Способ получения фибринолитически активного сырья

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1

„„SU„„1233873 дц 4 А 61 К 35/14

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3608239/28-14 (22) 20.06.83 (46) 30.05.86. Бюл. № 20 (71) Московский городской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н. В. Склифасовского (72) В. Б. Хватов, Т. К. Платонова, О. А. Маркова и И. Н. Кулагин (53) 615.771. 6(088.8) (56) Методы получения максимально возможного количества костного мозга и крови от трупов. Л.: МЗ СССР, 1982, с. 23. (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИ АКТИВНОГО СЫРЬЯ путем введения в артериальное русло трупа промывного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и его специфической активности, в сонную артерию трупа вводят 9 в 12 л нагретого до 50 — 55 С промывного раствора под пульсирующим давлением 180/160—

160/140 мм рт. ст., а целевой продукт концентрируют из перфузата этанолом в конечной концентрации 17 — 20 об.0 0 при рН 6,9—

7,1 и температуре от — 4 до — 6 С.

1233873

Составитель Л. Лртюш ина

Техред И. Верес Корректор В. 01-.яга

Тираж 660 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 1 3035, Москва, Ж вЂ” 35, Рауш= ая наб., д. 415 филиал ППП «Патент», r. Ужгород, ул. Г!роектная, 4

Редактор A. Гулько

Заказ 2712/3

Изобретение относится к медицине и может использоваться для получения лечебного препарата тромболитического действия.

Целью изобретения является повышение выхода и специфической активности фибринолитически активного сырья.

Способ поясняется следующим примером.

Заготовку «цельной» крови от внезапно умерших осуществляют в соответствии с действующей инструкцией. Для этого, при соблюдении всех правил хирургической асепгики и антисептики, в операционной производят кожный разрез на шее трупа, выделяют сосудистый пучок и в яремную вену вставляют две стеклянные канюли: У-образную по направлению к голове и прямую— к сердцу. Обе канюли фиксируют в вене прочными лигатурами. Противоположный конец каждой канюли заблаговременно соединен с отводящими резиновыми трубками, свободный конец которых соединен с иглами из нержавеющей стали, которыми прокалывают пробки стерильных флаконов. Труп переводят в положение Транделенбурга, и кровь (1,0 — 1,5 л) самотеком истекает во флаконы, содержащие цитрат натрия. Таким образом осуществляют заготовку «цельной» фибринолитически активной крови от внезапно умерших людей. В последующем стол с трупом переводят в горизонтальное положение. На трубки, соединенные с канюлями, вставленными в яремную вену, накладывают зажимы, а в общую сонную артерию вводят отдельно стеклянную канюлю, соединенную через резиновую трубку с перфузионным аппаратом, который заполняется стандартной промывной жидкостью следующего состава, г: сахароза 800; глюкоза

60; цитрат натрия двухамещенный 35; сульфацил натрия 10; риванол 0,1; вода для инъекций до 10 л. В качестве перфузионного устройства используется аппарат для искусственного кровообращения, имеющий перистальтический насос, датчики давления, приспособления для автоматизированного нагревания и поддержания заданной температуры промывного раствора. Далее зажимы с трубок от яремной вены снимают, включают перистальтический насос, и подогретый до 50 — 55 С «промывной» раствор под

5 пульсирующим давлением 180/16 — 160/

/140 мм рт. ст. нагнетают в сонную артерию.

После введения 9 — 12 л промывного раствора через 15 — 20 мин из яремной вены получают 5 — 8 л перфузата, который истекает в стандартные стерильные флаконы для !

О крови.

Полученный перфузат подвергают центрифугированию при 3000 оо/мин в течение

20 — 30 мин при 4 — 6" С. г!адосадочную жидкость отсасыва1от, охлаж, а!о д ; 0 С в рсак тОрЕ И ЗатЕМ МЕДЛЕННО Прн l!0ÑòoÿÈÍ0Ì Перемешивании добавляют предваритг.-.ьпо охлажденный до — 10 С 539 „ -ный эта:o.i до конечной концентрации 17 — 20Я, рН смеси доводят до 6,9--7,1 добавлением 0,5 >f МаО г1.

Смесь постепенно охлаждают от — 4 до — боС и оставляют при такой температуре на 6 — 12 ч. Осадок отделяют центрифугированием при 5000 об/мин в течение

30 мин при температуре от — 3 до — 5 С, подвергают лиофилизации или сохраняют в замороженном состоянии от — 20 до — 30-С

25 до его использования. В дальнейшем осадск, содержащий концентрат ферментов фибринолиза, подвергают обработке для получения тромболитического средства в соответствии с известным методом.

Получаемое фибриноли-.ически активное

30 сырье представляет собой обогащенную бета-глобулинами фракцию плазмы крови внезапно умерших людей. В нативном виде это пастообразная масса белого цвета, после лиофилизации — порошок. Это сырье обладает выраженной фибринолитической активдз ностью, что позволяет использовать его для получения фибринолитического препарата.

Активаторная фибринолитическая активность полученного сырья составляет 1 — 2

ФЕ/мг, что эквивалентно 250 — 500 МЕ/г

40 стрептазы. От одного трупа можно заготовить 6000 в 12000 ФЕ (15 --3:0 млн МЕ стрептазы).