Способ определения вирусной этиологии заболевания
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью ускорения и снижения травматичности, из венозной крови вьщеляют моноциты , определяют наличие в них вирусных включений и рассчитывают. коэффициент поражения моноцитов по формуле а -1 + 2п 2 +3пз 4п4 где п - количество моноцитов; п - количество моноцитов, содержащих 3-7 включений; п - количество моноцитов, содержащих 8-12 включений) nj - количество моноцитов, содержащих 13-15 включений; п - количество моноцитов, цитоплазма которых полиостью заполнена вирусными включениями , при .величине коэффициента поражения 0,9-4,0 определяютвирусную этиологию заболевания.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТМЙ (2 1 ) 3666096/28-14 (22) 23. 11. 83 (46) 23. 08. 85. Бюл. 1P - 31 (72) Л. В. Филев, С.Ф. Енохин и Ю. В.Медведев (53) 616. 07 (088. 8) (56) Баринский И.Ф,, Шубладзе А.К. Лейкоцитарные культуры в вирусологических исследованиях, М,:Медицина, 1980, с.!76. Авторское свидетельство СССР Ф 944546, кл, А 61 В 10/00, 1979. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ путем ис" следования крови, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью уско. рения и снижения травматичности, из венозной крови выделяют моноциты, определяют наличие в них ви„„SU„„1 3?3993 A русных включений и рассчитывают . коэффициент поражения моноцитов но формуле а + 2n +Зпз + 4n fly и где n - количество моноцитов; и - количество моноцитов, содержащих 3-7 включений; и " количество моиоцитов, содержащих 8-12 включений1 n — количество моноцитов, содержащих 13-15 включений; n4 - количество моноцитов, цитоплаэма которых полностью заполнена вирусными включениями, при .величине коэффициента поражения 0,9-4,0 определяют, вирусную этнологию заболевания. 1173993 Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике вирусных заболеваний. Целью изобретения является ускорение и снижение травматичности способа. Способ осуществляют следующим образом. Иэ венозной крови выделяют моно« циты, Затем определяют в них наличие вирусных включений. Количество вирус" ных включений определяют путем анализа под ьжкроскопом моноцитов, прокрашенных .литиевым Кармином Орта. Анализ проводят следующим образом.15 3-5 мп венозной крови центрифугируют 5-7 мин при 1500 об/мин. После этого в чашку Петри наливают 1-2 мл питательной среды (среды 199, Игла или Хенкса ), добавляют 0,25 мл взве",20 си верхнего слоя клеток, состоящего кз лейкоцитов, затем содержимое пе-, ремешивают и инкубируют при 37 С в течение 1 ч, После этого сливают не25 прилипшую суспензию клеток, чашку промывают физиологическим раствором, сушат и фиксируют в парах 4%-ного формалина в течение 20 мин. После фиксации чашку Петри промывают водой или физиологическим раствором в течение 3 мин, а затем прокрашивают прилипшую фракцию клеток в течение 15 мин, литиевым Кармином Орта. Краску смывают и дно чашек заливают раствором Орсеина, после 35 чего промывают водой, заливают на 15 мин 1%-ным спиртовым раствором соляной кислоты, еще раз промывают проточной водой и высушивают. После этого производят микроско- 40 пическое исследование клеток под микроскопом (ядра клеток красного цвета ). Затем рассчитывают коэффициент поражения моноцитов по формуле 45 nq +2ng +Зпз +4п IleP где n - количество (общее)моноцитов;I n . - количество моноцитов содер- 5О 1 жащих 3-7 вирусных включений; и — количество моиоцитов, со2 держащих 8-12 вирусных вклю. чений; 55 n - количество моноцитов, содер5 жащих 12-15 винусных включений: n — количество моноцитов, цитоплаэма которых полностью saполнена вирусными включениями, и диагностируют вирусное поражение при коэффициенте поражения 0,9-4. В реальных условиях максимальное значение коэффициента составило 2,52,6. Однако теоретически эта величина может быть равна 4,0. Пример 1. По укаэанной методике проводят анализ содержания вирусных включений в моноциты и вироциты у больных, подозреваемых на заболевание вирусным гепатитом А и Б. В табл.1 и 2 приведены показатели вирусемии при острых гепатитах ВиА.. Серологическое подтверждение при вирусном гепатите В было получено на 3 дн. позже, т.