в сыворотке крови

0,0666 1 4,2 . 1,4 D/ìë, показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к тактовым в фазе гептана в

12,4 сыворотке крови „ = 8,85, что превышает аналогичное соотношение у группы здоровых детей (6,06). На основании результатов эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, биохимического исследования желчи и определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови ставился сопутствующий нарушению ритма

1478125 и в фазе гептана

0,0652 х 4 2

79> мл 0,2

i5

30

Группа

Число больСтатистические показатели детей ных

8,16 (5,19-11,13)

0,99

0,001

9, 19 (6,42 11,96)

0,67

4,35 (2,63-6,07)

0,49

0,1

4,64 (3,22-6,06)

0 34

P L

20

24

P )

III 18 сердца диагноз гипомоторной дискинеэии желчного пузыря.

Пример 3. Больной С., 14 лет ° Поступил в клинику с диагнозом стойкой суправентрикулярной экстрасистолии. С помощью общеприня— тых способов диагностики (эхоскопии желчного пузыря, пероральной холецистографии, общепринятого биохимического исследования желчи) исключена дискинеэия желчного пузыря. Наряду с биохимическим изучением порции желчи желчного пузыря, полученной с помощью дуоденального зондирования, определяют в сыворотке крови концентрацию первичных продуктов перекисного окисления липидов — диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта и в фазе гептана и производят расчет в единицах оптической плотности на 1 мл сыворотки крови.

Концентрация диеновых конъюгатов в фазе иэопропилового спирта в сыворотке крови составляла согласно формуле

0,6782 4,2

15,6 Р/мл

7 33/мл 0,2 и в фазе гептана в сыворотке крови

0,809 3 2

II 1,7 Э/мл, 0,2 показатель соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в

15,6 сыворотке крови †= 9 17 что пре1,7 вышает аналогичное соотношение у группы здоровых детей (6,06).

Спустя два месяца при наличии стойкой желудочковой экстрасистолии повторно определяют концентрацию диеновых конъюгатов в фазе иэопропи. лового спирта и в фазе гептана в сыворотке крови, которые составляли согласно формуле в сыворотке крови в фазе иэопропилового спирта показатель соотношения диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта

12,8 к таковым в фазе гептана = 8,53, что превышает аналогичные показатели группы здоровых детей (6,06).

На основании результатов определения показателя соотношения диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови (при повторном обследовании его) ставился сопутствующий нарушению ритма сердца диагноз гипомоторной дискинеэии желчного пузыря.

Точность предлагаемого способа составляет 1007.

Формула и з о б р е т е н и я

Способ определения дискинезии желчного пузыря у детей путем определения диеновых конъюгатов в биологических жидкостях, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови определяют количество диеновых конъюгатов, экстрагируемых изопропиловым спиртом и гептаном, рассчитывают соотношение диеновых конъюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана и при его значении 6,06 и более определяют дискинезию желчного пузыря.

Соотношение диеновых коньюгатов в фазе изопропилового спирта к таковым в фазе гептана в сыворотке крови