Способ вакуумной лиофильной сушки суспензий микроорганизмов
СПОСОБ ВЛЮГУМНОЙ ЛИОФИЛЬНОЙ СУШКИ СУСПЕНЗИЙ МИКРООРГАНИЗМОВ при их предварительном эаморахиванииу отлич ающийся тем, что, с целью повьшения бисхпогической активности конечного продукта, суспензию перед замораживанием насыщают инертным газом с.диаметром пузырьков 2-3 мм.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СО1.1ИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
y )g Г 26 В 5/06, В О1 д 37/32.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Целью изобретения является повы- шение биологической активности ко нечного продукта, Цель достигается тем, что в способе вакуумной лиофильной сушки суспензий микроорганизмов суспеизию перед замораживанием насыцают инертным газом с диаметром пузырьков 2-3 мм. С
Скорость подачи газа подбирается в 4Р зависимости от вязкости суспеиэии с таким расчетом, что при максимальной скорости подачи газа не происходит (, выброса биологического материапа.Как правило, оптимальная линейная ско рость подачи составляет 25-35 м/мин. В качестве инертного газа использует- 3 ся азот, гелий, аргон или другой по-. Ь добный газ. Время насыщения определяется в зависимости от объема суспензии и составляет, как правило, по:рядка 3-10 мин. Насышенная пузырьками
:инертного газа суспензия подвергается
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГНКТ СССР (21) 3633409/06 (22) 12.08.83 ,(46) 15.04.91. Бюп. и 14 (7.1) Всесоюзный научно- исследовательский институт особо чистых биопрепаратов (72) А.И. Кобатов, С.А.Антонова и О.Ф,Егоров (53) 66.047.48(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
В 566097, кл. У 26 В 5/06, 1975.
Патент Англии М 1587409 кл. F 4 С, опублик, 1981
Изобретение относится к области прикладной микробиологии, а именно к способам получения высокоактивных сухих биопрепаратов.
Известен способ лиофнльной сушки биологических материалов.
Недостатком известного способа является необходимость введения в материал посторонних добавок, оказывающих в ряде случаев негативное влияние на свойства получаемых биологических материалов.
Известен способ вакуумной лиофильной сушки суспензий микроорганизмов при их предварительном заморажи.вании.
Данный способ является наиболее близким к изобретению по поставленчой цели и достигаемому результату.
Недостатком известного способа является низкая биологическая активность конечного продукта, „,Я0„„1130070 А 1
2 (54) (57) СПОСОБ ВАКУУИНОИ. ЛИОФИЛЬНОИ
СУШКИ СУСПЕНЗИЙ ИИКРООРГАНИЗИОВ при их предварительном замораживании,, о т л и ч а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения биологической активности конечного продукта, суспенэию перед замораживанием насыщают инертным газом с,диаметром пузырьков
2-3 мм.
1130070
Таким образом, изобретение позволяет повысить биологическую активность сухого препарата с 58/ до 87/ и не требует дополнительных затрат на переоборудование типовых сублимационных, манин.
ТехРед Л.олейник КОРРектоР Л.латай
Редактор О.Юркова
Заказ. 1892 Тираж 436 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,!01 замораживанию и высуниванию под вакуумом на стандартной установке и при ст андартных условиях.
Принципиальным отличием от сущест5 вующих способов высунивания является насыщение биопрепарата перед замораживанием пузырьками инертного газа.
Благодаря использованию предварительного насыщения суспензии микроорганизмов пузырьками инертного газа удается добиться повышения биологической активностй биопрепарата с 60-70/ до 90-95%. Это явление связано с тем, что введение пузырьков газа в суспен- 15 зию позволяет в ходе высушивания из бежать явления "коллапса", отрицательно действующего на биологическую активность препарата.
Пример 1. Концентрированную биомассу из клеток Е.coli M-17, выра-! щенных на глюкозо-минеральной питательной среде и взятых на стационар.ной Фазе роста, разбавляют фиэиолоГи.ческим раствором и стандартной средой 25 высушивания в соотношении объемов
1:1:.!. Состав среды высушивания: 10% лактоэы, 1/ декстрина, IX тиомочевины и 1/ аскорбиновой .кислоты.
Полученчую суспензию перемешивают 30 на магнитной мешалке 1 ч. После перемешивания часть суспензии насыщают азотом. Диаметр пузырьков азота в суСпензии 2-3 мм, скорость пропускания азота 30 м/мин. Динамическая вязкость
35 суспензии клеток 6,7 спз. Оставшуюся ненасыщенную суспензию используют для контроля. Затем проводят определение исходной биологической активности контрольной суспензии и суспензии, насыщенной азотом. Исходная активность составляет 7»10 кое/г 6,8 х 10Н кое/г.
Все данные.по биологической активности приведены в пересчете на 1 r cyхого биопрепарата и представляют со-, 45 бой усредненные данные по пятипараллельным раститровкам. После определения исходной биологической активности весь материал замораживают в сублимационной. Глубина з амораживания
-25 С. После замораживания материал подвергают сублимационному высушиванию под вакуумом, составляющим
120 мкм рт. ст. Продолжительность высушивания 24 ч, конечная температура препарата 20ОС. После сушки вторично определяют активность двух препан ратов, которая составляет 4,2»10 кое/
/гр у контрольного образца и 6, х ,х I p кое/г у образца, предварительно насыщенного азотом. Следовательно, у контрольного образца имеем 60/-ную выживаемость, у опытного — 90X-ную выживаемость.
Пример 2, Последовательность опыта аналогична приведенной. Скорость пропускания азота через суспензию клеток 25 м/мин. Активность препарата в данном опыте выражена следующими значениями: у контрольного
»10 кое/г, после сушки 5,6 10 "кое/г.
Выживаемость у данного препарата составляет 90/
1I р и м е р 3. Последовательность опыта аналогична описанной в примере
1. В качестве инертного газа используют гелий со скоростью пропускания
35 м/мин. Активность препарата выражается следующими значениями. У контрольного образца до сушки 7,2»
»1О кое/г, после сушки 3,9»1pì кое/r. выживаемость составляет 54X.. Для образца, насыщенного гелием, до сушки
7,1» 10 кое/r, после сушки 5,8 » л10 кое/г. Выживаемость составляет (4
827.
