Способ массового разведения нематод-мермитид rомаnомеrмis culicivorax rотн and sмiтн
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК (19) (11) А (дц 4 А 01 К 67/00 (13
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ASTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ вИЫ,иИ(1Т .. (ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3756777/30-15 (22) 20. 06. 84 (46) 23.11.87. Бюл. Р 43 (71) Институт медицинской паразито— логии и тропической медицины им. E,È. Марциновского (72) В.В. Владимирова, Е.А. Прияанцева и А,Н. Алексеев (53) 614.449 (088.8) (56) Petersen.J.J. Observation on
the mass production of Romanomermis
Culicivorax, à nematode parasite of
mosquitoes. — Mosquito News, 1978, ч. 38, N- 1, р. 83-86. (54) (57) СПОСОБ МАССОВОГО РАЗВЕДЕНИЯ
НЕМАТОД-МЕРМИТИД ROYANOMERMIS CULICIV0RAX ROTH. AND SMITH, включающий заражение личинок комаров предпаразитическими личинками нематод, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода нематод и сокращения трудозатрат при разведении личинок комаров, в качестве личинок используют личинки комаров Culex pipiens molestus, полученный из автогенных кладок, а заражение личинок комаров предпаразитическими личинками нематод осуществляют в соотношении (1:4)-(1:6).
1225064
Изобретение относится к области медицинской паразитологии, а именно, к биологическому методу борьбы с паразитическими насекомыми.
Целью изобретения является повышение выхода нематод и сокращение трудозатрат при разведении личинок"комаров.
Пример 1. Для культивирования мермитид используют личинки комаров лабораторной культуры Culex pipiens molestus (штамм Московского государственного университета), Кладки коыаров собирают, подсчитывают количество яиц в них и помещают в эмалированные кюветы (33х26х4 см) с дехлорированной водопроводной водой.В каждой кювете заражают от 1 до 5 тыс.личинок комаров 1-2-го возраста.
Для этого заливают препарат мермитид водой определенного объема (обычно 50-200) мл для получения предпаразитических личинок. Препарат представляет собой песок с содержащимися в нем самцами, самками и яйцами мермитид. Через 2-3 ч эту воду сливают, тщательно перемешивают, берут
10 капель по 0,1 или по 0,05 мл на дно чашки Петри и определяют число предпаразитических личинок в одной пробе под бинокуляром. Например, в одной пробе содержится: 7, 16, 11, 9, 12., 20, 11, 6, 8, т.е. всего 113 личинок следовательно, в среднем
Ь
11,3 экз,в 0,05 мл, тогда в 100 мл воды их содержится 22,600. Если в каждой пробе (0,1 или 0,05 мл) содержится больше 20 предпаразитических личинок, то объем воды, налитой в препарат, следует увеличить в 2-3 ° раза.
Для заражения личинок комаров в соотношении i:4 (хозяин: паразит) берут приблизительно 5500 личинок 2ro .возраста (5400 .100) в кювете и добавляют к ним воду с предпаразитическими личинками. Сравнение продукции Romanomermis culicivorax npu различных соотношениях заражения хозяин:паразит приведено в табл.
На следующий день зараженных личинок комаров рассаживают по 15002000 экзеыпляров в кюветы размером
44 х 33 х 4 см. Кормят личинок пив-. ными или гидролиэными дрожжами, воду в кюветах периодически аэрируют с помощью микрокомпрессоров МК-Л12.На седьмые-восьмые сут. зараженных личинок комаров сливают на сито, промывают и оставляют сито с личинками в сосуде с водой, закрепив его на расстоянии 3-5 см от дна сосуда.
По мере выхода из личинок комаров постпаразитические личинки мермитид проходят через сито и опускаются на
10 дно сосуда. Их затем сливают в меньшие сосуды, повторно промывают водой несколько раз, осушают фильтровальной бумагой, взвешивают и помещают в стеклянные чашки или кристаллиза15 торы (диаметром 60-100 мм). На дне чашек находится промытый и прокипяченный речной песок (размер частиц
0,4-1,6 мм). Слой песка в 1,5-2 см покрытый водой, толщина водного слоя
20 0,1-0,2 см. Через 2-3 дня излишки воды оттягивают из песка пипеткой и ставят чашки с мермитидами на храо нение в термостат при 26 С. Через
4-5 недель препарат. мермитид можно залить водок для получения предпаразитических личинок. После первого залива препарата и выплода из него личинок производят повторные заливы с интервалами 3-5 дней. Можно эа30 ливать препарат в любое время после истечения 4-5 недель хранения его в термостате (см. табл.).
Пример 2. Заражение личинок в соотношении хозяин-паразит как
1:5 проводят так же, как описано в примере 1. Для заражения, например, 2000 личинок берут 10000 предпаразитических личинок мермитид (см.табл.).
Пример 3. Для заражения
40 личинок комаров в соотношении 1:6 берут соответствующее число предпаразитических личинок и проводят все оцерации," как описано в примере 1 (см. табл.).
Пример 4. Заражение личинок комаров в соотношении 1;10 проводят аналогично, масса продукции, получаемая в результате опыта, оказывается меньше, чем масса продукции при мень50 ших величинах соотношений хозяин:паразит (см. табл.).
Пример 5. Заражение личинок комаров в соотношении 1:3 проводят, как в предыдущих случаях, масса про55 дукции постпаразитических личинок оказывается меньше (см. табл.)..
Пр им е р 6и 7. Заражение 1:7 и 1:10 проводят так же, масса продукции постпараэитов тоже меньше, чем
3 1225064 ф масса предлагаемых оптимальных соот- самцы. Этим объясняется повышение ношениях хозяин: паразит (см. табл. ) . массы продукции мермитид при эаражеВ результате заражения личинок . нии 1:4 — 1:6, При увеличении числа комаров мермитидами пропорция полов самок повышается число отложенных (самки/самцы) при соотношении 1:4 — 5 ими яиц и, следовательно, эффективI:6 составляла 1/1-1/5, а при соот- ность препарата. ношении 1:10 она увеличивалась до В результате опытов из каждой ты1/10-1/30,при повышении этого соот- сячи зараженных личинок комаров Синошения она будет еще выше. Самки . lex pipiens molestus получали в средмермитид весят в 2-25 больше, чем 10 нем 607 мг взрослых мермитид. !
Сравнение массы продукции мермитид Еошапошепп1в си1(с1чогах при различных соотношениях заражения хозяин:паразит
Прототип
Новый способ
Параметры
Вид комара
Culex pipiens molestus
Culex pipiens
quninquefaacihtus
Соотношение хозяин/паразит 1:3
1 7 !т10 1:12 1 ° 13 1 14 1!15
5 ll 29 28 40 3
I. 4 I!5 1:6
Число опытов 7
8 13 11
Экстенсивность заражения (2 паразитизма) 75
79 . 73
73
75 80 85 88 о
Продукция мермитид из,l тыс. личинок (мг) 470+52 620+60 590+65 613+68 506+58 512+53 440 495 480 535
Соотношение полов в потомст1/2-1/3 1/2-1/5 1/I- 1/5 1/2-!/4 1/3-1/15 !/ 10- I/30 ве
Абсолютный выход самок (мг) 157- !17е5 207- 103 290 98 204 122э5 126@531 ° 6 4 е5-16в5
Составитель В. Горб атовский
Редактор С. Рекова Техред А.Кравчук Корректор О. Кравцова
Заказ 5910 Тираж 628 Подписное
ВИИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москве, И- 35, Раушская наб.; д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4


