Способ идентификации вида стафилококка

 

Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - увеличение точности способа. Культуру стафилококка смешивают с IgG-диагностикумом, антивидовыми и контрольными диагностикумами, соответствующими каждому из видовых. Результат реакции учитывают по образованию характерного агглютината. Эритроцитарный IgG-диагностикум готовят риванольным методом, а антивидовые - путем конъюгирования эритроцитов с антисыворотками с помощью амидола . При наличии агглютинации со всеми диагностикумами идентифицируют золотистый стафилококк с высоким содержанием белка А. При агглютинации с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или золотистый с низким содержанием белка А и Staphylococ- сцз intermedius. При агглютинации с диагностикумами и с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или Staphylococcus intermedius , содержащие белок А. (Л Ю | ;о О5 СП)

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 A 61 К 39 085

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3718188/28-14 (22) 04.04.84 (46) 23.11.86. Бюл. № 47 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней (72) П. Н. Дерябин, Б. В. Каральник и А. К. Акатов (53) 615.373 (088.8) (56) Каральник Б. В., Царевский Ю. П. и Шамардин В. А. Эритроцитарные белковые диагностикумы. А.-А., 1982. (54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВИДА

С ТАФ ИЛ О КОККА (57) Изобретение относится к медицине.

Цель изобретения — увеличение точности способа. Культуру стафилококка смешивают с IgG-диагностикумом, антивидовыми и контц„Я0„„1277966 рольными диагностикумами, соответствующими каждому из видовых. Результат реакцин учитывают по образованию характерного агглютината. Эритроцитарный IgG-диагностикум готовят риванольным методом, а антивидовые — путем конъюгирования эритроцитов с антисыворотками с помощью амидола. При наличии агглютинации со всеми диагностикумами идентифицируют золотистый стафилококк с высоким содержанием белка А. При агглютинации с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или золотистый с низким содержанием белка А и Staphylococcus intermedius. При агглютинации с IgGдиагностикумами и с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или Staphylococcus intermedius, содержащие белок А.

1277966

Изобретение. относится к медицине, в частности к иммунологическим способам определения бактерий.

Целью изобретения является увеличение точности идентификации различных видов рода Staphylococcus независимо от их штаммовой принадлежности и наличия белка А на основе определения поверхностных клеточных видоспецифических антигенов.

Поставленная цель достигается проведением реакции непрямой гемагглютинации анализируемой культуры стафилококка на стекле в течении 0,5 — 3 мин с различными иммуноглобулиновыми диагностикумами: эритроцитами, сенсибилизированными IgG человека (из нормальной сыворотки), эритроцитами сенсибилизированными антивидовыми стафилококковыми сыворотками и эритроцитами, сенсибилизированными контрольными нормальными кроличьими сыворотками от тех же кроликов до иммунизации. При агглютинации всех используемых диагностикумов идентифицируют BHlt, Staph.

aureus с высоким содержанием белка А; при агглютинации только антивидового диагнос10

20 тикуMa идентифицируют гомологичный вид

Staph. epidermidis, Staph. intenmedius или

Staph. aureus с низким содержанием белка А; при агглютинации IgG-диагностикума, антивидового диагностикума и отсутствии агглютинации других используемых диагностикумов идентифицируют гомологичный вид—

Staph. eridermidis или Staph. intermedius c наличием белка А.

30 только в отношении богатых протеином А штаммов золотистого стафилококка.

Способ осуществляют следующим образом.

Выделенную культуру стафилококка, подлежащую видовой идентификации, взятую 35 петлей с плотной питательной среды или в виде капли густой смеси (5 — 20 млрд микробных тел в 1 мл по оптическому стандарту), вносят в каплю каждого из диагностикумов, находящи хся на предметном стекле: I gG-диа гностикума, антивидовых диагностикумов (против Staph. aureus, Staph, epidermidis, Staph. intermedius), контрольных диагностикумов, соответствугцих каждому из видовых. Капли тщательно перемешивают петлей или стеклянной палочкой и учитывают результат реакции визуально через 0,5—

3 мин по образованию характерного агглютината. Используемый эритроцитарный 1флдиагностикум готовят риванольным методом, а антивидовые диагностикумы — — путем коныогирования эритроцитов с антисыворот- 50 ками с помощью амидола.

Положительная реакция всех использованных диагностикумов возможна при взаимодействии этих иммуноглобулинсодержащих препаратов с поверхностным протеином

А стафилококка. Такая реакция проявляется а

В этом случае идентифицируется золотистый стафилококк Staph. aureus с высоким содержанием белка А.

Положительная реакция антивидового диагностикума при отсутствии агглютинации других диагностикумов свидетельствует об отсутствии у идентифицируемого штамма протеина А, причем в этом случае вид стафилококка соответствует гомологичной сыворотке против Staph. epidermidis, Staph.

aureus или Staph. 1п(еггпедш

Реакция агглютинации IQ-диагностикума и одного из видовых диагностикумов при отсутствии агглютинации других диагностикумов свидетельствует о наличии стафилококка, гомологичного вида Staph. epidermidis или Staph. intermedius, но содержащего белок А.

Пример. Суспензии 25 штаммов стафилококка, выделенные от больных и носителей, анализировали перед описанным способом с использованием только антивидовых диагностикумов и по способу идентификации стафилококка независимо от вида с тремя типами диагностикумов. При определении вида ио агглютинации двух антивидовых антительных диагностикумов (против золотистого и эпидермального стафилококка) четыре культуры были отнесены к виду «Золотистый» и три к виду «Эпидермальный». Видовая принадлежность 18 культур не была определена из-за агглютинации обоих использованных типов диагностикумов. При определении вида с помощью трех типов диагностикумов 18 культур были отнесены к виду

Staph. aur eus с высоким содержанием белка

А; 4 культуры — к виду Staph. aureus без белка А, 3 культуры — к виду Staph. epidermidis. Доля идентифицированных штаммов повысилась с 28О по известному способу до 100Я, что свидетельствует о большей точности способа.

Способ идентификации вида стафилококка дает также дополнительную информацию о содержании белка Л у. исследуемых штаммов. Эти сведения, а также быстрота и высокая точность способа могут быть использованы для уточнения этиологии бактериальных заболеваний, вызываемых стафилококком и более обоснованного лечения больных.

Формула изобретения

Способ идентификации вида стафилококка путем определения видоспецифичных антигенов в реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитарными диагностикумами, сенсибилизированными антисыворотками к различным видам рода Staphylococcus, отличающийся тем, что, с целью увеличения точности способа, дополнительно для проведения реакции гемагглютинации используют контрольные эритроцитарные диагностикумы, сенсибилизированные I(1G человека из нормальной сыворотки и сенсибилизирован1277966

Составитель Л. Падюков

Редактор Г. Гербер Техред И. Верес Корректор М. Дсмннк

Заказ 6677/3 Тираж 660 По тоиснос

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ные нормальными сыворотками животных, являющихся продуцентам и антисывороток к различным видам стафилококка, и при наличии агглютинации со всеми диагностикумами идентифицируют Staph. aureus с высоким содержанием белка А, при агглютинации с антивидовыми диагностикумам и идентифицируют Staph. epidermidis, Staph. intermedius или Staph. aureus с низким содержанием белка А, при агглютинации с !

g G-диагностикумом и с антивидовыми диагностикумами идентифицируют Staph. epidermidis или Staph. intermedius, содержащее белок А.