Способ определения региональных изменений поверхности и скорости транскапиллярного обмена у животного

 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и предназначено для разработки способов диагностики и лечения различных патологических процессов. Цель изобретения - повьшение точности способа. Для этого вживляют опытной и контрольной группе 2 катетера - в яремную вену и в аорту. Через несколько дней контрольной группе и испытуемой, предварительно подвергнутой влиянию испытуемого раздражителя , в первый катетер вводят р-р RbCl, Через 30 с во второй катетер в течение 30 с вводят макроагрегаты человеческой сыворотки, меченной йодом-131 (МАА йод-131), по истечении еще 30 с производят остановку сердца внутривенным введением насыщенного р-ра КС1. Выделяют органы и ткани и регистрируют в них содержание индикаторов методом радиометрического исследования с помощью дифференциального дискриминатора . Определяют величину RbCl/MAA йод-131, характеризующую нормированную по кровотоку функцию транскапиллярного обмена каждого из органов на одном животном, нормированного по кровотоку. 2 табл. ю (Л

COlO3 СОВЕТСНИХ

СООИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

„„ 0„„1439499

А1 (5l}4 G 01 N 33 4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ а

|-"

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ к та Г ь

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTHH (21) 4077778/28-14 (22) 11.06,86 (46) 23. 11. 88. Бюл. М 43 (71) Ленинградский государственный институт усовершенствования врачей им. С.М. Кирова (72) О. А. Ковалев, О.Н.Непочатов и В.И.Лебедев (53) 612.015 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Р 1210786, кл. А 61 В 6/00, 1983. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕГИОНАРНЫХ

ИЗМЕНЕНИЙ ПОВЕРХ11ОСТИ И СКОРОСТИ

ТРАНСКАПИЛЛЯРНОГО ОБМЕНА У ЖИВОТНОГО (57) Изобретение относится к экспериментальной медицине и предназначено для разработки способов диагностики и лечения различных патологических процессов, Цель изобретения — повышение точности способа. Йля этого вживляют опытной и контрольной группе 2 катетера - в яремную вену и в аорту.

Через несколько дней контрольной группе и испытуемой, предварительно подвергнутой влиянию испытуемого раздражителя, в первый катетер вводят р-р

Эа

RbCI. Через 30 с во второй катетер в течение 30 с вводят макроагрегаты человеческой сыворотки, меченной йодом-1 31 (МАА йод-131), по истечении еще 30 с производят остановку сердца внутривенным введением насыщенного р-ра

КС1. Выделяют органы и ткани и регистрируют в них содержание индикаторов методом радиометрического исследования с помощью дифференциального дискн% риминатора. Определяют величину RbCI/МАА йод-131, характеризующую нормированную по кровотоку функцию цр р транскапиллярного обмена каждого из С органов на одном животном, нормированного по кровотоку. 2 табл.

1439499

Изобрететение относится к экспериментальной медицине и может быть Нс

О польэовано для разработки способов диагностики и лечения различных пато- 5 ло гических проце с сов и состояний.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Лоставленная цель достигается тем, что радиоактивные индикаторы " кЬС1 10 и макроагрегаты человеческой сыворотки, меченные йодом-131 (МАА йод-131) вводят одному и тому же животному со= ответственно за ЧО и 60 с до остановки сердца. 3атем выделяют пробы îpra- 15 нов и тканей и определяют содержание каждого из индикаторов в пробе.

Способ осуществляется следующим образ ом.

Животным контрольной и испытуемой 2О групп вживляются два катетера, один в наружную яремную вену, другой " в дугу аорты, Через несколько дней (после заживления операционной раны и адаптации животных) контрольной и 25 испытуемой, предварительно подвергнутой влиянию исследуемого раздражителя, группам в первый катетер вводят раствор RbC1. Через 30 с во второй катетер в течение 30 с вводят 3п

МАА йод-131 и по истечении еще 30 с производят остановку сердца внутривенным введением насыщенного раствора KCl. Путем препаровки выделяют исследуемые органы и части тела и производят их радиометрическое исследование с помощью дифференциального дискриминатора. Определяют отношение содержания 6RbC1 и МАА йод-131, характеризующее нормированную по кровотоку 40 функцию транскапиллярного обмена каждого из органов на одном животном, нормированного по кровотоку.

