Способ диагностики респираторных вирусных инфекций

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) ива А 61 В 10/ОО

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ. 13

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3694610/28-.1 4 (22) 20.01 84 (46) 07.02.86. Бюл.М 5 (71) Курский государственный медицинский институт (72) В.В.Волкова и С.В.Телков (53) 615.373(088.8) (56) Левина Е.Н. Иммунофлюоресценция в медицине. 1977, с.106. (54)(57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ путем обработки исследуемого материала специ. фической иммунофлюоресцирующей сывороткой с последующим определением наличия специфического свечения,о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, в качестве исследуемого материала используют мочу, собранную через 3-4 ч после приема 1-2 капсул бенемицина.

1209171

Составитель Т. Козлова

Редактор M. Бланар Техред О.Ващишина Корректор Т.Колб

Тираж б59 По,цписное

ВНИИПИ 1 осударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, И-35,, Раушская наб., д.4/5 Заказ 337/7 ьилиал ПИП "Патент", г.Ужгород, ул. Проектная, Изобретение относится к медицине в частности иммунологии, и может быть использовано в диагностике острых и латентных респираторных вирусных инфекций.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим об— разом.

У больного после приема 2 капсул бенемицина через 3-4 ч собирается моча. На три предметных стекла наносятся пастеровской пипеткой толстые капли мочи: на,первое, второе предметные стекла наносят по три капли, на третье предметное стекло — две капли.

Мазки высушивают при комнатной температуре под вентилятором или на воздухе, после просушки помещают в стаканчики с фиксатором (ацетон на а

10-15 мин при +4 С), затем отмывают в.чашке Петри в течение 15 мин в холодном забуферном физиологическом растворе с обязательной 3-х кратной сменой буфера (промывание и фиксация о производятся на холоде при +4 С).

После промывания в буферном растворе мазок слегка просушивают с помощью фильтровальной бумаги и приступают к окраске иммунофлюоресцирующими сыворотками: гриппозной Al A2, Е, парагриппозной 1,2,3 типов, респираторно-синтициальной, аденовирусной.

Затем помещают во влажную камеру . (чашки Петри1 с проложенной влажной фильтровальной бумагой и ставят на

30 мин в термостат при 37 С.

Для удаления избытка флюорохрома и несвязанной сыворотки препарат тщательно промывают холодным забуфе1 ренным физиологическим раствором о при +4 С в течение 30-40 мин с трехкратной сменой раствора буфера.

Просушенный мазок покрывают чистым покровным стеклом и микроскопируют с иммерсионной системой, используя объектив 90 и окуляр 7. Для предупреждения аутофлюоресценции вместо обычно о иммерсионного масла используется диметилфталат.

Бенемицин (рифампицин, рифамицин) хорошо всасывается из желудочно-кишечного тракта. Максимальная концен трация его в крови определяется через 2-4 ч, препарат окрашивает мочу эпителиальные и другие клетки.

Результаты иммунофлюоресцентного исследования учитывают по интенсивности специфического свечения антигенов в исследуемом материале по общепринятой шкале. Положительным результатом считается наличие в препарате 5-10 клеток с интенсивностью свечения в ++++, +++.

Пример. Больнои Т-ев В.П., )2 года. Заболел неделю назад, появился сухой кашель, насморк, недомогание, повысилась температура тела о до 37,6, со второго дня отмечает осиплость голоса. Обнаружено." дыхание везикулярное, зев гиперемирован, задняя стенка лотки зернис- тая. .оны сердца приглушены, пульс

< 2 уд. в минуту, А/Д вЂ” 140/70 мм рт. ст. Иммунофлюоресцентное исследова1 ние носоглоточных смывов — отрицательное. Иммунофлюоресцент :oe исследование мазков из мочи проводилось после приема одной капсулы бенемицина внутрь„ через 3 ч. При микроскопии выявлены антигены вируса парагриппа.

Таким образом, предлат аемый способ повышает точность диагностики острых респираторных вирусных инфекций в 1,1 .раза (100%, по сравнению с известным,85,1%) и в 45% случаев позволяет исключить латентную инфек цию.