Способ определения антиокислительной активности сыворотки крови
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в научноисследовательских лабораториях для проведения экспериментальных работ и в клинических лабораториях для диагностики сердечно-сосудистых заболеваний . Цель изобретения - повьшение точности способа и сокращение времени определения антиокислйтельной активности путем инкубации,добавления реагентов и спектрофотометрирования. Для этого дополнительно определяют отношение накопления малонового диальдегида на единицу объема сыворотки крови при двух различных количествах сьторотки в среде инкубации и рассчитьшают по формуле: (Eoi -Ец) хО,(Ео,-ЕО-0,1, где коэффициент антиокислительной активности; Еу - опт гческая плотность контрольной пробы; ЕО, -оптическая плотность опытной пробы для 0,1 мл сыворотки; EQ .j -оптическая плотность опытной пробы для 0,2 мл сьшоротки. Способ определения антиокислительной активности сьшоротки крови значительно упрощает проведение анализа, сокращает время определения с 6 ч до .. 1,5 ч и повышает точность определения . S сл
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
„„SU„„ I42Á5ÁSÙ А1: цп 4 С 01 Ы 33/48
H ABTGPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3706602/28-14 (22) 05.03.84 (46) 23.09.88. Бюл. У 35 (71) Львовский государственный медицинский институт (72) В.Б.Мартынюк, С.Н.Ковальчук и М.Ф.Тимочко (53) 616.07.(088.8) (56) Куликов В.Ю. и Молчанова Л.В.
Определение антиокислительной активности сыворотки крови.-Лабораторное дело, 1980, М 7, с. 419-421. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИОКИСЛИ-
ТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано в научноисследовательских лабораториях для проведения экспериментальных работ и в клинических лабораториях для диагностики сердечно-сосудистых заболеваний. Цель изобретения - повышение точности способа и сокращение времени определения антиокислительной активности путем инкубации,добавления реагентов и спектрофотометрирования.
Для этого дополнительно определяют отношение накопления малонового диапьдегида на единицу объема сыворотки крови при двух различных количествах сыворотки в среде инкубации и рассчитывают по формуле: Кдод= (Ep,, -Е„)х 0 2/) REо -Е ) 0 1) где Кдод - коэффициент антиокислительной активности; Е„ — оптическая плотность контрольной пробы; Ео, -оптическая плотность опытной пробы для 0,1 мл сыворотки; Е -оптическая плотность опыт. ной пробы для 0,2 мл сыворотки. Способ определения антиокислительной активности сыворотки крови значительно упрощает проведение анализа, сокращает время определения с б ч до
1,5 ч и повышает точность определения.
1425539
Для сыворотки с добавлением ГБН:
Е„=0,05; Ео 1 =О 167; Ео, =Оэ255;
К „,„1,30.
Следовательно, добавление к сыворопсе крови водорастворимого кофактора ферментативной антиокислительной системы (ГЯН) приводит к увеличению антиокислительной активности (К 4 ) с 1,15 до 1,30.
Формула изобретения (Е,, -Е„) 0,2 (К
АОА (Е,, -Е„) 0,1 — коэффициент антиокислительной активности;
- оптическая плотность контрольной пробы;
- оптическая плотность опыт-; ной пробы для О, 1 мп сыворотки„ вЂ” оптическая плотность для опытной пробы для 0,2 мл сыворотки. где К 4, 4
Ео, Составитель М.Позняк
Техред >,Äèäûê Корректор Г.Решетник
Редактор Г. Волкова
Тираж 847 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 4761/40
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород„ ул. Проектная, 4
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной и клинической биохимии, и может быть использовано для диагностики сердечно-сосу- 5 дистых заболеваний.
Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа.
Пример. Исследуют сыворотку крови, полученной из краевой вены уха беспородного кролика-самца массой 1,3 кг без добавления и с. добав лением восстановленного глутатиона ! (Г$Н) до конечной концентрапии 0,55 мМ, Инкубацию контрольной и опытной сыво- 15
, ротки крови (по 0,2 и Q„l мл), а
1 также соответствующих количеств дистиллированной воды, проводят s 3 мп . О,I М фосфатного буфера рН 7„4 в
125 мМ растворе хлористого калия. Че- 20, рез 10 и 5 мин последовательно добав; ляют 0,5 мл 1 мМ раствора перманганата калия, дважды по 0,5 мл 10 мМ, раствора закисного сернокислого железа и 1 мл 20%-ного раствора,трихлор". уксусной кислоты, Надосадочную жидкость инкубируют 20 мин при 95-100 С с 1 мл О, 7%-ного раствора тиобарбиту: ровой кислоты и 0,5 мл 1н. раствора соляной кислоты. Полученный окрашен ный продукт экстрагируют 3 мл н-бутанола и определяют оптическую плот-ность бутанолового слоя на спектрофотометре при длине волны 532 нм. Определение выполняют в течение 1,5 ч.
Для контрольной сыворотки получены величины оптической плотности Е ==
0,05> Ео =0ю 160 Еа =Oю275
К 4о4
Способ определения антиокислительной активности сыворотки крови, путем инкубации пробы и спектрофотометрирования малонового диальдегида, отличающийся тем, что,с целью повышения точности и ускорения способа, антиокислительную активность определяют последовательно в двух про. бах по отношению накопления малоново го диальдегида на единицу объема сыворотки крови в среде инкубации и рассчитывают по формуле