П р и и е р 1. Определение регионарных показателей функции транскапиллярного обмена у интактных животHblX a

Нелинейных белых крыс-самцов массой 180-230 г, содержащих= ÿ на обычном лабораторном рационе, приучают к лабораторной обстановке, взятию в руки, к экспериментатору. За 4 сут до опыта под гексеналовым наркозом через наружную яремную вену в правое предсердие вводят полиэтиленовый катетер. Другой катетер проводят через сонную артерию в дугу аорты так, чтобы его верхушка располагалась непосредственно у аортального клапана.

Операцию производят в асептических условиях, в дальнейшую работу берут животных, у которых заживление операционной раны проходило беэ осложнений и проходимость катеторов не была нарушена. Венозный катетер ежедневно промывают 0,9 -ным раствором

NaC1 с гепарином так, что крысы привыкали к манипуляциям на катетере.

У 14 крыс в день опыта через венозный катетер за 90 с вводят 0 2 мл RbC1

Яб радиоактивность которого райна 500 кБк. Через 30 с в артериальный катетер вводят 0,2 мл МАА йод131. Диаметр 98,5 . частиц NAA лежит в пределах 15-30 мкм, радиоактивность индикаторной взвеси 500 кБк, Ло прошествии еще 30 с производят остановку сердца введением в веноэный катетер

0,7 мл насыщенного раствора КС1.

Путем препаровки выделяют 50 проб, содержащих все внутренчие органы и части тела животного. Каждую пробу подвергают радиометрии в колодезном кристалле с применением дифференциального дискриминатора. При этом оценка радиоактивности пробы производится на двух экспериментально полобранных уровнях дискриминации, соответствущих пикам энергетического спектра

6Rb и " I. Поскольку спектры излучения этих изотопов частично перекрываются, определение их концентраций в пробе производится расчетным путем, На последнем этапе находят суммарную радиоактивность каждого изотопа, их процентное содержание в пробе и отношение RbC1 и МАА

36 йод-131 — нормированный по кровотоку показатель функции транскапиллярного о бмена орган а.

Анализ полученных результатов показал, что у и тактных животных показатель функции транскапиллярного обмена имеет наименьшие значения в головном мозге <0,06+0,009) и миокарде (0,27 -0,031); в корковом "лое почек (0,65+0,047) и в толсть-х кишках (0,7+0,057) . Гще больп ей величины этот показатель достигает в легких (1,29 -0,158), печени (1,38+0 049), вилочковой железе (1,39= 0,1 17). 11аибольщие значения он имеет в мозговом слое почек (2,"0> 0,2 >61, коже груди (2,32+0,О 021, хвосте (g 20+

0,391). В остяпьпь>х рганех и астях тела величина зт:..> о пекqg qq еля колеб>3 1!,. !ог, лется в пределах О,éá- I "> вероятно -стьть различий не превышает урояня статистической значимости, р - 0,05, Таким образом, полученные результаты позволяют характеризовать функцию транскапиллярного обмена каждого органа и дают возможность произвести вероятностную оценку различий этого показателя между различными органами 10 в однородной группе животных.

Пример 2, Определение изменений регионарных показателей функции транскапиллярного обмена у крыс под влиянием холинолитика - метамизила. !5

Методика проведения опытной группы такая, как и в предыдущем примере, эа исключением того, что введение радиоактивных индикаторов производили через 30 мин после внутрибрюшинной 20 инъекции метамизила в дозе 0,2 мг/кг.

В качестве контроля использована указанная группа интактных животных, Сопоставление показ ателей функции транскапиллярнбго обмена контрольной и опытной групп, произведенное с помощью t-критерия Стьюдента, позволило отметить следующие закономерности.

При введении метамизила значение ""òñ-.

ro показателя статистически значимо 30 увеличивается н тощей кишке (р 0,001 ),. подвздошной железе (р 0,002),тонких кишках (р < 0,001), желудке (р (0,002), семенниках (р L 0,005), мышцах живота (ра 0,005) и задних конечностей (р 0,01), коже головы (р (0,01), шеи (р а 0,001), живота (p < 0,00! ) и задних конечностей (р (0,02). Уменьшение этого показателя наблюдается в легких (р а. 0,001), печени (р < 0,001) . 4p мышцах груди (р 0,002), Пример 3. Сопоставление предлагаемого и известного способов произведено путем сравнения оценок изменений функций транскапиллярного обмена (ФТО} под влиянием ннутривенного введения амизила крысам.

