Способ хроматографического разделения и анализа полярных липидов в тонком слое адсорбента

 

Изобретение относится к аналитической -химии и к тонкослойному хроматографическому разделению и анализу полярных ЛИПИДОВ. Целью изобретения является повышение селективности и эффективности разделения при высокой (более 50%) относительной влажности воздуха. Для этого слой адсорбента с нанесенной на него пробой разделяемой смеси активируют путем пропускания через него малополярного растворителя. Этот растворитель не растворяют и не смещают со стартовой точки компоненты анализируемой смеси. 1 з.п. ф-лы, 1 ил. ш (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕаЪБЛИК

„.SU«» (m 4 С 01 Н 30/90

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4135227/23-25 (22) 19.06.86 (46) 30.05.88. Бюл. У 20 (71) Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева (72) А.Г. Верещагин, А,В. Жуков и Э.И, Кузнецова (53) 543.544(088.8) (56) Ахрем А.А., Кузнецова А.И. Тонкослойная хроматография. М.: Наука, 1964.

D.Í. Van. Den.Eijnden. Continuous

flow TLC — à new technique Anal.

Biochemis try 57, р. 321-322, 1974. (54) СПОСОБ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ И АНАЛИЗА ПОЛЯРНЫХ ЛИПИДОВ

В ТОНКОМ СЛОЕ АДСОРБЕНТА . (57) Изобретение относится к аналитической .химии и к тонкослойному хроматографическому разделению и анализу полярных липидов. Целью изобретения является повьппение селективности и эффективности разделения при высокой (более 50%) относительной влаяности.воздуха. Для этого слой адсорбента с нанесенной на него пробой разделяемой смеси активируют путем пропускания через него малополярного растворителя. Этот растворитель не растворяют и не смещают со стартоЯ вой точки компоненты анализируемой смеси. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

1399667

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к тонкослойному хроматографическому разделению и анализу липидов.

Целью изобретения является повышение селективности и эффективности разделения при высокой относительной влажности воздуха.

На чертеже показана схема устрой- 10 ства для осуществления предлагаемого способа.

Хроматографическая камера 1 представляет собой стеклянный цилиндр высотой 180 мм, внутренним диаметром . 60 мм и толщиной стенки 2 мм. Крышка 2 камеры состоит из двух притертых к верхнему обрезу камеры и друг к другу отрезков стекла, все притер-тые поверхности смазаны глицерином 20 при предотвращения доступа в камеру влаги из окружающего воздуха. В крышке имеется отверстие, в котором укреплена тефлоновая трубка 3 для внесения в камеру активирующего раство- 25 рителя и подвижной фазы, трубка закрывается пробкой 4, Другое отверстие в крышке, закрываемое пробкой

5, предназначено для выхода газа из камеры при внесении в нее жидкостей.

С дном камеры соприкасается нижний обрез хроматографической пластинки

6, содержащей закрепленный на гибкой фольге слой силикагеля размером

150 ° 54 мм. Стартовые точки 7 пластинки содержат разделяемую смесь веществ 5

К пластинке с помощью зажимов прикреплена полоса фильтровальной бума:ги 8, верхняя часть которой выходит через щель в крышке эа пределы камеры.

Перед разделением в камеру через трубку 3 вносят 3 мл чистого и сухого диэтилового эфира, на время внесения эфира пробку 5 извлекают из отверстия. При прохождении эфира по поверхности адсорбента 6 и фильтровальной бумаги 8 происходит активирование слоя адсорбента за счет непрерывного растворения эфиром содержащейся в адсорбенте воды и постоянного выноса. ее из камеры. Сразу же после испарения эфира со дна камеры и с поверхности. пластинки в камеру через трубку 3 вносят 20 мл подвижной фазы — смеси хлороформа, ме- 55 танола и водного раствора аммиака (* = 0,905) в соотношении 30:7:1 по объему, что приводит к началу разделения смеси веществ (полярных липидов семян сои), которые в процессе активации тонкого слоя не элюировались эфиром со стартовой точки вследствие его малой полярности, Через

2 ч после внесения подвижной фазы пластинку извлекают и окрашивают по стандартной методике.

В результате разделения смеси полярных липидов получены хроматограммы N-ацилфосфатидилэтаноламина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилхолина, фосфатидилинозита.

В контрольных вариантах разделение проводили беэ предварительного активирования адсорбента эфиром. Разделение проводили при 407.-ной или

70Х.-ной относительной влажности воздуха в лаборатории, применяя подвижную фазу.

Видно, что при высокой влажности воздуха и без предварительного активирования слоя адсорбента эфиром разделение компонентов между собой практически не происходит. После проведения активирования по предложенному способу селективность разделения компонентов не отличается от достигаемой при низкой относительной влажности воздуха.

Способ может быть пригоден для разделения смесей не только липидов, но и любых других органических соединений, содержащих полярные функциональные группы.

Формула изобретения

Способ хроматографического.разделения и анализа полярных липидов в тонком слое адсорбента, включающий активирование адсорбента, нанесение пробы анализируемой смеси на слой адсорбента, разделение в потоке прдвижной фазы с постоянным удалением ее из верхней зоны тонкого слоя, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности и эффективности разделения при высокой относительной влажности воздуха, слой адсорбента активируют после нанесения на него пробы разделяемой смеси путем пропускания через него малополярного растворителя, не растворяющего липиды.

2 ° Способ по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве малополярного растворителя используют серный эфир.

1399667

Составитель Ю.Султанович

Техред М.Ходанич Корректор М. Шарошн,Редактор М.Бандура

Тирах 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Ра чаская наб,, д, 4/5

Заказ 2661/45

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ухгород, ул. Проектная, 4