Способ определения четвертичных алкалоидов

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АЛКАЛОИДОВ путем экстрагирования органическими растворителями из водных экстрактов растительного материала в присутствии противоанионов с последующим спектрофотометрированием, отличающийся тем, что, с целью раздельного определения четвертичных бензофенантридиновых и протобербериновых алкалоидов , в качестве органического растворителя используют хлороформ, в качестве противоаниона используюттрихлорацетат при массовом соотношении трихлоруксусная кислота: .растительный материал не менее 1:200 и дополнительно обрабатывают экстракт окисью алюминия при массовом соотношении с растительным материалом 2:1.

СО1ОЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3651869/28-13 (22) 11.10.83 (46) 15,06.85. Бюл. № 22 (72) Г. Н. Бузук, М. Я. Ловкова, А. А. Булатов, Н. А. Кузьмичева и Н. И. Гринкевич (71) Ордена Ленина институт биохимии им. А. Н. Баха (53) 547.94-615.32 (088.8) (56) Chatteu L. G., Okamura К. О. Assay

of quaternary ammonium compounds in чаrious dosage forms by acid-dye method.—

J. Pharm. Sci., 1973, 62, № 8, 1328 — 1331. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АЛКАЛОИДОВ путем экстра.,Я0„„1161115 А

4Ш А61 35 78 гирования органическими растворителями из водных экстра ктов растительного материала в присутствии противоанионов с последующим спектрофотометрированием, отличающийся тем, что, с целью раздельного определения четвертичных бензофенантридиновых и протобербериновых алкалоидов, в качестве органического растворителя используют хлороформ, в качестве противоаниона используют трнхлорацетат при массовом соотношении трихлоруксусная кислота: .растительный материал не менее 1:200 и дополнительно обрабатывают экстракт окисью алюминия при массовом соотношении с растительным материалом 2:1.

1161115

10 го

Составитель Н. Гуляева

Техред И. Верес Корректор М. Самборская

Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент>, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Н. Швыдкая

Заказ 3879/9

Изобретение относится к фармацевтической химии и биохимии вторичных природных соединений,,в частности к исследованию и анализу алкалоидов, и может найти применение в биохимии и физиологии растений, лекарственном растениеводстве, а также при контроле качества лекарственных препаратов, изготовляемых на основе алкалоидов.

Целью изобретения является раздельное определение четвертичных бензофенантридиновых и протобербериновых алкалоидов.

Пример. Точную навеску (1г) измельченного сухого растительного материала помещают в коническую колбу на 50 — 100 мл, смачивают 2 мл 25Я-ного раствора аммиака, закрывают пробкой и выдерживают в течение 15 — 30 мин. Затем добавляют 25 мл хлороформа. перемешивают и оставляют на

16 — 17 ч при комнатной температуре.

Полученный экстракт отфильтровывают через стеклянный фильтр № 1 и 15 мл фильтрата испаряют досуха на водяной бане под вакуумом. Сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа, прибавляют 10 мл

Зо-ного водного .раствора уксусной кислоты и встряхивают в течение 3 — 5 мин.

Полученную эмульсию центрифугируют до полного расслоения в течение 5 в 10 мин при

5000 в 10000 об/мин.

К 4 мл верхнего слоя центрифугата прибавляют 0,5 мл 5о-ного водного раствора трихлоруксусной кислоты и экстрагируют

2Х 5 мл хлороформа. Полученные хлороформные экстракты по мере их получения в течение 2 — 3 мин при перемешивании фильтруют при отсасывани и. Осадок на фильтре, дополнительно промывают 5 мл хлороформа. Объединенные фильтраты подкисляют 1 каплей концентрированной НС1 и растворитель отгоняют досуха на водяной бане. Сухой остаток количественно растворяют в 10 мл ЗЯ-ного водного раствора уксусной кислоты при нагревании в течение

1 — 2 мин на водяной бане, затем раствор охлаждают до комнатной температуры и спектрофотометрируют при Л.-. 430 нм (бензофенантриди ны) в кювете 3= 10 м м.

В качестве раствора сравнения используют водный раствор уксусной кислоты.

Осадок на фильтре дополнительно экстрагируют 2Х4 мл этанола и фильтруют при отсасывании. Объем фильтрата доводят .ло 10 мл и спектрофотометрируют при

430 нм (протоберберины) в кювете

1=10 мм. В качестве раствора сравнения используют эт анол.

Расчет результатов определения проводят по формуле

Ск. Do V) V,ç V4 ° 1,104 100

Х Н Г V2 Ä—. О М О0 б где Vi — залито хлороформа для экстракции, мл;

Чг — объем хлороформного экстракта, взятого для испарения, мл;

Ч5 — объем спектрофотометрируемого раствора, мл;

V4 — объем уксуснокислого водного

15 раствора очищенной суммы алкалоидов, мл;

V — объем водного раствора сум мы алкалоидов, взятых для определения, мл;

Н вЂ” навеска растительного материала, г;

 — потеря в массе сырья при высушивании при 105, Я;

Ск — концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

9 — среднее значение оптической плот25 ности стандартного раствора;

Do — среднее значение оптической плотности опытного раствора.

Стандартный раствор четвертичных бензофенантридинов, состоящий из смеси сангвинарина и хелеритрина в соотношении 1:1, который готовится заранее из чисгых препаратов алкалоидов, содержит вещества

10 мкг/мл и имеет оптическую плотность 0,15. Оптическая плотность опытного раствора, содержащего бензофена нтридины, 35 равна 0,17. Потея в массе сырья при высушивании составляет 10Я.

Подставляя значения в формулу, получаем

Х вЂ” 10 0 — 17 — 25 10 10 1 — 104 100

1 0,15 15 4 ° 10000(100 10) 40

= 0,058 /

Таким образом, содержание четвертичных бензофенантридиновых алкалоидов в данном образце сырья составляет 0,058 /о, 45 Предлагаемый способ позволяет селективно определять четвертичные бензофенантридины и протоберберины в растительном материале с хорошей точностью и достоверностью.