Способ окраски гистологических препаратов

 

СПОСОБ ОКРАСКИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ с ,помощью . основного коричневого, отличающийся тем, что, с целью одновременного выявления структурных элементов различного генеза на одном препарате, ткань замораживают, готовят срезы и после нанесения красителя помещают в дистиллированную воду, а окраску проводят в 1Х-НОМ растворе основного коричневого в течение 60-70 мин..

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

q g G 01 N 1/28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3641829/28-13 (22) 09.09.83 (46) 07.07.85. Бюл. № 25 (72) Н. И. Вержбицкая (71) Калининский ордена Трудового Красного Знамени политехнический институт (53) 615.475 (088.8) (56) Волкова О. В., Елецкий Ю. К. Основы гистологии с гистологической техникой. М., «Медицина», 1982, с. 248 — 251.

ÄÄSUÄÄ 1165921 (54) (57) СПОСОБ ОКРАСКИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ с,помощью . основного коричневого, отличающийся тем, что, с целью одновременного выявления структурных элементов различного генеза на одном препарате, ткань замораживают, готовят срезы и после нанесения красителя помещают в дистиллированную воду, а окраску проводят в 17-ном растворе основного коричневого в течение 60 — 70 мин.

1!

Изобретение относится к гистологии и медицине, связано с микроскопической техникой и применяется при выявлении структурных компонентов органов и тканей различного генеза.

Цель изобретения — одновременное выявление структурных элементов различного генеза на одном препарате.

Способ осуществляется следующим образом.

Берут исследуемый материал, помещают в 12Я-ный раствор нейтрального формалина.

Фиксируют 3 сут и более, т. е. срок хранения в фиксаторе не ограничен. Промывают в проточной воде комнатной температуры 1—

5 ч. Споласкивают в дистиллированной воде. На замораживающем микротоме готовят срезы толщиной 15 — 50 мкм и помещают их в чашку со свежей дистиллированной водой. Когда все срезы подготовлены и собраны в чашке с дистиллированной водой, их помещают в бокс с 17о-ным водным раствором основного коричневого на 60—

70 мин. Затем срезы извлекают, промывают в дистиллированной воде 3 — 5 мин, помещают на предметное стекло, расправляют, промокают бумажным фильтром и заключают в глицерин.

На окрашенном препарате четко и чисто выявляются элементы разного генеза: нервы, клеточные и неклеточные элементы тканей, их структурно-функциональные отношения и связи.

Пример 1. При вскрытии кошки через

20 мин после воздействия электрическим током или магнитным полем берут образец (кожа, подкожные мышцы и т. д.), фиксируют в 12Я-ном нейтральном формалине

3 сут, промывают образцы в проточной воде

1 — 5 ч, споласкивают их в дистиллированной воде. Готовят на замораживающем микротоме срезы толщиной 15 — 50 мкм и переносят 50 — 70 срезов в чашку Петри с чистой дистиллированной водой, а затем в солонку с красящим раствором (1Я-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.

Промывают срезы в дистиллированной воде 3 — 5 мин.

65921

Помещают срез на предметное стекло, расплавляют его и промокают бумажным фильтром. Заключают в глицерин.

При микроскопическом изучении срезов установлены реактивные изменения нервных волокон, полнокровие сосудов и распад лаброцитов.

Заключение: используемые параметры воздействия превышают предельно допустимые дозы и вызывают структурные нару10 шения

Пример 2. При патологоанатомическом вскрытии обнаружены признаки нарушения течения процесса регенерации. Кусочек органа с изменениями фиксируют в 12Я-ном нейтральном формалине 3 сут. Промывают образец в проточной воде 1 — 5 ч, споласкивают в дистиллированной воде. Готовят на замораживающем микротоме срезы толщиной 15 — 30 мкм, переносят срезы в чашку

Петри с чистой дистиллированной водой на время подготовки всего количества срезов, а затем в солонку с красящим раствором (1Я-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.

Промывают образец в дистиллированной воде 3 — 5 мин, помещают срезы на предмет25 ное стекло, расправляют их, промокают бу мажным фильтром и заключают в глицерин.

При микроскопическом изучении срезов установлены фрагментация нервных волокон, слабое развитие и фрагментация нервных волокон около раны.

Прокрашивание в 1Я-ном водном растворе основного коричневого менее 60 мин не позволяет выявить все структуры, более

70 мин — делает фотографию темной, и наглядность резко ухудшается.

Окрашенные предлагаемым способом срезы не нуждаются в дополнительной дифференцировке и поэтому промываются в дистиллированной воде в течение 3 — 5 мин для удаления остатков красителя.

Окрашивание в 1о-ном водном растворе

40 основного коричневого позволяет исключить применение реактивов, которые могут оказать разрушающее воздействие на какиелибо элементы исследуемых структур, что позволяет получить целостное представление об органе.

Редактор О. Головач

Заказ 4300/34

Составитель С. Квчкачева

Техред И. Верес Корректор А. Тяско

Тираж 897 Поднисное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам Изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4