е. установле" ние вирусной этиологии заболевания помогло своевременной госпитализации, изоляции больных и назначению соответствующей терапии. Наличие заболевания острым вирусным гепатитом А во всех случаях подтверждено клинической картиной заболевания и отсутствием положительных результатов серологических I испытаний на гепатит В. Как видно иэ данных представленных табл.1 и 2, при вирусных гепатитах обнаруживается резкое повышение процента моноцитов, содержащих включения, а также коэффициента поражения моноцитов. Количество вироцитов и коэффициент их поражения вирусными включениями оказались менее показательными. Пример 2. Больной М., в течение 1,5 лет страдал хроническим часто рецидивирующим уретритом и простатитом. Неоднократно проводимая антибактериальная терапия была неэффективной. Быпи исследованы вирусные включения в крови, которые оказались повышенными (табл.3 ). В табл.3 приведены показатели вирусемии больного М. В результате проведенного исследования больному M.был поставлен диагноз: вирусный уретрит,вирусный простатит и назначено,противовирусное лечение. После проведенного терапевтического лечения явления уретрита и простатита исчезли через три недели пос1 l 73993 Т аблица l Процент маноцитов содержащих вирусные включения 4 I 116 . C0,05 8е511э5 6 Коэффициент поражения .моноцитов О ° 5М,08 6 1,ЫО ° 6 <0,05 l2 4тоР 10i5,7 )0,05 Коэффициент поражения вироцитов 1,Ы0,5 70,05 1,5t0,01 6 41 5 И 1,6 <0,05 8,5+1,5 6 Коэффициент поражения моноцитов 0,51 0,008 6 1 ° 64+0129 <0 05 12 >0,05 8,323,0 410,6 Коэффициент поражения вироцитов 1,6+О, 14 >О, 05 1,5+0,009 6 12 ле йачала лечения, При амбулаторном наблюдении в течение трех месяцев обострений хронического уретрита и хронического простатита не было. Пример 3. Больная Н. Клинически и рентгенологически диагностирована острая очаговая пневмония в нижней доле справа (прикорневая ). Изучение показателей вирусемии позволило поставить диагноз: острая очаговая пневмония вирусной этиологии. После чего было назначено проКоличество пораженных вироцитов íà 100 моноцитов Процент моноцитов, содержащих вирусные включения Количество пораженных вироцитов на 100 моноцитов тивовирусное лечение, которое через 12 дн. ликвидировало явления пневмонии (клинически и рентгенологически ). В табл.4 приведены покаg . .затели вирусемии у больной Н. Изобретение позволяет быстро и надежно диагностировать наличие вирусного заболевания и обеспечивает 10 надлежащее лечение при достаточно широком спектре заболеваний и . снизить IlpH этом травматичность. 1173993 Таблица 3 Показатели(в кро ного Процент моноцитов с вирусными включениями 8,5 1,5. Коэффициент поражения моноцитов 0)5+0)08 0,9 Количество пораженных .вироцитов на 100 моноцитов 4+0,6 Коэффициент пораженных вироцитов l,5+0,09 1,2 КоличеcTBо разрушенных клеток 4,711,4 5,1 Таблица4 Показатели В нор больной Процент моноцитов с вирусными включениями 8,5+1,5 Коэффициент поражения моноцитов 0,5+0,08 1,24 Количество пораженных вироцитов на 100 моноцитов 4 0,6 Коэффициент поражения вироцитов 1,5f0,09 1,4 Количество разрушенных клеток на 100 4, 7 )1,4 6,3 моноцитов Заказ 5088/3 Тираж 722 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5. Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 Составитель В.Чистяков Редактор О..Черниченко Техред С.Мигунова Корректор Л.Бескид