Всего было проанализировано 72 сосудистые области, однако для наглядности приводим те области, в которых rp зарегистрированы значимые изменения содержания Rb от контроля к опыту или значимые изменения кровотока.

В табл.1 приведена опенка регионарных изменений ФТО под влиянием амиэила, полученная с помощью известного способа. Представлена интегральная оценка различий средчих арифметических по t êðèòåðèþ Стьюдента (р), знак (+) nзначает уяеличенне н опыте по сравнению с контролем, знак (-) уменьшение. Оценка изменений ФТО показана знаком Ф, что означает увеличение ФТО, знак Ф вЂ” уменыпение ФТО, знак 0 — сценка изменений невозможна.

В табл.2 приведена оценка регионарных изменений Ф! О под влиянием амизила, полученная с помощью предлагаемого способа, согласно которой оценка изменений ФТО конкретнее и точнее. Знак Ф означает достоверное увеличение ФТО, знак — достоверное уменьшение ФТО, 0 — достоверных изменекий не зарегистрировано.

Сравнение двух таблиц показывает полное совпадение оценок, полученнь|х предлагаемым и известными способами в

8 областях, в других 8 областях направленность изменения согласуется с известным способом, однако эти изменения не достиг ают уровня ст атистиче скойй значимости. В селезенке, почках, коже шеи оценки изменений отличаются, но и н этом случае они не достиг ают уровня статистической значимости. В желудке и семенниках сравнение способов оказалось невозможным нз-эа возникающей неопределенности в из" вестном способе, И лишь н одной области (диафрагма} наблюдается несоответствие в оценке ФТО по известному и предлагаемому способам, Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет повысить точность исследования и избежать неопределенности, возникающих при ис" пользовании известного способа.

В предлагаемом способе используют радиометриче скую установку УР-1-7, имеющую дифференциальный дискриминатор.

Фо рмyë а иs о бр ет ения

Способ определения регионарных изменений поверхности и скорости транскапиллярного обмена у животного путем вжинления опытной и контрольной групп двух катетерон н яремную вену и аорту, воздействия раздражителя, введения через катет еры растворов индикаторов Rb01 и макроагрегаты человеческой сыворотки, меченные йодом-131, остановки сердца, выделения органов и тканей и регистрации н них содержа5 !4394 ния индикаторов, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности способа и его упрощения, оба катетера вживляют каждому живот- .

99 ному, а индикаторы вводят последовательно каждому животному, причем в RbC1 ва 90 с, а второй индикатор " вб з а бО с до остановки сердца.

Табляса! т

Олыт, Идя роль, Ифm

Сраэяеяяэ ° контроль - о!не

Оркыиэ> ткйи я части тела, сосудистые области

Вероэтяость раэ

Р яка

ыеяе0,92?0>120

1,4420,052

2,39+0,103

2>32Ю>183

1 0640 031 О 76Ю>055 с0,001

Сл>еая>е келеэы

Сердце (няокард) 1>99+0,144 6>78ф1>516 с 0,05

Тол стые клики (Йелудок я !ип(евод

2, 104 0>147 2,00+0,282 ь 0>25

0,99+0,053

0,824 0,021 0,58Ю,О54 с 0,01

0>27Ю>022 с 0,05 э0,25

0 34+0 021 0,32+0 059 I3,29<0>699 9>5911>036

Cemsseaaa

Воротяаа вена яечеия

Н ад почечники

12>16ФО>ббб

0>ОВЮ,005 0,46 0>026 )0>25

О,07<0,ООЯ

1>42 0>135

Ooul(B мое> ово» uio!I

Ночки, суье>арно

1 >5640> 165 О ° 33+0>051

7>66Ю>692 6,66ФО,697 !

