Способ подготовки зимозана для иммунологических исследований
Изобретение относится к области окрашивания биологических образцов. Цель изобретения - повышение контрастности частиц зимозана в розеткообразующих структурах за счет окраски их генцианвиолетом при температуре кипения . К осадку зимозана добавляют 10%- - ный спиртовый раствор генцианвиолета. Окраску проводят при температуре кипения в течение 1-2 с. Затем во время центрифугирования промьшают 2-3 раза дистиллированной водой. Ползгченный осадок заливают раствором Люголя, ресуспендируют, кипятят 1-2 с, промывают 96-градусным этанолом 2-3 раза. Затем промывают дистиллированной .водой . Осадок докрашивают карболовым фуксином Циля, промывают физиологическим раствором и готовят 0,1%-ную суспензию зимозана, окрашенную в фиолетовый цвет. с (О ел I ю DO vj CD 4 СО
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИН (19) (И) 4
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
H АВТОРСКОМЪГ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3316730/14 (22) 09.07.81 (46) 15.06.86. Бюл, Р 22 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии Главного управления микробиологической промьпппенности (72) Т.Ф. Хилько (53) 616-0.88.8(088.8) (56) Меркулов Т.М. Курс патологогистологической техники, Л.: Медгиз, 1961, с. 215-2!8.
Гришина Т.И. Окрашивание частиц зимозана. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1978, 4, с. 503-506. (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ЗИМОЗАНА ДЛЯ
HMKYH0ll0I È×ÅÑÊÈÕ ИССЛЕДОВАН1й1 (50 4 0 01 Я 1/30 А 61 В 10/00 (57) Изобретение относится к области окрашивания биологических образцов.
Цель изобретения - ловьппение контрастности частиц зимозана в розеткообразующих структурах за счет окраски их генцианвиолетом при температуре кипения. К осадку зимозана добавляют 10Хный спиртовый раствор генцианвиолета.
Окраску проводят при температуре ки. пения в течение 1-2 с. Затем во время центрифугирования промывают 2-3 раза дистиллированной водой. Полученный осадок заливают раствором Люголя, ресуспендируют, кипятят 1-2 с, промывают 96-градусным этанолом 2-3 раза.
Затем промывают дистиллированной .водой. Осадок докрашивают карболовым фуксином Циля, промывают физиологическим раствором и готовят 0,1Ж-ную суспензию зимозана, окрашенную в фиолетовый цвет.
1237943
Техред В.Кадар Корректор Г. Решетник
Редактор Н. Швыдкая
Заказ 3281/43 Тираж 778 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Изобретение относится к окрашиванию биологических образцов, используемых в клинической и экспериментальной иммунологии.
Пелью изобретения является повыше. ние контрастности частиц зимозана в розеткообразующих структурах за счет окраски их генцианвиолетом при температуре кипения в течение 1-2 с.
Способ осуществляют следующим образом.
К осадку зимозана, полученного центрифугированием 5 мл 0,1Х-ной взвеси зимозана в течение 5 мин при
200 g, добавляют 0,5 мл )07.-ного спиртового раствора красителя (генцианвиолет), окраску проводят при температуре кипения в течение 1-2 с, затем промывают 2-3 раза дистиллированной водой центрифугированием в течение 3 мин при 200 g. Полученный осадок заливают 1 мл раствора Люголя, ресуспендируют и доводят до кипения, кипятят 1-2 с, промывают 9б-градусным этанолом 2-3 раза до полного просветления надосадочной жидкости центрифугированием в течение 3 мин при
200 g и снова в том же режиме промывают 2-3 раза дистиллированной водой. Полученный осадок докрашивают
1 мл карболового фуксина Циля в течео ние 2 мин при 70-80 С, вновь промывают в прежнем режиме 2-3 раза физио.логическим раствором хлорида натрия и готовят в нем же 0,1Х-ную суспенэию окрашенного в фиолетовый цвет зимозана, Процесс окрашивания занимает 30 мин.
Пример I. У больного аллергодерматозом в стадии ремиссии при определении рецепторов иммуноглобулиновой природы по известному способу было выявлено 38,57. несущих эти рецепторы лимфоцитов, а при использовании предварительно окрашенного зимозана по предлагаемому способу — 407..
Пример 2, При исследовании
1О 1функционального состояния основных популяций иммунокомпетентных клеток у здорового человека по известному способу было выявлено 9Х В-лимфоцитов, а при использовании окрашенного
15 зимозана по предлагаемому способу—
9,5 .
Частицы зимозана в процессе окрашивання приобретают интенсивный фиолетовый цвет. Полученная окраска
10 прочная и не смывается спиртами, альдегидами, ксилолом и ацетоном. Процесс окрашивания не токсичен ° формула изобретения
Способ подготовки зимозана для иммунологических исследований путем его окраски красителем и промывки в воде, отличающийся тем, что,.с целью повышения контрастности частиц зимозана в розеткообразующих структурах, окраску проводят генцианвиолетом при температуре кипения в течение 1-2 с, далее обрабатывают раствором Люголя при той же температуре в течение 1-2 с, затем последовательно промывают в 96-градусном спирте и: воде.