>59Ю>030 1>0110>121 оо,5ь то>5+ г. 0,00 i7,32+0 655

1,96+0,071

Сема никки

??>ищы я костя гррдя

15,9бфо>617 . 14,07,428

l5,25+0,435 20,38+!,528 wO>25О,66+0,О31 1,31%,099 а 0,051,55Ю,t23

1>22r0 135

О,ВЭЮ,143

3,22Ю,256

0,?ЯЮ ° 023

I 60+0,080

7?ga6t>ass>a ! %аккы иивота, верх

+ 0,05+ а )0,5О, 001+

2,02+0,068 1,64Ю,141

1,47+0,087 0>7310>096, 0,02+

3,48 0,182 2>09Ю>227 ) 0,1I 2IЮ,054

3>86+0>152

?йащы иявота ниэ

1 с 0,005 т

4,64 0, 120 4,06Ю,395 с 0,01—

?аяксы аереднях конечностей

1 — ) 0,25+

5,43+0,229

3,67+0>203

?Ыяяы эадиих кояечяосте6.. 0,056>474-0,241 3,8540,416

7 0,1)0,255>20ФО>461

6>97фо>256

2,05Ю,054 — e 0,051>90ФО>!26 I 07Ю>157

1 52+0,205 0,01»

+ 70 >05O ° 60+0,038 0>38ф0,029 . 70,05О ° 58+0, 061

0,93+0,04Э

О, 7 0,036 с: 0,05>

I>72%0>099 0>77Ю >082! >ЯЭФО>077

IIosa зивота

Коаа лередяик коиечяосте?? у 0,5+ а О>0010>6210,031 0,46+0,101

0,43т0,057

0>82фо>029

0 23+0 О2О

IImsa э адяях кояачяостед — 0,0017 0,250>ВВЕЛО>044

О,ЯЭЯО,ОЭ5

0,94то>047

6 06+1 387

2> 73 0>3t2

1>ООЮ,ОВО

0,3220,056

I4>5541 028

0,09 0>0!2

0,59+0 096

9,34+0,952

I 94+0, lO5

- r 0,25-1 0>5t, 4 с 0,05- E0i0ol о

+) 0,5»

t c 0,о05)с0,05+ 4 .>-со >054 сО 05- "о,оо1;0,O0» 1 ..-, о,l- 4

14 19499

Т аблиц а2

Контроль Mkm

Оценка изменений ФГО

Органы, ткани, части тела, сосудистые области

Orn т

Сравнение контроль— опыт gRb (Р) XHAA

7ВЬ УМАА

7.MAA

Слюнные жел е э ы

1,4110,128

) 0,25

Сердце (миокард) О,ЗЗФ0,051 0,25

Толстые кишки

>О,! +

I 2810å273

Желудок и пищевод

Селезенка

Воротная вена печени

Надпочечники

Почки, мозговой слой

Почки суммарно

Семенники

0,90 0,085 0,005

Мышцы и кости груди

0,45 0,022

Диафрагма

0,65+0,034 (0,00! +

l,45 0,150 ) 0,5 +

2, 21ьО, 266 ) 0,25 +

2,0440,226 0,005 +

1,43 .0, 155

Мьппцы живота, верх

1 ьб9 0 241

1,20 0,088

Мышцы живота, низ

Мышцы таза

Мышцы передних конечностей

1,27+0,077 )0,5

1 29 Î,171

Мьппцы задних конечно ст ей

1,95+0,238 z 0,02 +

1,21+0,139

1,50+0 159

1,4460 151 0,05 +

2,264-0,279

Кожа головы

2,16+0,358 )0,05 +

2,6бч0,256 0,002 +

Кожа шеи

1,61+0,122

Кожа живота

Кожа передних конечностей

2,17+0,336 )0,25 +

1,84 0,268

Кожа задних конечностей

4, 89 0, 533 (0,001 +

2,16 0,176

ВШ11!ПИ Заказ 6071/44 Тираж 847 Поцпи с ное

Пр пан. — полнгр. пр — тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

1,59 0,209

0,42 0,105

n,8бтО,О8З

1,22+0е179

1,16+0,139

0,89+0,067 180 0 и 19

2,32+0,26!

О, 82 -0, 054

1,20 О 105

1,28+0,075

1,61+0,132 < 0105 +

0,95+0, 106 > 0,25

1,29 0,144 7 0,05 +

О >78ТО,О72 0,5

3,60+0,521 0,05 +

1,09 0, 124 ) 0,05 +

1,77 0,254 z 0,05 +